(UL)
  • Vloga avtofagije pri odpornosti celic kronične limfocitne levkemije na zaviralce receptorske poti celic B = The role of autophagy in the resistance of chronic lymphocytic leukemia cells to the B-cell receptor pathway inhibitors : enoviti magistrski študijski program Farmacija
    Jelesijevič, Špela
    Ena izmed najpogostejših vrst levkemije v Sloveniji je kronična limfocitna levkemija (KLL). Zdravljenje je pred nekaj leti potekalo še z uporabo standardne kemoimunoterapije, sedaj pa kot prvo linijo ... zdravljenja uporabljajo tarčna zdravila. V magistrski nalogi smo se posvetili zaviralcem receptorske poti celic B, in sicer zaviralcem BTK (ibrutinib in akalabrutinib) ter zaviralcem PI3K (idelalizib in duvelizib). Zaradi pomanjkanja ustreznih modelov za preučevanje odpornosti na tarčna zdravila, smo na začetku raziskovanja vzpostavili klinično relevantne in vitro modele odporne KLL. S testom metabolne aktivnosti PrestoBlue in pretočno citometrijo smo potrdili, da so kloni selekcioniranih celic HG-3 odporni na tarčna zdravila. Ker smo želeli raziskati vzrok odpornosti celičnih linij, smo nato ovrednotili nivo bazalne avtofagije v dovzetnih in odpornih celicah HG-3. Z analizo proteinov avtofagije AMBRA 1, p62, LC3 in BECN-1 smo ugotovili, da je bazalna avtofagija v odpornih celicah HG-3 povečana. Na podlagi tega smo se nato odločili, da podrobneje proučimo receptorske poti, ki jih zavirajo tarčna zdravila, in avtofagijo. Ugotovili smo, da tarčna zdravila zavirajo signalni poti BTK/Akt/mTOR in PI3K/Akt/mTOR in tako aktivirajo avtofagijo. Dodatno smo s pretočnim citometrom na zajetje slike pokazali, da tarčna zdravila ne prožijo prenosa TFEB v jedro celic KLL, s tem pa ne vplivajo na prepis avtofagnih genov. Učinkovitost izbranih zaviralcev avtofagije, dorzomorfina, MRT68921, VPS34-IN 1 in klorokina, smo preverili na celičnih linijah MEC-1, MEC-2 in HG-3 ter na primarnih celicah KLL s testom metabolne aktivnosti. Na podlagi vrednosti EC50 smo ugotovili, da zaviralci avtofagije delujejo koncentracijsko in časovno-odvisno citotoksično, na celice KLL pa deluje najbolj citotoksično zaviranje ULK1 s spojino MRT68921. Zaviralci avtofagije delujejo na celice KLL neodvisno od genetskih sprememb tudi proti vzorcem z napovedno neugodnimi spremembami, npr. del(17p) in nemutiranim IGHV. S korelacijo vrednosti EC50 zaviralcev avtofagije in tarčnih zdravil smo v nadaljevanju ugotovili, da obstajajo povezave med delovanjem ibrutiniba, akalabrutiniba in duveliziba z VPS34-IN 1. Ker tarčna zdravila aktivirajo avtofagijo, smo na koncu ovrednotili še smiselnost uporabe zaviralcev avtofagije v kombinaciji s tarčnimi zdravili. Sinergizem zaviralcev avtofagije in tarčnih zdravil smo zasledili pri kombinacijah MRT68921, dorzomorfinu in klorokinu s tarčnimi zdravili, za VPS34-IN 1 pa zgolj pri kombinaciji z zaviralci BTK. S tem smo pokazali smiselnost ciljanja avtofagije za izboljšanje učinkovitosti tarčnih zdravil pri zdravljenju KLL.
    Vrsta gradiva - magistrsko delo ; neleposlovje za odrasle
    Založništvo in izdelava - Ljubljana : [Š. Jesenijevič], 2022
    Jezik - slovenski
    COBISS.SI-ID - 114079747

Knjižnica Signatura – lokacija, inventarna št. ... Status izvoda
Fakulteta za farmacijo, Ljubljana Knjižnica
emšf 616 JELESIJEVIČ Š. Vloga 1111
IN: 0017302 		prosto - za čitalnico
loading ...
loading ...
loading ...

Vnos na polico