Faculty of Pharmacy, Lj. (FFALJ)
-
Predstavitev ektodomene eritropoetinskega receptorja na nitastem bakteriofagu za detekcijo mimetikov eritropoetina = Filamentous bacteriophage display of the erythropoietin receptor ectodomain for detection of erythropoietin mimetics ; enoviti magistrski študij farmacijeCetin, SandraEritropoetin je protein, ki spodbuja eritropoezo in tako povečuje oksiformno kapaciteto krvi. Slednja korelira s fizično vzdržljivostjo, zaradi česar nekateri športniki posegajo po različnih ... rekombinantnih eritropoetinih, kljub prepovedi s strani Svetovne antidopinške organizacije. Najbolj problematična je uporaba t.i. mimetikov eritropoetina - snovi, ki se, strukturno gledano, bistveno razlikujejo od eritropoetina, imajo pa eritropoetinu podoben fizološki učinek. Obstoječe analizne metode namreč niso sposobne dokazovanja prisotnosti le teh v bioloških vzorcih športnikov, saj temeljijo na dokazovanju snovi znane strukture ali na posredni potrditvi dopinga preko dolgotrajnega spremljanja določenih parametrov v krvi ali urinu. Namen magistrske naloge je priprava in vrednotenje univerzalne testne platforme za detekcijo mimetikov eritropoetina v bioloških vzorcih športnikov, ne glede na njihovo strukturo. Testna platforma temelji na bakteriofagih M13, ki na svoji površini predstavljajo ektodomeno eritropoetinskega receptorja (EpoR). Fage v testni platformi uporabljamo kot alternativo primarnim protitelesom v dveh ločenih encimskoimunskih testih (ELISA). ELISA1 z imobiliziranimi ligandi za EpoR omogoča detekcijo fagov z nezasedenimi EpoR, ELISA2 z imobiliziranimi protitelesi anti-c-myc pa odraža delež fagov z zasedenimi EpoR. Razmerje signalov ELISA1/ELISA2 nakazuje na prisotnost oz. odsotnost mimetikov eritropoetina, pri čemer višje vrednosti nakazujejo na vzorec brez mimetikov, nižje pa na prisotnost mimetikov. Fage smo pripravili tako, da smo genski konstrukt za eritropoetinski receptor vstavili v fagmidni vektor in ga nato vstavili v kompetentne celice ter izvedli superinfekcijo s pomožnim fagom. Po izolaciji rekombinantnih fagov M13-EpoR smo funkcionalnost predstavljenega receptorja potrdili s testom ELISA. V nadaljevanju smo določili optimalne koncentracije fagov, ligandov za eritropoetinski receptor ter protiteles za uporabo v testni platformi. Pri preskušanju testne platforme z uporabo umetnega matriksa, ki oponaša biološke vzorce, smo ugotovili, da test ELISA1 zanesljivo loči neoporečen vzorec (brez mimetikov) od sumljivega vzorca (z mimetikom). Kljub temu celotna platforma ni dala željenih rezultatov, saj so odzivi pri testu ELISA2 bili visoki, ne glede na prisotnost mimetikov eritropoetina. Na podlagi rezultatov preskušanja odstranitve fagov s paramagnetnimi kroglicami smo sklepali, da znaten delež fagov predstavlja okrnjen fuzijski protein na svoji površini, in sicer myc-tag brez EpoR, zaradi česar se fagi vežejo na protitelesa anti-c-myc v testu ELISA2, kljub temu da nimajo EpoR. Za izboljšanje testa ELISA2 predlagamo prestavljanje myc-tag-a na skrajni N-konec izraženega EpoR.Type of material - master's thesis ; adult, seriousPublication and manufacture - Ljubljana : [S. Cetin], 2019Language - slovenianCOBISS.SI-ID - 4764273
Author
Cetin, Sandra
Other authors
Bratkovič, Tomaž, farmacevt |
Molek, Peter
Topics
Eritropoetin |
Doping |
predstavitev na bakteriofagu |
detekcija dopinga |
eritropoetin |
mimetiki eritropoetina |
bioanalizne metode
![loading ... loading ...](themes/default/img/ajax-loading.gif)
Call number – location, accession no. ... |
Copy status | Reservation |
---|---|---|
Knjižnica emšf 0000000061 CETIN SANDRA Predstavitev 0000000734 IN: 0016248 Knjižnica emšf 61 CETIN SANDRA Predstavitev 734 IN: 0016248 |
available - reading room
|
![loading ... loading ...](themes/default/img/ajax-loading.gif)
![loading ... loading ...](themes/default/img/ajax-loading.gif)
![loading ... loading ...](themes/default/img/ajax-loading.gif)
Shelf entry
Permalink
- URL:
Impact factor
Access to the JCR database is permitted only to users from Slovenia. Your current IP address is not on the list of IP addresses with access permission, and authentication with the relevant AAI accout is required.
Year | Impact factor | Edition | Category | Classification | ||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP |
Select the library membership card:
If the library membership card is not in the list,
add a new one.
DRS, in which the journal is indexed
Database name | Field | Year |
---|
Links to authors' personal bibliographies | Links to information on researchers in the SICRIS system |
---|---|
Cetin, Sandra | ![]() |
Bratkovič, Tomaž, farmacevt | 23598 |
Molek, Peter | 32431 |
Source: Personal bibliographies
and: SICRIS
Select pickup location:
Material pickup by post
Delivery address:
Address is missing from the member's data.
The address retrieval service is currently unavailable, please try again.
By clicking the "OK" button, you will confirm the pickup location selected above and complete the reservation process.
By clicking the "OK" button, you will confirm the above pickup location and delivery address, and complete the reservation process.
By clicking the "OK" button, you will confirm the address selected above and complete the reservation process.
Notification
Automatic login and reservation service currently not available. You can reserve the material on the Biblos portal or try again here later.
Subject headings in COBISS General List of Subject Headings
Select pickup location
The material from the parent unit is free. If the material is delivered to the pickup location from another unit, the library may charge you for this service.
Pickup location | Material status | Reservation |
---|
Reservation in progress
Please wait a moment.
Reservation was successful.
Reservation failed.
Reservation...
Membership card:
Pickup location: