Solucija etanolnog ekstrakta propolisa miješana je sa prahom cink-oksida, prahom kalcijevog oksida i kalcijevog hlorida, u cilju pravljenja paste za prekrivanje zubne pulpe. Dobijene paste ispitivane ...su metodom tankoslojne hromatografije, u cilju otkrivanja eventualno novonastalih hemijskih spojeva između solucija propolisa i pomenutih supstanci. Naša (ispitivanja su pokazala da propolis ne stupa u hemijsku reakciju sa testiranim supstancama. Izvođene su i brojne oksiaromatske kiseline, koje pored ostalih komponenata čine
propolis farmakološki aktivnom supstancom.
Kardiovaskularne bolesti su vodeći uzrok smrtnosti u svijetu, a jednim od glavnih rizičnih čimbenika za njihov razvoj smatra se hiperlipidemija. Postoji nekoliko skupina hipolipemika, a najvažniji su ...statini, jedni od najčešće propisivanih lijekova uopće. Oni djeluju kao reverzibilni kompetitivni inhibitori HMG-CoA reduktaze, enzima koji katalizira limitirajući korak u biosintezi kolesterola. Svi statini još uvijek nemaju službene farmakopejske monografije, pa postoji velika potreba za razvojem analitičkih metoda za njihovu identifikaciju i određivanje sadržaja u aktivnim ljekovitim tvarima i gotovim ljekovitim oblicima. Terapija statinima je svakodnevna i dugoročna, pa je procjena njihove čistoće od velikog značaja, odnosno razvoj selektivnih i osjetljivih metoda za karakterizaciju, identifikaciju i određivanje sadržaja onečišćenja je neophodan.
Crvena fermentirana riža sadrži 14 monakolina koji imaju hipolipemički učinak, a najvažniji je monakolin K, poznat kao lovastatin. Na tržištu se nalaze brojni dodaci prehrani s crvenom fermentiranom rižom. Nažalost, nadležne nacionalne agencije diljem svijeta upozoravaju na lošu kvalitetu dodataka prehrani te potrebu za njihovim pojačanim nadzorom i redovitom kontrolom.
Cilj ovog istraživanja stoga je bio razviti nove, brze, selektivne, osjetljive, precizne i točne analitičke metode za identifikaciju i određivanje sadržaja statina, karakterizaciju i kvantifikaciju onečišćenja atorvastatina, najčešće korištenog lijeka iz skupine statina, te određivanje aktivnih i toksičnih sastavnica crvene fermentirane riže. U radu su korištene sofisticirane analitičke tehnike: kapilarna elektroforeza (CE), tekućinska kromatografija visoke djelotvornosti (HPLC) i masena spektrometrija (MS). Ukupno je razvijeno, validirano i uspješno primijenjeno 6 novih analitičkih metoda. Predložena CE metoda predstavlja jedinstvenu brzu analitičku metodu za analizu bilo kojeg od šest statina registriranih u Europskoj uniji. Određen je sadržaj četiriju onečišćenja atorvastatina te je strukturno karakterizirano i identificirano još osam prisutnih onečišćenja primjenom HPLC-DAD-MSn metode. Rezultati provedene analize proizvoda s crvenom fermentiranom rižom pokazuju značajna odstupanja u sadržaju lovastatina od deklariranih vrijednosti te između pojedinih serija proizvodnje, što upućuje na potrebu za strožom, detaljnijom i češćom kontrolom, u svrhu osiguranja djelotvornog, sigurnog i kvalitetnog proizvoda.
Cardiovascular diseases are the leading cause of death in the world and one of the major risk factors for their development is considered hyperlipidemia. Statins are most commonly used drugs in the treatment of hyperlipidemia, and are one of the most often prescribed drugs in general. Statins act by competitively inhibiting HMG-CoA reductase, the rate limiting enzyme in the cholesterol biosynthesis. Not all statins have official pharmacopoeia monographs, so new analytical methods for their identification and determination in active pharmaceutical ingredients and finished drug products are highly required. Statin therapy is long-term and they are used on daily basis, so their purity assessment is of great importance. Hence, development of selective and sensitive methods for characterization, identification and determination of their impurities is indispensable.
Red fermented rice contatins 14 monacolins with hypolipemic effect, and the most important one is monacolin K, also known as lovastatin. There are numerous dietary supplements containing red fermented rice on the market. Unfortunately the relevant national agencies around the world warn of dietary supplements' poor quality and the need for their increased supervision and regular inspection.
Therefore, the aim of this research was to develop new, fast, selective, sensitive, precise and accurate analytical methods for the identification and determination of statins, characterization and quantification of atorvastatins impurities, which is the most commonly used statin drug, and determination of active and toxic ingredients in red fermented rice. Highly sophisticated analytical techniques were used: capillary electrophoresis (CE), high performance liquid chromatography (HPLC) and mass spectrometry (MS). In total 6 new analytical methods were developed, validated and successfully applied. The proposed CE method represents a universal fast analytical method for the analysis of any of the six statins registered in the European Union. The content of four atorvastatin impurities was determined and eight other impurities were structurally characterized and identified by HPLC-DAD-MSn method. The results of the red fermented rice products analysis indicated significant deviations in lovastatin content from declared values and among different batches. This suggests the need for tighter, more detailed and more frequent control in order to ensure effectiveness, safety and quality of these products.
Razvijena je točna, osjetljiva i selektivna reverzno-fazno micelarna kromatografska metoda za simultano određivanje benzilnog alkohola i benzaldehida. Ta metoda je primijenjena u injekcijskim ...pripravcima diklofenaka, piroksikama, linkomicina i klindamicina. U koncentracijskom području 10100 i 120 μg mL1 postignuta je izvrsna linearnost s granicom detekcije (S/N = 3) 0,25 μg mL1 (2,3 × 106 mol L1) i 0,12 µg mL1 (1,13 × 106 mol L1) za benzilni alkohol, odnosno benzaldehid. Metoda je uspješno primijenjena za analizu benzilnog alkohola i benzaldehida kao čistih supstancija s analitičkim povratom 100.1 ± 1.0% za benzilni alkohol i 100.4 ± 1.6% za benzaldehid te za određivanje benzilnog alkohola i benzaldehida u injekcijskim pripravcima s analitičkim povratom 99.8 ± 0.3 i 100.0 ± 0.4%.
Leaves and stems of the Urtica pilulifera var. dodartii were homogenized in cold 80% methanol and extracted several times during 48 hours. The separation of the compound was achieved on paper ...chromatography and an Amberlite CG-50 column. The identification was based on comparisons of Rf values and colour reactions with the authentic sample of serotonin.
Leaves and stems of the Roman nettle were frozen and homogenized in cold methanol (+3°C) and extracted several times with the same solvent.
The separation of the compound was achieved on the ALOa ...(Activity II—III, Merck) column. The indole alkaloid bufotenine was identified by comparison of Rf values and colour reactions with authentic sample of bufotenine.
U radu se vrednuje brza i osjetljiva metoda za određivanje niskih koncentracija lorazepama u serumu. Lorazepam je izoliran iz seruma ekstrakcijom diklormetanom, zajedno s nordazepamom, koji je ...upotrebljen kao interni standard i zatim određivan visokotlačnom tekućinskom kromatografijom. Kromatografskim razdjeljivanjem na reverzno-faznoj koloni sa stacionarnom fazom s niskom aktivnošću silanola dobiveni su potpuno simetrični signali faktorom završnog povlačenja 1,0. Granica određivanja u serumu je 2,5 ng mL-1 za lorazepam i interni standard. Metoda je brza i dovoljno osjetljiva za određivanje lorazepama u serumu.
Embriji zrelih sjemenaka oraha Juglans regia ssp. fallax ekstrahirani su metanolom. Gornji masni sloj je nakon centrifugiranja odbačen, a donji istraživan kromatografijama na papiru i tankom sloju ...SiO2. Dio ekstrakta je propuštan preko ionskog izmjenjivača amberlita CG-50, a solno-kiseli eluat u kojem se nalazio biogeni amin uziman je za spektro; spektrofotometrija; fotometrijska i spektrofluorimetrijska i kromatografska određivanja. Utvrđeno je da supstancija u ekstraktu po svojim karakteristikama odgovara autentičnom uzorku 5-hidroksitriptamina odnosno serotonina i da se nalazi u tkivu u koncentraciji od 95 μg x g-1 svježe tvari.
Lokalizacija serotonina u tkivu utvrđena je p-dimetilaminobenzal- dehidom s kojim ovaj biogeni amin daje plavo obojenje, dok s ninhi- drinom u octenoj kiselini daje zelenkasto-plavu fluorescenciju pod UV svjetloću.
Sastav i količina flavonoida određeni su u listovima i plodovima planike – Arbutus unedo L., sabranima na dva nalazišta u Hrvatskoj. Tankoslojnom kromatografijom utvrđena je prisutnost kvercitrina, ...izokvercitrina, hiperozida i rutina u svim uzorcima listova, dok su plodovi sadržavali samo izokvercitrin. Klorogenska kiselina je dokazana samo u nekim listovima. Količina flavonoida bila je uvjetovana biljnim organom, datumom, te zemljopisnim položajem mjesta sabiranja. Spektrofotometrijska je analiza pokazala da listovi sadrže veću količinu flavonoida (0.52-2.00%) u usporedbi s plodovima (0,10-0,29%).
Polipeptid od 35 kDa podrijetlom iz srednjega crijeva krpelja Rhipicephalus haemaphysaloides prvi put je izdvojen postupkom imunoafinitetne kromatografije rabeći imunoglobulinske ligande dobivene ...imunizacijom kunića. Ukupno 12 bijelih novozelandskih kunića bilo je pokusno imunizirano ubrizgavanjem pročišćenoga antigena pomiješanog s Freundovim adjuvansom. Humoralni odgovor bio je određen imunoenzimnim testom. Nakon izazivačke infestacije imuniziranih kunića uočene su značajne razlike u odnosu na kontrolnu skupinu. U imuniziranih kunića ustanovljen je manji broj krpelja, njihova manja težina te smanjena plodnost nasisanih ženki. Rezultati su pokazali učinkovitost od 83,3% što pokazuje da je imunosni odgovor na antigen srednjega crijeva od 35 kDa potaknuo dovoljan imunosni odgovor za kontrolu infestacije krpeljom Rhipicephalus haemaphysaloides.
