Ekspresija in čiščenje rekombinatnega humanega importina ▫alfa 1 in alfa 3▫
Golob, Eva
Importin igra pomembno vlogo pri prenosu proteinov v celièno jedro. Prepoznava in veze specifièna zaporedja na proteinih, imenovana nuklearni lokalizacijski signali, ki jih nosijo proteini, namenjeni ...v jedro. Importinje lahko vpleten tudi v bolezenska stanja. Dokazali so njegovo vlogo vkancerogenezi, povezali pa so ga z razmnozevanjem virusov.V èloveskem organizmu obstaja veè izoform importina , ni pa se povsem znano, kaksne vlogeimajo posamezne izoforme. K boljsem razumevanju njihovega pomena bi pripomogle strukture teh izoform, ki pa se niso bile doloèene.Namen diplomske naloge je bil ekspresija in èisèenje dveh izoform humanega importina Č 1 in3. S tem bi pripravili podlago kasnejsi doloèitvi strukture teh dveh proteinov s kristalizacijo.Delo smo prièeli s transformacijo plazmidov v gostiteljske celice, saj nam je plazmide z vstavljeno kodirajoèo sekvenco za oba proteina odstopil laboratorij dr. KØhler-ja iz Nemèije. Zaporedjema so dodali histidinski podaljsek, ki olajsuje izolacijo zelenega proteina. Ekspresija je bila uspesna, a kolièina izrazenega proteina je bila majhna, priekspresiji importina 3 pa sta se pojavila dva proteina s histidinskim podaljskom. Mozen vzrok za te pojave je redka uporaba nekaterih kodonov s strani E. coli. Ekspresijo smo tako ponovili z uporabo posebnega plazmida, ki kodira doloèeno tRNA, ki sodeluje pri translaciji za E. coli redkih kodonov. Uporabili smo tudi druge celiène linije ter tip gojisèa. Ekspresija je bila uspesna, prav tako èisèenje. Proteina kljub temu ni bilo dovolj za kristalizacijo. V nadaljnjem delu bo potrebno povisati konèno koncentracijo proteina, saj je ta pomembna za uspesno doloèitev strukture.
Type of material - undergr. thesis
; adult, serious
Publication and manufacture - Ljubljana : [Golob E.], 2001
It was not necessary to add the material to the shelf.
Bibliographic material was successfully added on shelf.
Adding bibliographical material on shelf was not successful.
Material is already on the shelf.
Permalink
URL:
Impact factor
Access to the JCR database is permitted only to users from Slovenia. Your current IP address is not on the list of IP addresses with access permission, and authentication with the relevant AAI accout is required.
Year
Impact factor
Edition
Category
Classification
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
Select the library membership card:
DRS,
in which the journal is indexed
Database name
Field
Year
Links to authors' personal bibliographies
Links to information on researchers in the SICRIS system
Subject headings in COBISS General List of Subject Headings
Select pickup location
The material from the parent unit is free. If the material is delivered to the pickup location from another unit, the library may charge you for this service.
