DIKUL - logo
(UL)
  • Ugotavljanje pogostosti mutacije K285N v genu za galaktoza-1-fosfat uridiltransferazo v slovenski populaciji = Determination of the frequency of the K285N mutation of the galactose-1-phosphate uridyltransferase gene in Slovenian population : diplomska naloga
    Gržinič, Neda
    Galaktozemija je vrojena presnovna bolezen, ki nastane zaradi okvare enega od encimov presnovne poti galaktozeČ galaktokinaze, galaktoza-1-fosfat uridiltransferaze (GALT) ali ... UDP-galaktoza-4-epimeraze. Najbolj pogosto se pojavlja okvara na encimu GALT zaradi mutacij v genu za GALT, ki lezi na krajsi roèici 9. kromosoma in ima oznako 9p13. Naloga GALT encima je katalizapretvorbe galaktoznega v glukozni presnovek. Glede na stopnjo okvare GALT loèimo veè oblik galaktozemij. Najbolj pogosto se pojavlja Duarte oblika z mutacijo N314D, ki predstavlja milo obliko bolezni. Pri èrni rasi se pojavlja skoraj izkljuèno èrnska oblika galaktozemije z mutacijo S135L in 10% aktivnostjo GALT v jetrih. Najbolj resno obliko galaktozemije, s popolno odsotnostjo aktivnosti GALT encima, predstavlja klasièna galaktozemija, kateronajpogosteje povzroèata mutaciji Q188R in K285N. Klinièni znaki klasiène oblike galaktozemije se pojavijo takoj po rojstvu, ko zaène novorojenec uzivati mleko. Mleko vsebuje disaharid laktozo, ki jo prebavni encim b-galaktozidaza cepi na glukozo in galaktozo. Galaktoza se zaradi motenepresnove ne more presnavljati naprej po normalni uridin-nukleotidni poti, kar povzroèi zaostajanje toksiènih presnovkov v organizmu in nadaljnji potek presnove po alternativnih poteh. Toksièna presnovka galaktitol in galaktoza-1-fosfat v organizmu povzroèata razliène tezave in poskodbe, kot so bruhanje, diareja, zaostajanje v rasti, zlatenica, hepatomegalija, ascites, edeme, okvare ledvic, katarakte. Posledica nezdravljenja galaktozemije je smrt, ki jo najpogosteje povzroèi okuzba z Escherichio coli. Edino uèinkovito zdravljenje je takojsnja uvedba brezgalaktozne diete, s katero odstranimo akutne znake galaktozemije. Kljub uvedbi diete pa se pri bolnikih se vedno pojavljajo mentalne poskodbe, katarakte in okvare jajènikov. Vzrok nastanka teh kasnejsih zapletov so skriti viri galaktoze v prehrani, predvsem pa endogena sinteza galaktoze. V nasi raziskavi smo zeleli preizkusiti metodo za odkrivanje mutacije K285N in hkrati ugotoviti pogostost mutacije K285N v slovenski populaciji. Pri mutaciji K285N, ki je v literaturi omenjena kot druga najpogostejsa mutacija pri klasièni galaktozemiji, pride do pretvorbe nukleotidnega zaporedja AAG v AAT na mestu 285 v GALT proteinu, kar povzroèi zamenjavo aminokisline lizin (K) v asparagin (N). Mutacijo smo odkrivali s kombinacijo metode PCR (reakcija verizne polimerizacije) in RFLP (restrikcija)z endonukleazo Tsp509 I, kar se je izkazalo za primeren naèin odkrivanja. Na osnovi dolzine in stevila odsekov DNK, ki so nastali po restrikciji, smo doloèili genotip vzorca. Prednost te metode genske analize jepredvsem zanesljivo odkrivanje heterozigotov, kar za ostale diagnostiène metode ne velja. V nasi raziskavi smo ugotovili alelsko frekvenco 0.57%, kar je v primerjavi s primerjalno raziskavo, pri kateri znasa alelska frekvenca 0.062%, precej veè. Delez heterozigotov med zdravo populacijo znasa v nasi raziskavi kar 1.15%. V Sloveniji so leta 2000 opravili tudi raziskavi, ki obravnavata pogostost mutacij N314D in Q188R. Mutacija N314D se v slovenski populaciji pojavlja z alelsko frekvenco 8.1%, mutacija Q188R pa z alelsko frekvenco 0.29%. Glede na nase rezultate in rezultate preostalih dveh raziskav, ki so jih izvedli v Sloveniji, bi bilo smiselno uvesti presejalni test za odkrivanje galaktozemij, saj vidimo, da je pogostost pojavljanja te bolezni v Sloveniji precej visoka. Z uvedbo teh testov bi zagotovili zgodnje odkrivanje bolezni, uvedli takojsnje zdravljenje in tako zmanjsali njeno smrtnost.
    Type of material - undergraduate thesis
    Publication and manufacture - Ljubljana : [Gržinič N.], 2002
    Language - slovenian
    COBISS.SI-ID - 1223281

Library Call number – location, accession no. ... Copy status
Faculty of Pharmacy, Lj. Knjižnica
dp 577 Gržinič Neda Ugotavljanje
IN: 0006715 		available - reading room
loading ...
loading ...
loading ...

Shelf entry