Optimizacija imunocitokemičnih barvanj na citoloških vzorcih z uporabo detekcijskih sistemov OptiView DAB in Envision FLEX = Optimisation of immunocytochemical staining on cytological samples using OptiView DAB and Envision FLEX detection systems : magistrska naloga ; Uniform Master's Study Programme Pharmacy
Dremelj, Anja, 1998-
Imunocitokemija je metoda, pri kateri lahko s pomočjo monoklonskih ali poliklonskih protiteles dokažemo antigene v celičnih vzorcih. Na področju onkološke patologije in citopatologije je postala ...nepogrešljiva dodatna metoda za opredelitev izvora malignih neoplazem. Vezavo primarnega protitelesa na antigen lahko predstavimo s pomočjo različnih detekcijskih sistemov, kot so na primer iView DAB, OptiView DAB in EnVision FLEX. Danes so za imunocitokemična barvanja v uporabi avtomatski sistemi oziroma barvalci, ki opravijo več zamudnih korakov postopka in izboljšajo ponovljivost reakcij. Standardizacija imunocitokemičnih barvanj je zaradi razlik v pripravi in fiksaciji vzorcev, uporabljenih reagentov in barvalcev težavna, zato je ključno, da vsak citopatološki laboratorij pred začetkom uporabe v rutinski diagnostiki postopke barvanj optimizira in preveri z ustreznimi testiranji. V okviru magistrske naloge smo optimizirali protokole imunocitokemičnih barvanj za 10 tumorskih označevalcev (kalretinin, BER-EP4, MOC-31, CK AE1/AE3, CD68, CK 5/6, LCA, desmin, HBME-1 in WT1), kjer smo uporabili dva nova detekcijska sistema, OptiView DAB in EnVision FLEX. Rezultate ocenjevalnih kriterijev deleža in intenzitete reakcije, ozadja, kontrastiranja in morfologije smo primerjali z rezultati barvanj z detekcijskim sistemom iView DAB, ki ga na Onkološkem inštitutu Ljubljana trenutno uporabljamo v rutini, a se umika iz prodaje. Izbrane protokole smo za vsak tumorski označevalec testirali na 10 pozitivnih in 10 negativnih citoloških vzorcih. Po ocenjevanju pobarvanih preparatov smo prišli do ugotovitve, da so vsi izbrani protokoli s sistemoma OptiView DAB in EnVision FLEX primerni za uporabo v rutinski diagnostiki. Rezultati so bili glede na iView DAB protokole primerljivi ali pri dokazovanju kalretinina, BER-EP4, MOC-31, CK AE1/AE3, CK 5/6 in WT1 celo boljši. V primerjavi z EnVision FLEX se je pri dokazovanju desmina in WT1 protokol z OptiView DAB izkazal za ustreznejšega. Pri protokolih s sistemom OptiView DAB smo se s predobdelavo z raztopino CC1 pri dokazovanju kalretinina, BER-EP4, MOC-31, CK AE1/AE in CK 5/6 izognili ozadju, na ustrezno intenziteto pa je pomembno vplival dodatek stopnje amplifikacije signala. Pri protokolih z EnVision FLEX brez predobdelave moramo biti pazljivi na nespecifično obarvana jedra celic, pri protokolih s predobdelavo z visokim pH pa na obarvanje eritrocitov. Za zanesljivo in kvalitetno postavitev diagnoze je ključno tudi ujemanje med ocenami ocenjevalcev in testiranje dovolj velikega števila citoloških vzorcev.
Type of material - master's thesis
; adult, serious
Publication and manufacture - Ljubljana : [A. Dremelj], 2022
It was not necessary to add the material to the shelf.
Bibliographic material was successfully added on shelf.
Adding bibliographical material on shelf was not successful.
Material is already on the shelf.
Permalink
URL:
Impact factor
Access to the JCR database is permitted only to users from Slovenia. Your current IP address is not on the list of IP addresses with access permission, and authentication with the relevant AAI accout is required.
Year
Impact factor
Edition
Category
Classification
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
Select the library membership card:
DRS,
in which the journal is indexed
Database name
Field
Year
Links to authors' personal bibliographies
Links to information on researchers in the SICRIS system
Subject headings in COBISS General List of Subject Headings
Select pickup location
The material from the parent unit is free. If the material is delivered to the pickup location from another unit, the library may charge you for this service.
