Vrednotenje proteinskih nivojev in aktivnosti katalitičnih podenot proteasomov v izbranih celičnih linijah raka dojke = Determination of protein levels and catalytic activities of proteasome subunits in selected breast cancer cell lines : enoviti magistrski študij farmacija
Motaln, Mirjam
Proteasom je velik proteinski kompleks, odgovoren za proteolizo znotrajceličnih proteinov. Hematopoetske celice izražajo specializirano obliko proteasomov, znanih kot imunoproteasomi, v katerih so ...konstitutivne katalitično aktivne podenote ß1, ß2, ß5 nadomeščene z induciranimi homologi ß1i, ß2i in ß5i. Ker je proteasom dobro znana tarča pri rakavih obolenjih hematološkega izvora, smo skušali raziskati, ali raven katalitičnih podenot proteasomov vpliva na občutljivost izbranih celičnih linij raka dojke na citotoksične učinke zaviralcev proteasomov. Izbrali smo celične linije raka dojke z različnim metastatskim potencialom in jih tretirali z IFN-γ, ki poviša izražanje imunoproteasoma, v koncentracijsko in časovno odvisnem režimu. S prenosom western in uporabo sond za določanje aktivnosti encimskih podenot proteasomov smo dokazali, da izpostavljenost celičnih linij koncentraciji IU/mL IFN-γ spodbudi izražanje podenot β1i, β2i in β5i, ki je najbolj izrazito po 48 urah. Nato smo proučili še citotoksične učinke zaviralcev proteasomov (bortezomib, karfilzomib, KZR-504, LMP7-IN-1) na izbrane celične linije s testom metabolne aktivnosti. Ugotovili smo, da se citotoksični profili izbranih zaviralcev v odsotnosti ali prisotnosti IFN-γ bistveno ne spremenijo. V nadaljevanju smo se osredotočili na nivo izražanja proteasomov v rakavih celičnih linijah in morebitnega vpliva na mikrookolje, ki nastane ob interakciji s trombociti. Uporabili smo kokulture trombocitov in celic raka dojke, saj takšni modeli in vitro bolje posnemajo pogoje in vivo v smislu imunosupresivnega mikrookolja, ki omogoča nastanek metastaz. Rakave celice smo predhodno tretirali z IFN-γ ali zaviralci proteasoma, nato pa tvorili kokulture z izoliranimi trombociti. S pretočno citometrijo smo določali ravni izločanja izbranih kemokinov (IL-8, CCL2, CCL5, MIG, CXCL9, CXCL10). Analiza supernatantov je pokazala velike razlike v ravneh izločanja kemokinov CCL5 in IL-8 napram bazalnemu izločanju iz posameznih celic. Opazili smo tudi spremembe pri ravneh izločenega CXCL10 in MIG po tretiranju z zaviralci proteasoma, kar kaže, da na proces degranulacije lahko vplivamo s tretiranjem celic s selektivnimi zaviralci proteasomov. Rezultati nakazujejo na morebitno vlogo proteasoma na tumorsko mikrookolje, a so potrebne nadaljnje študije, da bi ugotovili, ali bi proteasom lahko služil kot potencialna tarča za zdravljenje metastazirajočega raka dojke.
Type of material - master's thesis
; adult, serious
Publication and manufacture - Ljubljana : [M. Motaln], 2023
It was not necessary to add the material to the shelf.
Bibliographic material was successfully added on shelf.
Adding bibliographical material on shelf was not successful.
Material is already on the shelf.
Permalink
URL:
Impact factor
Access to the JCR database is permitted only to users from Slovenia. Your current IP address is not on the list of IP addresses with access permission, and authentication with the relevant AAI accout is required.
Year
Impact factor
Edition
Category
Classification
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
Select the library membership card:
DRS,
in which the journal is indexed
Database name
Field
Year
Links to authors' personal bibliographies
Links to information on researchers in the SICRIS system
Subject headings in COBISS General List of Subject Headings
Select pickup location
The material from the parent unit is free. If the material is delivered to the pickup location from another unit, the library may charge you for this service.
