DIKUL - logo
(UL)
  • Kultiviranje mišjih proliferativnih enterocitov in spremljanje aktivnosti maltaze = Cultivating mouse proliferative enterocytes and measuring activity of intestinal maltase : diplomska naloga
    Zemljić, Maja
    Vpeljali smo metodo kultiviranja misjih proliferativnih enterocitov in pripravili dolgozivo celièno kulturo misjih enterocitov. Zrtvovali smo sest misi (BALBžC) moskega spola, starih stiri mesece. ... Zrtvovali smo jih v stanju mirovanja, za odvzem tankega èrevesa. Odvzeli smo srednji del tankega èrevesa,predvidoma jejunum. Vsebino tankega èrevesa smo sprali s fiziolosko raztopino in s skarjami (skalpelom) iztisnili vsebino tankega èrevesa ter rumenkasto povrsinsko sluz. Preostali del tankega èrevesa smo v petrijevki razrezali na èim manjse kosme, jih razgradili s kolagenazo in jih kultivirali.Medij, v katerem smo kultivirali enterocite je bil kompletiran RPMI medij. Nato smo skozi pasaze (ena pasaza pomeni priblizno en teden kultiviranja) spremljali aktivnosti maltaze in saharaze. Dokazali smo, da sta maltaza in saharaza aktivni ze na stopnji proliferativnega enterocita. Tako smo dobili zanesljiv parameter za prouèevanje toksiènih vplivov na enterocite,ker so disaharidaze kot membranski encimi obèutljivi oznaèevalci zapatoloske spremembe na enterocitih.Koncentracijo proteinov v celiènem lizatuoziroma homogenatu smo doloèili po modificirani Lowry-jevi metodi s Folin - Ciocalteujevim fenolnim reagentom. Specifiène aktivnosti disaharidaz, maltaze in saharaze v homogenatu, smo doloèili po Dahlqvist-ovi metodi, kjer specifièno aktivnost maltaze doloèimo preko hitrosti hidrolize maltoze na dve molekuli glukoze in saharoze na molekulo glukoze in fruktoze. Kolièino sprosèene glukoze smo merili z glukoza - oksidazno metodo.Uspesno smo izpeljali metodo kultiviranja misjih proliferativnih enterocitov in dokazali, da sta maltaza in saharaza aktivni ze na stopnji proliferativnega enterocita.Razviti model kultiviranja enterocitov je primeren za prouèevanje citotoksiènih vplivov npr. gliadina pri celiakiji.
    Type of material - undergraduate thesis
    Publication and manufacture - Ljubljana : [Zemljić, M.], 2006
    Language - slovenian
    COBISS.SI-ID - 1954161

Library Call number – location, accession no. ... Copy status
Faculty of Pharmacy, Lj. holdings data is not available (database maintenance)
loading ...
loading ...
loading ...