(UL)
-
Priprava plazmidnega vektorja in molekulsko kloniranje genov SOX5 in SOX6 = Preparation of a plasmid construct and molecular cloning of SOX5 and SOX6 genes : magistrska naloga : Master's Study Programme Laboratory BiomedicineMezgec, KlemenBliskovit napredek molekulske biologije nam omogoča enostavno sintezo poljubnih rekombinantnih molekul DNA, ki jih lahko učinkovito izkoriščamo za preučevanje fizioloških in patofizioloških ... molekulskih mehanizmov v organizmu. Proteini iz družine SOX so izjemno pomembni transkripcijski dejavniki, ki preko ojačevalnih in regulatornih regij uravnavajo izražanje številnih genov, pomembno vpletenih v nadzor celične delitve in sposobnosti diferenciacije v procesu razvoja zarodka. Njihova funkcija v organizmu je tako pomembna, da bi morebitne mutacije v genskem zapisu povzročile razvoj izjemno težkih in kompleksnih bolezenskih stanj. Glavni namen naloge je bil pripraviti ekspresijske plazmide s tehnologijo rekombinantne DNA in tako sklonirati tarčni kodirajoči zaporedji genov SOX5 in SOX6. Sintetizirane rekombinantne plazmidne molekule bodo v transfeciranih celičnih linijah omogočile sintezo označenih fuzijskih proteinov SOX5 in SOX6, ki ju bomo v nadaljnjih študijah uporabili za preučevanje vpletenosti v molekulske mehanizme uravnavanja izražanja tarčnih genov pri razvoju drugih bolezni. Rekombinantne plazmidne molekule smo sintetizirali tako, da smo v poliklonska mesta ekspresijskih vektorjev pFLAG-CMVTM-2 vstavili tarčni kodirajoči zaporedji genov SOX5 in SOX6. V procesu klasičnega molekulskega kloniranja smo za rezanje plazmida in vključkov uporabili restrikcijski endonukleazi NotI ter KpnI, ki sta načrtno ustvarili komplementarne lepljive konce in tako zagotovili pogoje za vstavitev vključkov v rezane molekule vektorja. Po ligaciji smo rekombinantne plazmidne molekule ločili in namnožili na trdnem gojišču z ampicilinom. V zadnjem koraku smo ustreznost molekulskega kloniranja preverili s potrditveno restrikcijsko analizo in elektroforezo na agaroznem gelu ter določitvijo nukleotidnega zaporedja rekombinantnih DNA po Sangerju. Na podlagi rezultatov potrditvenih metod smo ugotovili, da je bilo kloniranje v obeh primerih uspešno. Dokončno potrditev smo dokazali z bioinformacijsko sekvenčno analizo pridobljenih rekombinantnih plazmidov, kjer smo dokazali približno 99 % ujemanje z ustreznima referenčnima različicama tarčnih kodirajočih zaporedij genov SOX5 in SOX6. Transkripcijski dejavniki iz družine SOX so zaradi svoje vsestranskosti in vpletenosti v številne fiziološke ter patofiziološke procese, primerni za nadaljnje raziskave, saj bi nam boljše poznavanje molekulskih mehanizmov lahko omogočilo odkritje novih označevalcev, terapevtskih tarč in inovativnih zdravilnih učinkovin.Type of material - master's thesis ; adult, seriousPublication and manufacture - Ljubljana : [K. Mezgec], 2019Language - slovenianCOBISS.SI-ID - 4786033
Library | Call number – location, accession no. ... | Copy status |
---|---|---|
Faculty of Pharmacy, Lj. | Knjižnica mlab 60 MEZGEC KLEMEN Priprava 204 IN: 0016300 |
available - reading room |
Shelf entry
Permalink
- URL:
Impact factor
Access to the JCR database is permitted only to users from Slovenia. Your current IP address is not on the list of IP addresses with access permission, and authentication with the relevant AAI accout is required.
Year | Impact factor | Edition | Category | Classification | ||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP |
Select the library membership card:
If the library membership card is not in the list,
add a new one.
DRS, in which the journal is indexed
Database name | Field | Year |
---|
Links to authors' personal bibliographies | Links to information on researchers in the SICRIS system |
---|---|
Mezgec, Klemen | 53353 |
Marc, Janja | 12189 |
Kodrič, Klemen, biomedicinec | 38167 |
Source: Personal bibliographies
and: SICRIS
Select pickup location:
Material pickup by post
Delivery address:
Address is missing from the member's data.
The address retrieval service is currently unavailable, please try again.
By clicking the "OK" button, you will confirm the pickup location selected above and complete the reservation process.
By clicking the "OK" button, you will confirm the above pickup location and delivery address, and complete the reservation process.
By clicking the "OK" button, you will confirm the address selected above and complete the reservation process.
Notification
Automatic login and reservation service currently not available. You can reserve the material on the Biblos portal or try again here later.
Subject headings in COBISS General List of Subject Headings
Select pickup location
The material from the parent unit is free. If the material is delivered to the pickup location from another unit, the library may charge you for this service.
Pickup location | Material status | Reservation |
---|
Reservation in progress
Please wait a moment.
Reservation was successful.
Reservation failed.
Reservation...
Membership card:
Pickup location: