Vloga avtofagije v terapevtski občutljivosti celic kronične limfocitne levkemije = The role of autophagy in the therapeutic susceptibility of chronic lymphocytic leukemia cells : magistrska naloga : enoviti magistrski študijski program Farmacija
Jakoš Djordjevič, Alma Tana
Kronična limfocitna levkemija (KLL) predstavlja 25 % vseh levkemij in je najpogostejše hematološko maligno obolenje pri odraslih. V zadnjih letih so nove majhne tarčne molekule ibrutinib (zaviralec ...BTK), idelalizib (zaviralec PI3K) in venetoklaks (antagonist Bcl-2) vodile v korenite spremembe na področju zdravljenja KLL. Kljub visoki učinkovitosti terapijo z novimi tarčnimi molekulami spremljajo številni neželeni učinki in pojav odpornosti. Iskanje novih terapij in terapevtskih tarč za zdravljenje KLL je zato v neprestanem teku. Ena takih tarč je avtofagija, katabolna pot razgradnje celici lastnih snovi, ki ima pomembno, a ne popolnoma definirano vlogo v KLL. V magistrski nalogi smo želeli preučiti protilevkemični potencial zaviranja avtofagije in njen vpliv na učinkovitost delovanja tarčnih zdravil v KLL. Na reporterski celični liniji THP1- Difluo hLC3 smo s pomočjo pretočnega citometra na zajetje slike dokazali, da ibrutinib in venetoklaks avtofagijo aktivirata, idelalizib pa na aktivnost avtofagije nima učinka. S testom PrestoBlue smo preverili citotoksične učinke različnih zaviralcev avtofagije na celicah 13 bolnikov s KLL. Uporabili smo zaviralce kinaze ULK1/2 (MRT68921), AMPK (dorzomorfin) in združitve avtofagosoma z lizosomom (klorokin). S programom GraphPad Prism smo izračunali vrednosti EC50 in prepoznali, da na celice KLL najbolj citotoksično deluje MRT68921. S primerjavo povprečnih vrednosti EC50 zaviralcev avtofagije po 24 in 48 urah smo potrdili, da zaviralci avtofagije delujejo časovno odvisno citotoksično. Tako kot učinkovitost je pri zdravljenju malignih obolenj pomembna tudi selektivnost terapije. Selektivnost zaviralcev avtofagije na maligne limfocite B smo ovrednotili s primerjavo učinkov zaviralcev avtofagije na metabolno aktivnost mononuklearnih celic periferne krvi (PBMC) in limfoblastoidnih celic (LCL) ter dokazali, da MRT68921, dorzomorfin in klorokin delujejo selektivno citotoksično na celice KLL. Vpliv zaviralcev avtofagije na učinkovitost tarčne terapije smo preverili na celicah KLL s testom PrestoBlue in potrdili sinergistično citotoksično delovanje MRT68921 v kombinaciji z ibrutinibom in venetoklaksom. Mehanizem sinergistične citotoksičnosti smo določili z analizo celičnega cikla in uporabo pankaspaznega zaviralca QVD-OPh s pomočjo pretočne citometrije. Potrdili smo antiproliferativne učinke MRT68921, saj le-ta inducira zastoj v G2/M fazi celičnega cikla. Prav tako smo pokazali, da je sinergistična citotoksičnost MRT68921 in tarčnih zdravil posredovana preko kaspaz. Avtofagijo smo prepoznali kot novo terapevtsko tarčo pri KLL, farmakološke zaviralce avtofagije pa kot potencialne nove učinkovine za zdravljenje bolnikov s KLL.
Type of material - master's thesis
; adult, serious
Publication and manufacture - Ljubljana : [A. T. Jakoš Djordjevič], 2021
Knjižnica emšf 616 JAKOŠ D. A. TANA Vloga 953 IN: 0016925
available - reading room
Shelf entry
Adding material to shelf was successful.
Adding material to shelf failed.
It was not necessary to add the material to the shelf.
Bibliographic material was successfully added on shelf.
Adding bibliographical material on shelf was not successful.
Material is already on the shelf.
Permalink
URL:
Impact factor
Access to the JCR database is permitted only to users from Slovenia. Your current IP address is not on the list of IP addresses with access permission, and authentication with the relevant AAI accout is required.
Year
Impact factor
Edition
Category
Classification
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
Select the library membership card:
DRS,
in which the journal is indexed
Database name
Field
Year
Links to authors' personal bibliographies
Links to information on researchers in the SICRIS system
Subject headings in COBISS General List of Subject Headings
Select pickup location
The material from the parent unit is free. If the material is delivered to the pickup location from another unit, the library may charge you for this service.
