VSE knjižnice (vzajemna bibliografsko-kataložna baza podatkov COBIB.SI)
-
Izražanje rekombinantne zunajcelične regije človeškega eritropoetinskega receptorja v periplazmi bakterije Escherichia coli = Expression of recombinant human erythropoietin receptor ectodomain in the periplasm of Escherichia coli : enovit magistrski študij farmacijeHiti, LukaGlikoprotein eritropoetin je glavni humoralni dejavnik v telesu, ki s spodbujanjem eritropoeze povečuje oksiformno kapaciteto krvi. Takšno povečanje pozitivno vpliva na fizično vzdržljivost, zaradi ... česar se, kljub prepovedi s strani Svetovne protidopinške organizacije, nekateri športniki zatekajo k uporabi eritropoetina oz. substanc, ki oponašajo njegovo fiziološko delovanje. Dokazovanje prisotnosti takšnih % zlasti nizkomolekularnih % spojin je zaenkrat precej težavno in nezanesljivo, zaradi česar obstaja težnja po razvoju univerzalne testne platforme. Pri razvoju takšne testne platforme je bila ena izmed uporabljenih komponent tudi rekombinantna zunajcelična regija eritropoetinskega receptorja (EpoR), ki so jo pridobili s prehodnim izražanjem v sesalski celični liniji HEK 293T. Takšno izražanje je zahtevno, dolgotrajno in drago, zato smo želeli najti enostavnejši, hitrejši in cenejši način pridobivanja EpoR. Namen magistrske naloge je bilo poskusno pridobivanje EpoR z uporabo E. coli kot alternativnega ekspresijskega sistema sesalskim celicam HEK 293T. Glavna ovira bakterijskih ekspresijskih sistemov je, da v citoplazmi ne nudijo oksidacijskega okolja, ki ga EpoR potrebuje za pravilno zvijanje in tvorbo disulfidnih mostičkov. To omejitev smo poskusili odpraviti tako, da smo genskemu zapisu za EpoR na 5'-konec pripojili genski zapis za signalno zaporedje, ki po izražanju usmerja polipeptidno verigo v periplazemski prostor z oksidativnim okoljem. Po okužbi E. coli z bakteriofagnimi delci M13, ki so vsebovali fagmidni vektor pIT2/EpoR, smo, da bi določili optimalne pogoje za izražanje EpoR, najprej izvedli testno izražanje EpoR v različnih pogojih indukcije pri dveh različnih temperaturah. Nato smo izvedli izražanje v večji količini in produkt očistili s kovinsko-kelatno afinitetno kromatografijo in velikostno-izključitveno kromatografijo. Na koncu smo količino produkta ocenili kolorimetrično po Bradfordu, z merjenjem absorbance pri 280 nm in denzitometrično ter ocenili njegovo aktivnost s prilagojeno različico testa ELISA in jo primerjali z aktivnostjo EpoR, pridobljenega z izražanjem v sesalskih celicah HEK 293T. Tako koncentracija (~150 %g / 1 L kulture) kot aktivnost izraženega EpoR (~0,4 % v primerjavi s skoraj 100 % aktivnostjo EpoR, izraženega v HEK 293T) sta bili zelo nizki.Vrsta gradiva - magistrsko delo ; neleposlovje za odrasleZaložništvo in izdelava - Ljubljana : [L. Hiti], 2020Jezik - slovenskiCOBISS.SI-ID - 4886385
Avtor
Hiti, Luka
Drugi avtorji
Bratkovič, Tomaž, farmacevt, 1978- |
Molek, Peter
Teme
Eksperimentalna kemija |
Eritropoetin |
Escherichia coli |
periplazemsko izražanje |
eritropoetinski receptor |
oksimorfna kapaciteta krvi |
genski zapis
Knjižnica/institucija |
Kraj | Akronim | Za izposojo | Druga zaloga |
---|---|---|---|---|
Fakulteta za farmacijo, Ljubljana | Ljubljana | FFALJ |
v čitalnico 1 izv.
|
Vnos na polico
Trajna povezava
- URL:
Faktor vpliva
Dostop do baze podatkov JCR je dovoljen samo uporabnikom iz Slovenije. Vaš trenutni IP-naslov ni na seznamu dovoljenih za dostop, zato je potrebna avtentikacija z ustreznim računom AAI.
Leto | Faktor vpliva | Izdaja | Kategorija | Razvrstitev | ||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP |
Baze podatkov, v katerih je revija indeksirana
Ime baze podatkov | Področje | Leto |
---|
Povezave do osebnih bibliografij avtorjev | Povezave do podatkov o raziskovalcih v sistemu SICRIS |
---|---|
Hiti, Luka | 54604 |
Bratkovič, Tomaž, farmacevt, 1978- | 23598 |
Molek, Peter | 32431 |
Vir: Osebne bibliografije
in: SICRIS
Izberite prevzemno mesto:
Prevzem gradiva po pošti
Naslov za dostavo:
Med podatki člana manjka naslov.
Storitev za pridobivanje naslova trenutno ni dostopna, prosimo, poskusite še enkrat.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in naslov za dostavo ter dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrani naslov za dostavo in dokončali postopek rezervacije.
Obvestilo
Trenutno je storitev za avtomatsko prijavo in rezervacijo nedostopna. Gradivo lahko rezervirate sami na portalu Biblos ali ponovno poskusite tukaj kasneje.
Gesla v Splošnem geslovniku COBISS
Izbira mesta prevzema
Gradivo iz matične enote je brezplačno. Če je gradivo na mesto prevzema dostavljeno iz drugih enot, lahko knjižnica to storitev zaračuna.
Mesto prevzema | Status gradiva | Rezervacija |
---|
Rezervacija v teku
Prosimo, počakajte trenutek.
Rezervacija je uspela.
Rezervacija ni uspela.
Rezervacija...
Članska izkaznica:
Mesto prevzema: