Fakulteta za farmacijo, Ljubljana (FFALJ)
-
Izražanje površinskega antigena virusa hepatitisa B v kvasovki Saccharomyces cerevisiae = Expression of hepatitis B surface antigene in yeast Saccharomyces cerevisiae : diplomska nalogaBedenik, TinaV okviru raziskovalnega dela smo, z namenom izrazanja povrsinskega antigena virusa hepatitisa B v kvasovki Saccharomyces cerevisiae, pripravili rekombinantni plazmid YEpGAL1-HBs(S). Gen HBs(S), ki ... kodira povrsinski antigenvirusa hepatitisa B, smo z metodo verizne reakcije s polimerazo namnozili iz plazmida pRCžCMV-HBs(S) in ga s pomoèjo tehnologije rekombinantneDNA vstavili v plazmid YEpGAL1, med promotor GAL1 in terminator ADH. Z rekombinantnim plazmidom smo transformirali kvasovko Saccharomyces cerevisiae. Z namenom doloèitve nivoja izrazanja povrsinskega antigena virusa hepatitisa B smo preizkusili dve imunoloski metodič metodo èrtovnega prenosa in metodo prenosa western. Pri imunoloski metodi èrtovnega prenosa smo tekoèe vzorce neposredno nanesli na nitrocelulozno membrano, ki smo jo nato inkubirali v prisotnosti primarnih protiteles proti povrsinskemu antigenu virusa hepatitisa B in nato v prisotnosti sekundarnih protiteles, oznaèenih z encimom hrenove peroksidaze, ki se specifièno vezejo na primarna protitelesa. Polozaj sekundarnih protiteles smo doloèili s 4-kloro-1-naftolom. Pri imunoloski metodi prenosa western smo predhodno tekoèe vzorce denaturirali in jih nato loèili glede na velikost s poliakrilamidno gelsko elektroforezo v prisotnosti natrijevega dodecilsulfata. Za prenos loèenih proteinov iz gela nanitrocelulozno membrano smo uporabili prenos s pomoèjo elektriènega toka. Nitrocelulozno membrano smo inkubirali s protitelesi po enakem postopku kot pri imunoloski metodi èrtovnega prenosa.Pri doloèitvi nivoja izrazanja povrsinskega antigena virusa hepatitisa B smo naleteli na dve tezavi. Primarnaprotitelesa IgG so se pri imunoloski metodi èrtovnega prenosa nespecifièno vezala tako na proteinske vzorce, izolirane iz transformiranih kvasovk, kot na proteinske vzorce, izolirane iz netransformiranih kvasovk, ki bi morali sluziti kot negativna kontrola. Pri imunoloski metodi prenosa western po opravljeni poliakrilamidni gelski elektroforezi v prisotnosti natrijevega dodecilsulfata in po barvanju s Coomassie Brillant Blue na gelu nibilo vidnega standarda povrsinskega antigena virusa hepatitisa B. Po inkubaciji s protitelesi in detekciji tudi nismo dobili pozitivnega signala v proteinskih vzorcih iz transformiranih kvasovk. Tudi v primeru pozitivnega signala ne bi mogli nedvoumno dokazati izrazanja povrsinskega antigena virusa hepatitisa B, saj na odtisu ni bilo standarda za primerjavo. Zaradi omenjenih tezav tako nismo mogli doloèiti nivoja izrazanja povrsinskega antigena virusa hepatitisa B v proteinskih vzorcih, izoliranih iz transformiranih kvasovk. Za uspesno doloèitev ravni izrazanja povrsinskega antigena virusa hepatitisa B bizato bilo potrebno najti ustreznejso metodo za detekcijo povrsinskega antigena virusa hepatitisa B, stabilen in ustrezno preèisèen standard povrsinskega antigena virusa hepatitisa B in stabilna specifièna primarna protitelesa.Vrsta gradiva - diplomsko deloZaložništvo in izdelava - Ljubljana : [Bedenik, T.], 2005Jezik - slovenskiCOBISS.SI-ID - 1732465
Avtor
Bedenik, Tina
Drugi avtorji
Štrukelj, Borut |
Komel, Radovan
Teme
hepatitis B |
kvasovka Saccharomyces cerevisiae |
rekombinantna cepiva |
nukleinske kisline |
analiza
![loading ... loading ...](themes/default/img/ajax-loading.gif)
Signatura – lokacija, inventarna št. ... |
Status izvoda | Rezervacija |
---|---|---|
Knjižnica dp 0000000577 Bedenik Tina Izražanje IN: 0008318 Knjižnica dp 577 Bedenik Tina Izražanje IN: 0008318 |
prosto - za čitalnico
|
![loading ... loading ...](themes/default/img/ajax-loading.gif)
![loading ... loading ...](themes/default/img/ajax-loading.gif)
![loading ... loading ...](themes/default/img/ajax-loading.gif)
Vnos na polico
Trajna povezava
- URL:
Faktor vpliva
Dostop do baze podatkov JCR je dovoljen samo uporabnikom iz Slovenije. Vaš trenutni IP-naslov ni na seznamu dovoljenih za dostop, zato je potrebna avtentikacija z ustreznim računom AAI.
Leto | Faktor vpliva | Izdaja | Kategorija | Razvrstitev | ||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP |
Baze podatkov, v katerih je revija indeksirana
Ime baze podatkov | Področje | Leto |
---|
Povezave do osebnih bibliografij avtorjev | Povezave do podatkov o raziskovalcih v sistemu SICRIS |
---|---|
Bedenik, Tina | ![]() |
Štrukelj, Borut | 07849 |
Komel, Radovan | 06135 |
Vir: Osebne bibliografije
in: SICRIS
Izberite prevzemno mesto:
Prevzem gradiva po pošti
Naslov za dostavo:
Med podatki člana manjka naslov.
Storitev za pridobivanje naslova trenutno ni dostopna, prosimo, poskusite še enkrat.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in naslov za dostavo ter dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrani naslov za dostavo in dokončali postopek rezervacije.
Obvestilo
Trenutno je storitev za avtomatsko prijavo in rezervacijo nedostopna. Gradivo lahko rezervirate sami na portalu Biblos ali ponovno poskusite tukaj kasneje.
Gesla v Splošnem geslovniku COBISS
Izbira mesta prevzema
Gradivo iz matične enote je brezplačno. Če je gradivo na mesto prevzema dostavljeno iz drugih enot, lahko knjižnica to storitev zaračuna.
Mesto prevzema | Status gradiva | Rezervacija |
---|
Rezervacija v teku
Prosimo, počakajte trenutek.
Rezervacija je uspela.
Rezervacija ni uspela.
Rezervacija...
Članska izkaznica:
Mesto prevzema: