DIKUL - logo
Fakulteta za farmacijo, Ljubljana (FFALJ)
  • Optimizacija in vrednotenje metode merjenja koncentracije izvencelične DNA v plazmi = Optimisation and evaluation of the method for measuring cell-free DNA concentration in plasma : diplomska naloga
    Hašaj, Valerija
    Izvencelièno DNA, ki s krvjo krozi po organizmu, lahko najdemo v plazmi in serumu zdravih oseb, povezana pa je tudi z mnogimi boleznimi. Raziskave so pokazale, da imajo bolniki s pljuènim rakom mnogo ... visje koncentracije izvenceliène DNA v plazmi kot zdrave osebe in da ima preiskava prognostièni indiagnostièni pomen. Namen diplomske naloge je bil vpeljati analizni postopekmerjenja koncentracije izvenceliène DNA v plazmi in s preizkusenim postopkom doloèili referenène vrednosti pri zdravih ter izmeriti koncentracijepri bolnikih s pljuènim rakom. Z diplomsko nalogo smo skusali potrditi naslednji hipoteziČ 1.) komercialni postopek NucleoSpinr in PicoGeenrje ustrezen za izolacijo in meritev koncentracije izvenceliène DNA v plazmi in 2.) bolniki s pljuènim rakom imajo visje koncentracije kot zdravi preiskovanci. Ugotovili smo, da komercialni analizni postopek ni ustrezen, zato smo ga optimizirali. Med mnogimi vpeljanimi spremembami so najpomembnejsepodaljsanje èasa proteinolize, dodatek proteinaze K in izbira primerne mikrotiterske plosèice. Ponovljivost postopka med serijami je 9,0 % pri povpreèni koncentraciji 12,3 gžL. Z novim vpeljanim postopkom smo doloèili referenène vrednosti DNA v plazmi zdravih od 0,30 do 9,75 gžL. Moskiso imeli visje koncentracije kot zenske (mediani 3,98 vs. 2,35 gžLč p = 0,0009), koncentracija je narasèala s serumsko koncentracijo kreatinina (p =0,0221) in ni bila odvisna od starosti preiskovanca. Bolniki s pljuènim rakomso imeli 4,4-krat visje koncentracije DNA v plazmi kot zdravi preiskovanci (mediani 12,6 vs. 2,85 gžLč p = 0,000006). Koncentracija 4,45 gžL je najbolje razlikovala bolnike s pljuènim rakom od zdravih (obèutljivost preiskave 85,5 %, specifiènost preiskave 80,4, povrsina pod ROC krivuljo 0,848, obmoèje 95 % zaupanja med 0,743 in 0,922). Ocenjujemo, da je ob upostevanju nasih priporoèil in modifikacij analizni postopek dovolj zanesljivza merjenje koncentracije izvenceliène DNA v plazmi. Rezultati nase raziskave, skupaj z ze objavljenimi literaturnimi viri, nedvomno kazejo na smiselnost nadaljnjega prouèevanja diagnostiène uporabnosti merjenja koncentracije izvenceliène DNA v plazmi kot novega tumorskega oznaèevalca pljuènega raka.
    Vrsta gradiva - diplomsko delo
    Založništvo in izdelava - Ljubljana : [Hašaj, V.], 2005
    Jezik - slovenski
    COBISS.SI-ID - 1816945

Signatura – lokacija, inventarna št. ... Status izvoda Rezervacija
Knjižnica
dp 0000000616 Hašaj Valerija Optimizacija
IN: 0008563
Knjižnica
dp 616 Hašaj Valerija Optimizacija
IN: 0008563
prosto - za čitalnico
loading ...
loading ...
loading ...