Fakulteta za farmacijo, Ljubljana (FFALJ)
-
Priprava plazmidnega vektorja in molekulsko kloniranje genov SOX5 in SOX6 = Preparation of a plasmid construct and molecular cloning of SOX5 and SOX6 genes : magistrska naloga : Master's Study Programme Laboratory BiomedicineMezgec, KlemenBliskovit napredek molekulske biologije nam omogoča enostavno sintezo poljubnih rekombinantnih molekul DNA, ki jih lahko učinkovito izkoriščamo za preučevanje fizioloških in patofizioloških ... molekulskih mehanizmov v organizmu. Proteini iz družine SOX so izjemno pomembni transkripcijski dejavniki, ki preko ojačevalnih in regulatornih regij uravnavajo izražanje številnih genov, pomembno vpletenih v nadzor celične delitve in sposobnosti diferenciacije v procesu razvoja zarodka. Njihova funkcija v organizmu je tako pomembna, da bi morebitne mutacije v genskem zapisu povzročile razvoj izjemno težkih in kompleksnih bolezenskih stanj. Glavni namen naloge je bil pripraviti ekspresijske plazmide s tehnologijo rekombinantne DNA in tako sklonirati tarčni kodirajoči zaporedji genov SOX5 in SOX6. Sintetizirane rekombinantne plazmidne molekule bodo v transfeciranih celičnih linijah omogočile sintezo označenih fuzijskih proteinov SOX5 in SOX6, ki ju bomo v nadaljnjih študijah uporabili za preučevanje vpletenosti v molekulske mehanizme uravnavanja izražanja tarčnih genov pri razvoju drugih bolezni. Rekombinantne plazmidne molekule smo sintetizirali tako, da smo v poliklonska mesta ekspresijskih vektorjev pFLAG-CMVTM-2 vstavili tarčni kodirajoči zaporedji genov SOX5 in SOX6. V procesu klasičnega molekulskega kloniranja smo za rezanje plazmida in vključkov uporabili restrikcijski endonukleazi NotI ter KpnI, ki sta načrtno ustvarili komplementarne lepljive konce in tako zagotovili pogoje za vstavitev vključkov v rezane molekule vektorja. Po ligaciji smo rekombinantne plazmidne molekule ločili in namnožili na trdnem gojišču z ampicilinom. V zadnjem koraku smo ustreznost molekulskega kloniranja preverili s potrditveno restrikcijsko analizo in elektroforezo na agaroznem gelu ter določitvijo nukleotidnega zaporedja rekombinantnih DNA po Sangerju. Na podlagi rezultatov potrditvenih metod smo ugotovili, da je bilo kloniranje v obeh primerih uspešno. Dokončno potrditev smo dokazali z bioinformacijsko sekvenčno analizo pridobljenih rekombinantnih plazmidov, kjer smo dokazali približno 99 % ujemanje z ustreznima referenčnima različicama tarčnih kodirajočih zaporedij genov SOX5 in SOX6. Transkripcijski dejavniki iz družine SOX so zaradi svoje vsestranskosti in vpletenosti v številne fiziološke ter patofiziološke procese, primerni za nadaljnje raziskave, saj bi nam boljše poznavanje molekulskih mehanizmov lahko omogočilo odkritje novih označevalcev, terapevtskih tarč in inovativnih zdravilnih učinkovin.Vrsta gradiva - magistrsko delo ; neleposlovje za odrasleZaložništvo in izdelava - Ljubljana : [K. Mezgec], 2019Jezik - slovenskiCOBISS.SI-ID - 4786033
![loading ... loading ...](themes/default/img/ajax-loading.gif)
Signatura – lokacija, inventarna št. ... |
Status izvoda | Rezervacija |
---|---|---|
Knjižnica mlab 0000000060 MEZGEC KLEMEN Priprava 0000000204 IN: 0016300 Knjižnica mlab 60 MEZGEC KLEMEN Priprava 204 IN: 0016300 |
prosto - za čitalnico
|
![loading ... loading ...](themes/default/img/ajax-loading.gif)
![loading ... loading ...](themes/default/img/ajax-loading.gif)
![loading ... loading ...](themes/default/img/ajax-loading.gif)
Vnos na polico
Trajna povezava
- URL:
Faktor vpliva
Dostop do baze podatkov JCR je dovoljen samo uporabnikom iz Slovenije. Vaš trenutni IP-naslov ni na seznamu dovoljenih za dostop, zato je potrebna avtentikacija z ustreznim računom AAI.
Leto | Faktor vpliva | Izdaja | Kategorija | Razvrstitev | ||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP |
Baze podatkov, v katerih je revija indeksirana
Ime baze podatkov | Področje | Leto |
---|
Povezave do osebnih bibliografij avtorjev | Povezave do podatkov o raziskovalcih v sistemu SICRIS |
---|---|
Mezgec, Klemen | ![]() |
Marc, Janja | 12189 |
Kodrič, Klemen, biomedicinec | 38167 |
Vir: Osebne bibliografije
in: SICRIS
Izberite prevzemno mesto:
Prevzem gradiva po pošti
Naslov za dostavo:
Med podatki člana manjka naslov.
Storitev za pridobivanje naslova trenutno ni dostopna, prosimo, poskusite še enkrat.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in naslov za dostavo ter dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrani naslov za dostavo in dokončali postopek rezervacije.
Obvestilo
Trenutno je storitev za avtomatsko prijavo in rezervacijo nedostopna. Gradivo lahko rezervirate sami na portalu Biblos ali ponovno poskusite tukaj kasneje.
Gesla v Splošnem geslovniku COBISS
Izbira mesta prevzema
Gradivo iz matične enote je brezplačno. Če je gradivo na mesto prevzema dostavljeno iz drugih enot, lahko knjižnica to storitev zaračuna.
Mesto prevzema | Status gradiva | Rezervacija |
---|
Rezervacija v teku
Prosimo, počakajte trenutek.
Rezervacija je uspela.
Rezervacija ni uspela.
Rezervacija...
Članska izkaznica:
Mesto prevzema: