Fakulteta za farmacijo, Ljubljana (FFALJ)
-
Uporaba peptidnih oznak za razlikovanje terapevtskih proteinov, predstavljenih na površini bakterije Lactococcus lactis = The use of peptide tags for differentiation of therapeutic proteins displayed on the surface of Lactococcus lactis bacterium : enovit magistrski študij farmacijaGüntner, RebekaRak debelega črevesa in danke (RDČD) predstavlja velik javnozdravstveni problem s pogosto slabo prognozo v primeru pozne diagnoze in terapije. Konvencionalne metode zdravljenja imajo številne ... slabosti in omejitve, kar spodbuja razvoj sodobnejših pristopov k zdravljenju, usmerjenih v ciljano dostavo učinkovin, kombinirano terapijo in teranostiko. Pomemben dejavnik tveganja za nastanek in napredovanje RDČD je vnetje v gastrointestinalnem traktu s posledično aktivacijo imunskih celic ter sproščanjem vnetnih citokinov. Z dostavo ustreznih protivnetnih učinkovin v črevesje lahko omilimo vnetje ter z njim povezane poškodbe sluznice in upočasnimo ali celo ustavimo progresijo RDČD, s hkratno dostavo vezalcev tumorsko specifičnih antigenov pa lahko dosežemo ciljano dostavo teh učinkovin. V sklopu raziskovalnega dela smo pripravili genske konstrukte in jih vstavili v plazmide pSDBA3b oziroma pNZDual za posamezno ali sočasno površinsko predstavitev dveh proteinov. V konstrukte smo vstavili gen za protein evazin (vezalec provnetnega IL-8) oziroma gen za protein afitin (vezalec tumorskega antigena EpCAM) ter zaporedje za peptidno oznako Cmyc ali Flag. Slednje so pomembno orodje v biokemiji, saj pripete na protein v kombinaciji s specifičnimi protitelesi omogočajo detekcijo, čiščenje in karakterizacijo rekombinantnih proteinov. Konstrukte smo izrazili v bakterijah L. lactis, ki so zaradi dolgoletne priznane varnosti in enostavne genske modifikacije primeren vektor za peroralno dostavo omenjenih terapevtskih proteinov. S pomočjo peptidnih oznak smo potrdili izražanje posameznih proteinov EVA-Cmyc, AFFI-Cmyc, EVA-Flag in AFFI-Flag oziroma njihovih kombinacij, dokazali njihovo prisotnost v celičnih lizatih in tudi na površini bakterij L. lactis, pri čemer je obseg površinske predstavitve variiral glede na vrsto proteina, uvedeno peptidno oznako in tudi glede na to, ali je bil protein izražen posamezno ali sočasno z drugim proteinom. Navsezadnje smo dokazali, da so bakterije s površinsko predstavljenimi evazini in afitini funkcionalne, torej sposobne vezave IL-8 in receptorja EpCAM. Zaradi splošnega neodobravanja GSO smo izražene proteine ločili od celic proizvajalk, jih nekovalentno pripeli na divje seve bakterij, ki niso bile gensko spremenjene in dokazali njihovo površinsko predstavitev. Celotno vrednotenje proteinov smo izvedli na osnovi peptidnih oznak in dokazali, da je njihova uporaba primeren, cenovno ugoden ter enostaven način za detekcijo in razlikovanje izraženih proteinov, kar je bil tudi osnovni namen magistrskega dela. Ugotovili smo, da oznake sicer sterično ovirajo vezavna mesta proteinov in vplivajo na njihovo funkcionalnost, a vendar prednosti njihove uporabe odtehtajo omenjene slabosti.Vrsta gradiva - magistrsko delo ; neleposlovje za odrasleZaložništvo in izdelava - Ljubljana : [R. Güntner], 2021Jezik - slovenskiCOBISS.SI-ID - 68535811
Avtor
Güntner, Rebeka
Drugi avtorji
Berlec, Aleš |
Zahirović, Abida
Teme
Rak debelega črevesa in danke |
rak debelega črevesa |
rak danke |
Lactococcus lactis |
peptidne oznake |
površinska predstavitev
Signatura – lokacija, inventarna št. ... |
Status izvoda | Rezervacija |
---|---|---|
Knjižnica emšf 0000000616 GÜNTNER REBEKA Uporaba 0000000976 IN: 0016993 Knjižnica emšf 616 GÜNTNER REBEKA Uporaba 976 IN: 0016993 |
prosto - za čitalnico
|
Vnos na polico
Trajna povezava
- URL:
Faktor vpliva
Dostop do baze podatkov JCR je dovoljen samo uporabnikom iz Slovenije. Vaš trenutni IP-naslov ni na seznamu dovoljenih za dostop, zato je potrebna avtentikacija z ustreznim računom AAI.
Leto | Faktor vpliva | Izdaja | Kategorija | Razvrstitev | ||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP |
Baze podatkov, v katerih je revija indeksirana
Ime baze podatkov | Področje | Leto |
---|
Povezave do osebnih bibliografij avtorjev | Povezave do podatkov o raziskovalcih v sistemu SICRIS |
---|---|
Güntner, Rebeka | |
Berlec, Aleš | 24257 |
Zahirović, Abida | 52419 |
Vir: Osebne bibliografije
in: SICRIS
Izberite prevzemno mesto:
Prevzem gradiva po pošti
Naslov za dostavo:
Med podatki člana manjka naslov.
Storitev za pridobivanje naslova trenutno ni dostopna, prosimo, poskusite še enkrat.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in naslov za dostavo ter dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrani naslov za dostavo in dokončali postopek rezervacije.
Obvestilo
Trenutno je storitev za avtomatsko prijavo in rezervacijo nedostopna. Gradivo lahko rezervirate sami na portalu Biblos ali ponovno poskusite tukaj kasneje.
Gesla v Splošnem geslovniku COBISS
Izbira mesta prevzema
Gradivo iz matične enote je brezplačno. Če je gradivo na mesto prevzema dostavljeno iz drugih enot, lahko knjižnica to storitev zaračuna.
Mesto prevzema | Status gradiva | Rezervacija |
---|
Rezervacija v teku
Prosimo, počakajte trenutek.
Rezervacija je uspela.
Rezervacija ni uspela.
Rezervacija...
Članska izkaznica:
Mesto prevzema: