Cet article analyse la façon dont la construction d’une politique de transport en commun à une échelle d’agglomération à Lyon élude un problème de desserte des grands quartiers d’habitat social. ...Cette séquence fondatrice de l’intercommunalité lyonnaise éclaire la politisation des communautés urbaines observée dans la première décennie de leur existence en France. La construction de plusieurs milliers de logements sociaux sur la commune de Vaulx-en-Velin est saisie par ses élus municipaux comme moyen d’équipement et de modernisation urbaine. Mais dans la nouvelle arène intercommunale, l’exacerbation des hiérarchies entre élus met à l’épreuve les ressources du communisme municipal. La trajectoire et les ressources disponibles pour les élus de Vaulx-en-Velin les prédisposent à investir des grilles de lecture conflictualisées du monde social pour endosser un rôle de représentant des classes populaires de l’agglomération. La politisation de l’institution intercommunale qui en résulte désingularise la desserte des quartiers d’habitat social pour en faire un problème public local interpellant le traitement global des classes populaires urbaines.
Alors que la ségrégation urbaine est aujourd’hui bien renseignée, alors qu’une attention fine est désormais déployée à l’égard de l’inscription territoriale des comportements politiques, c’est à la ...médiation des intérêts sociaux dans l’action publique et à ses traductions territoriales que cet article est consacré. En revenant sur le traitement de la desserte en transport en commun des quartiers populaires de Vaulx-en-Velin – l’une des communes les plus pauvres en France –, nous interrogeons l’évolution du rapport de l’offre politique aux espaces populaires de l’abstention. À mesure que les élus perdent leur ancrage dans les sociabilités populaires marquées par une démobilisation électorale, c’est aussi la façon de représenter les intérêts sociaux dans l’action publique urbaine qui évolue. Dans cette commune, l’intégration progressive des maires aux espaces de gouvernement de l’agglomération n’a pas empêché la relégation des quartiers populaires dans l’action publique. Celle-ci résulte notamment de leur socialisation aux cadrages et aux dispositifs d’action qui circulent dans ces espaces et produisent une hiérarchie des territoires.
This manuscript proposes an efficient and reproducible protocol for the generation of genetically modified human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) by genome editing using CRISPR-Cas9 ...technology. Here, we describe the experimental strategy for generating knockout (KO) and knockin (KI) clonal populations of hiPSCs using single-cell sorting by flow cytometry. We efficiently achieved up to 15 kb deletions, molecular tag insertions, and single-nucleotide editing in hiPSCs. We emphasize the efficacy of this approach in terms of cell culture time.
For complete details on the use and execution of this protocol, please refer to Canac et al. (2022) and Bray et al. (2022).
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•Generation of knockout and knockin edits in hiPSCs using the CRISPR-Cas9 RNP system•FACS-assisted genome editing of hiPSCs•An optimized approach for culturing and genotyping hiPSC clones
Publisher’s note: Undertaking any experimental protocol requires adherence to local institutional guidelines for laboratory safety and ethics.
This manuscript proposes an efficient and reproducible protocol for the generation of genetically modified human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) by genome editing using CRISPR-Cas9 technology. Here, we describe the experimental strategy for generating knockout (KO) and knockin (KI) clonal populations of hiPSCs using single-cell sorting by flow cytometry. We efficiently achieved up to 15 kb deletions, molecular tag insertions, and single-nucleotide editing in hiPSCs. We emphasize the efficacy of this approach in terms of cell culture time.
Proprotein convertase subtilisin kexin type 9 (PCSK9) is a key regulator of low-density lipoprotein (LDL) cholesterol metabolism and the target of lipid-lowering drugs. PCSK9 is mainly expressed in ...hepatocytes. Here, we show that PCSK9 is highly expressed in undifferentiated human induced pluripotent stem cells (hiPSCs). PCSK9 inhibition in hiPSCs with the use of short hairpin RNA (shRNA), CRISPR/cas9-mediated knockout, or endogenous PCSK9 loss-of-function mutation R104C/V114A unveiled its new role as a potential cell cycle regulator through the NODAL signaling pathway. In fact, PCSK9 inhibition leads to a decrease of SMAD2 phosphorylation and hiPSCs proliferation. Conversely, PCSK9 overexpression stimulates hiPSCs proliferation. PCSK9 can interfere with the NODAL pathway by regulating the expression of its endogenous inhibitor DACT2, which is involved in transforming growth factor (TGF) β-R1 lysosomal degradation. Using different PCSK9 constructs, we show that PCSK9 interacts with DACT2 through its Cys-His-rich domain (CHRD) domain. Altogether these data highlight a new role of PCSK9 in cellular proliferation and development.
•PCSK9 is highly expressed in undifferentiated hiPSCs•PCSK9 regulates hiPSC proliferation•PCSK9 controls NODAL signaling and SMAD2 phosphorylation in hiPSCs•PCSK9 controls TGFβ-R1 expression, potentially through its interaction with DACT2
In this article, Si-Tayeb and colleagues described that proprotein convertase PCSK9 controls the NODAL signaling pathway through a regulation of SMAD2 phosphorylation in hiPSCs. The endogenous inhibitor of the type 1 TGFβ receptor DACT2 was found as a potential target for PCSK9. These results highlight a new role for PCSK9 in cell proliferation and development.
Cet article s’interroge sur la permanence d’un syndicat mixte de transport en commun alors que la réforme territoriale engagée depuis les années 1960 en France encourage le renforcement des ...structures intercommunales. L’étude de la création de la communauté urbaine de Lyon en 1969 révèle les entreprises développées par les élus locaux de premier plan pour conserver des équilibres politiques et la hiérarchie entre les élus. L’institution syndicale permet de maintenir un espace restreint des décisions en matière de transport qui conforte les intérêts des maires des deux ville-centres de l’agglomération. Cette confiscation politique des débats concernant la répartition des ressources intercommunales joue notamment contre la desserte des principaux foyers de peuplement de la banlieue populaire.
Cet article analyse sur le temps long la carrière de trois élus entrés en politique lors des élections municipales de 1977. À travers ce moment de renouvellement générationnel et politique à gauche, ...nous montrons que l’intercommunalité procure des ressources politiques à même d’autonomiser ces élus de leur parti, tout en leur assurant des positions de pouvoir durables : bien qu’initialement dans l’opposition, ils reproduisent le fonctionnement consensuel et transpartisan des institutions intercommunales. La trajectoire de la « génération 77 » éclaire plus généralement les effets du processus de notabilisation sur la fabrique de l’action publique, tenant à distance les intérêts des populations dont ces élus avaient pourtant revendiqué la représentation.
Cet article traite du processus de relégation des territoires accueillant d’importants quartiers d’habitat social à partir de l’étude des politiques de transports urbains menées à une échelle ...d’agglomération. À mesure que les thématiques de mobilité et d’accessibilité ont été portées au-devant des agendas urbains, figurant désormais parmi les avantages compétitifs des « métropoles », le suivi de l’investissement public des réseaux de transport dessine un développement à géométrie variable de la mobilité au détriment des populations modestes des quartiers d’habitat social.En proposant une sociohistoire des configurations d’action publique, nous analysons trois projets successifs d’infrastructure de transport concernant Vaulx-en-Velin, commune populaire de la première couronne lyonnaise. Depuis la construction des grands ensembles dans les années 1970, ces projets s’inscrivent dans des contextes différents et incarnent ainsi les inflexions dans la définition d’un problème de desserte des banlieues populaires. Ils invitent à comprendre un processus a priori paradoxal : l’éloignement des projets de transport des grands quartiers d’habitat social est concomitant d’une intégration de la municipalité aux institutions intercommunales. Nous proposons d’éclairer ces évolutions en croisant une littérature portant sur les modes de gouvernement « métropolitain » et intercommunaux et des études s’intéressant à la construction du problème des « quartiers » comme fondement des programmes de renouvellement urbain.
Studying urban transport policies at the metropolitan scale, this paper sheds light on the processes by which social housing neighborhoods get relegated. As the issues of mobility and accessibility ...have been brought to the forefront of urban policy agendas – so much so as to be considered as significant competitive advantages of cities – the studying of public investments in the realm of urban transportation shows an unbalanced development at the expense of working class groups. Proposing a sociohistorical approach of local public policies, we analyze three successive transport infrastructure projects targeting the city of Vaulx-en-Velin (Lyon Metro area). Beginning in the 1970s, when public housing was built, these projects take place in different contexts and reflect different ways of trying to solve the issue of connecting the suburbs with the rest of their respective cities. They are a strong incite to analyze what at first sight seems to be a paradox: following integration of the commune with inter-municipal institutions, the projects aiming at building new transport infrastructures inlarge public housing areas weaken. This analysis draws on literature dealing with “metropolitan” and inter-municipal government modes, as well as literature focusing on the ongoing construction of public housing neighborhoods as a public issue linked with urban renewal programs.
Cet article appréhende les politiques de transport urbain et leurs répercussions sur le gouvernement métropolitain des banlieues. Il s’agit de revenir sur l’évolution du traitement de la desserte en ...transport en commun des grands quartiers d’habitat social à partir du cas de Vaulx-en-Velin dans l’agglomération lyonnaise. Perçu à travers les problématiques d’équipements qui accompagnent la construction des grands ensembles sur la commune dans les années 1970, celui-ci se confronte à l’émergence d’une politique de déplacements aux mains d’institutions d’agglomération qui s’autonomisent alors de l’État. Points d’entrée de la municipalité de banlieue dans une arène intercommunale, les politiques de transport vont cristalliser le consensus qui s’opère peu à peu autour d’une nouvelle problématisation des quartiers d’habitat social accompagnant la construction d’une politique de la ville sur l’agglomération. Mais, à mesure que la desserte de la commune est intégrée à l’agenda des politiques métropolitaines, les projets d’infrastructure s’éloignent un peu plus de ces quartiers.
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