1 Institute for Medical Microbiology, Infectious and Epidemic Diseases, Ludwig-Maximilians-University Munich, Veterinärstraße 13, 80539 Munich
and 2 Institute of Microbiology and Hygiene, University ...of Regensburg, Franz-Josef-Strauß-Allee 11, 93053 Regensburg, Germany
The extracellular portion (amino acids 1 to 844) of the equine herpesvirus type 1 (EHV-1) glycoprotein gp14, the homologue of gB of herpes simplex virus, was expressed in Escherichia coli and in insect cells using a recombinant baculovirus. Immunoblot analysis revealed that the recombinant E. coli expressed a fusion protein of M r 135K which was composed of the truncated gp14 and the maltose-binding protein (MBP) provided by the vector and a 90K protein lacking the MBP moiety. Both proteins were sequestered within the cells in form of inclusion bodies. Infection of insect cells with the recombinant baculovirus resulted in the production of a 115K to 118K glycoprotein which was cleaved intracellularly into two subunits of M r 55K and 63K to 65K. The cleaved subunits were secreted into the cell culture supernatant and formed disulphide-linked dimers of M r 120K to 122K. The recombinant proteins produced in E. coli and in insect cells elicited EHV-1-specific antibodies in goats as demonstrated by Western blot analysis. The gp14 expressed in insect cells induced antibodies with virus-neutralizing activity. In contrast, the truncated gp14 expressed by E. coli failed to elicit neutralizing antibodies. The results suggest that post-translational modification of the EHV-1 gp14 may be important for the expression of epitopes necessary for the induction of neutralizing antibodies.
Received 24 December 1993;
accepted 30 January 1994.
The digoxigenin-based non-radioactive DNA labeling and detection system was applied in various hybridization protocols using digoxigenin-labeled probes obtained by enzymatic incorporation of ...Dig-11-dUTP. In genomic blots single-copy genes (human tissue-type plasminogen activator, constant part of immunoglobulin kappa light chain) can be detected with only 0.5 to 5 micrograms human DNA depending on the type of probe and the length of the hybridizing region. Due to its high sensitivity and specificity, the digoxigenin system is also appropriate for colony-, plaque-, and in situ hybridizations with metaphase chromosome spreads and fixed cells. Especially in the latter applications it is of great advantage, that with the digoxigenin system any significant background or unspecific side reactions with biological materials are avoided.
Zusammenfassung
Die guten Erfahrungen des letzten Jahrzehnts mit Hydroxylapatitkeramiken zur Auffüllung v.a. metaphysärer Knochendefekte haben die Bedeutung von Knochenersatzmaterialien im klinischen ...Alltag bestätigt. Auf der Suche nach biologisch abbaubaren Substanzen haben sich in letzter Zeit zunehmend Kalziumphosphatzemente etabliert. Für einige Indikationen, wie langstreckige diaphysäre Defekte oder Situationen mit schlechter Weichteildeckung sind die Möglichkeiten des Knochenersatzes noch immer sehr begrenzt. Die vorliegende Arbeit zeigt verschiedene Indikationen für die einzelnen Materialien auf und gibt einen Ausblick auf die zu erwartende Entwicklung im Bereich des Knochenersatzes und des Tissue Engineering.
Osteoidosteom Spiro, A.S.; Zustin, J.; Habermann, C. ...
Der Orthopäde,
10/2009, Letnik:
38, Številka:
10
Journal Article
Zusammenfassung
Hintergrund
In den letzten Jahren wurden Osteoidosteome zunehmend mittels perkutaner Therapieverfahren behandelt. Die Mehrzahl dieser Verfahren ließ jedoch keine histologische ...Diagnosesicherung zu. Die vorliegende Studie stellt die Ergebnisse dar, die mit einer minimal-invasiven Resektion mittels variabler Hohlfräsen erzielt wurden und vergleicht sie mit den Ergebnissen anderer Therapieverfahren.
Material und Methode
Bei 6 Patienten im Alter von 10–20 Jahren wurde zwischen 2004 und 2006 der Nidus eines Osteoidosteoms im Bereich der langen Röhrenknochen der unteren Extremitäten unter Bildverstärkerkontrolle mittels variabler Hohlfräsen reseziert und histologisch aufgearbeitet.
Ergebnisse
Bei allen Patienten konnte der Nidus erfolgreich entfernt und die Diagnose eines Osteoidosteoms histologisch gesichert werden. Die durchschnittliche Operationszeit betrug 22,8 min, der Krankenhausaufenthalt maximal 2 Tage. Nach Abheilung der Wunden konnten alle Patienten die operierte Extremität voll belasten und waren im Verlauf der postoperativen 2-jährigen Tumornachkontrolle rezidiv- und beschwerdefrei.
Schlussfolgerung
Bei ausgewählten Lokalisationen und gut sichtbarem Nidus stellt die Resektion des Osteoidosteoms mit variablen Hohlfräsen eine minimal-invasive Alternative zu den etablierten offen-chirurgischen und interventionellen CT-gesteuerten Therapieverfahren dar, insbesondere wenn eine histologische Diagnosesicherung gewünscht wird bzw. erforderlich ist.