Praxiten® (oksazepam) jedan je od najpoznatijih psihoaktivnih lijekova u nas. Mehanizam djelovanja je pojačanje učinaka središnjega najrasprostranjenijeg inhibicijskog neurotransmitora ...gama-aminomaslačne kiseline (GABA). Bioraspoloživost oksazepama je od 65 do 85%. Vrijeme poluživota oksazepama je oko 10 sati. Oksazepam ima blago odgođen početak djelovanja za razliku od npr. diazepama ili flurazepama te stoga ima manji potencijal za razvijanje ovisnosti. Praxiten® je svakako vrlo koristan lijek za velik broj pacijenata koji pate od anksioznosti i nesanice, kao i apstinencijskih simptoma tijekom odvikavanja od alkoholnih pića. Osobito je koristan u pacijenata kojima ne treba žurna i robustna anksioliza, u starijih pacijenata koji pate od nesanice, osobito s tegobama prosnivanja sredinom noći. Zbog kratkog djelovanja oksazepam će manje vjerojatno prouzročiti jutarnju mamurnost od npr. diazepama. Kako oksazepam nema oksidacijsku biotransformaciju u jetri, on je vjerojatno dobar izbor u pacijenata koji rabe velik broj lijekova ili u onih u kojih je oštećena eliminacija benzodiazepina.
U ovom radu provedena je biokatalitička oksidacija heksanola pomoću cijelih stanica pekarskog kvasca. Reakcija je katalizirana enzimom alkohol dehidrogenazom (ADH) koji je u stanici kvasca odgovoran ...za reakciju redukcije acetaldehida. Enzim alkohol dehidrogenaza pripada skupini oksidoreduktaza, te je za provođenje reakcije oksidacije nužno prisustvo koenzima NAD+. Regeneracija koenzima se provodila dodatkom kisika koji omogućuje respiratornom lancu stanica kvasca nastajanje oksidiranog kofaktora. Reakcija oksidacije heksanola provedena je uz permeabilizirane i nepermeabilizirane stanicame u vodenom i dvofaznom (heksan-voda) sustavu. Postavljen je matematički model biokatalitičke oksidacije heksanola i regeneracije koenzima. Eksperimenti su provedeni u kotlastom reaktoru. Produkti biokatalitičke oksidacije heksanola katalizirane pekarskim kvascem su bili heksanal i heksan kiselina. U vodenom mediju postignuta je 100% konverzija heksanola kod permeabiliziranih i ne-permeabiliziranih stanica. Konverzija heksanola u dvofaznom mediju korištenjem ne-permeabiliziranih stanica je cca 40%, dok je s permeabiliziranim stanicama oko 50%. U svim slučajevima iskorištenje na heksanalu je bilo izuzetno nisko, a heksan kiselina je detektirana kao glavni produkt reakcije.
3-Hidroksipropionska kiselina je novi antimikrobni agens koji se može upotrijebiti za suzbijanje patogenih bakterija u hrani, kao što su vrste iz rodova Salmonella i Staphylococcus. Bakterija ...Lactobacillus reuteri iz glicerola sintetizira 3-hidroksipropionsku kiselinu biosintetskim putem ovisnim o koenzimu A, kodiranim operonom za korištenje propandiola koji je reguliran kataboličkom represijom. U mutantu L. reuteri RPRB3007 u kojem nema kataboličke represije, ispitanom pomoću metode PCR, primijećeno je 2,5 puta više transkripata gena pduP, pduW i pduL, i to tijekom logaritamske faze rasta bakterije. Proizvodnja 3-hidroksipropionske kiseline određena je u stanicama koje se ne dijele, a bile su resuspendirane u fosfatnom puferu, te u šaržnim kulturama uzgojenim u podlozi MRS s različitim omjerima glukoze i glicerola. Utvrđeno je da se u mutantu zbog pojačane ekspresije gena biosintetskog puta povećala specifična brzina nastajanja 3-hidroksipropionske kiseline, i to s 0,167 na 0,257 g po gramu suhe biomase po satu. Osim toga, sinteza je 3-hidroksipropionske kiseline u stanicama koje se ne dijele bila usporena nakon dodatka reuterina u koncentraciji od (30±5) mM. U šaržnom uzgoju nije utvrđena prisutnost 3-hidroksipropionske kiseline tijekom logaritamske i stacionarne faze rasta divljeg soja i mutanta, što je potvrđeno i NMR spektroskopijom. Međutim, nakon ispiranja i povratka u stanje mirovanja ove su stanice ponovno proizvodile 3-hidroksipropionsku kiselinu. Zaključeno je da laktat i acetat, primarni produkti katabolizma glukoze, vjerojatno inhibiraju sintezu 3-hidroksipropionske kiseline u šaržnim kulturama, što je potvrđeno činjenicom da dodatak laktata u koncentraciji od (25±5) mM ili acetata u koncentraciji od (20±5) mM podlozi sprečava sintezu 3-hidroksipropionske kiseline. Osim toga, uklanjanjem je natrijevog acetata i glukoze (izvora ugljika za proizvodnju mliječne kiseline) potaknuta proizvodnja 3-hiroksipropionske kiseline u hranjivoj podlozi MRS na sličan način kao i uporabom fosfatnog pufera. Iako je genetička represija u mutantu izbjegnuta pojačanom ekspresijom gena biosintetskog puta, proizvodnja je 3-hidroksipropionske kiseline i dalje bila ograničena supstratom i kataboličkom inhibicijom.
N,N-dimetilbenzenamin i N,N,3-trimetilbenzenamin demetilirani su enzimskim reakcijama kataliziranim pomoću cijelih stanica sojeva Aspergillus terreus SSP 1498, URM 3371 i URM 3571. U kiseloj i ...lužnatoj sredini dobiveni su veliki udjeli proizvoda, tj. N-metilbenzenamina i N,3-dimetilbenzenamina. Dodatak oksidansa tert-butilnog peroksida nije pospješio oksidativnu N-demetilaciju tercijarnih aromatskih amina, kataliziranu pomoću plijesni A. terreus, ali je doveo do daljnje demetilacije N,N-dimetilbenzenamina u anilin. Ispitani sojevi A. terreus nisu pospješili dealkilaciju N,N-dietilbenzenamina.
Svrha je ovoga rada bila istražiti mikrobnu oksidaciju limonena s pomoću psihrotrofnog soja uzgojenog u podlozi obogaćenoj kisikom. Ovim se alternativnim postupkom, u podlozi za biotransformaciju ...limonena s pomoću soja Mortierella minutissima 01, koncentracija otopljenog kisika povećala kataliziranom razgradnjom vodikovog peroksida na kisik i vodu. Automatiziranim dodavanjem vodikova peroksida u bioreaktor održavala se stalna koncentracija otopljenog kisika u rasponu od 5 do 100 % (±2 %). Glavni su produkti biotransformacije limonena perilil alkohol i perilil aldehid. U usporedbi s klasičnim postupkom aeracije miješanjem, uzgojem M. minutissima 01 u podlozi obogaćenoj vodikovim peroksidom proizvedena je dvostruka količina perilil alkohola. U radu su također istraženi čimbenici koji utječu na prinos, pa je utvrđeno da je dodatak 0,3 %-tnog metanola povećao količinu proizvedenog perilil alkohola za 1,4 puta i da je maksimalni prinos od 258,1 mg/L postignut nakon 2-3 dana uzgoja u podlozi s 0,5 % supstrata pri pH=6 i temperaturi od 15 °C. Optimiranjem uvjeta biotransformacije aktivnost se biokonverzije povećala 3,6 puta.
Cijele stanice bakterija koje razgrađuju vodik, izolirane iz onečišćenih sedimenata iz zaljeva Santos (Baixada Santista, São Paulo, Brazil), upotrijebljene su kao katalizatori oksidacije i redukcije ...raznih supstituiranih feniletanola i acetofenona. Brojni supstituirani feniletanoli nastali su u velikom enantiomernom višku (>99 %). Rezultati mikrobne oksidacije feniletanola 2, 3, 5-7 s pomoću bakterijskog soja Acinetobacter sp. 6,4T i redukcije acetofenona 1a-6a s pomoću soja Serratia marcescens 5,4T pokazali su da postoji velika mogućnost njihove primjene u biotehnološkim procesima. Redukcijom prokiralnih acetofenona s pomoću soja Serratia marcescens 3,5T nastali su optički aktivni alkoholi u enantiomernom višku od 90 do 99 %, te je utvrđeno da je soj Acinetobacter sp. 6,4T jak biokatalizator oksidacije alkohola.
Whole cells of hydrocarbon-degrading bacteria, isolated from polluted sediments in the Santos Estuary (Baixada Santista, São Paulo, Brazil), were able to catalyse oxidoreduction reactions with ...various substituted phenylethanols and acetophenones as substrates. A number of substituted phenylethanols were formed with high (>99 %) enantiomeric excess. The results of microbial oxidation of phenylethanols 2, 3, 5–7 by Acinetobacter sp. 6.4T and the reduction of acetophenones 1a–6a by Serratia marcescens 5.4T showed that the bacteria used as biocatalysts in this study present significant potential for exploitation in biotechnological processes. The reduction of prochiral acetophenones by Serratia marcescens 3.5T yielded optically active alcohols with 90–99 % enantiomeric excess, and Acinetobacter sp. 6.4T is a potential biocatalyst for the oxidation of alcohols.
Cijele stanice bakterija koje razgrađuju vodik, izolirane iz onečišćenih sedimenata iz zaljeva Santos (Baixada Santista, São Paulo, Brazil), upotrijebljene su kao katalizatori oksidacije i redukcije raznih supstituiranih feniletanola i acetofenona. Brojni supstituirani feniletanoli nastali su u velikom enantiomernom višku (>99 %). Rezultati mikrobne oksidacije feniletanola 2, 3, 5-7 s pomoću bakterijskog soja Acinetobacter sp. 6,4T i redukcije acetofenona 1a-6a s pomoću soja Serratia marcescens 5,4T pokazali su da postoji velika mogućnost njihove primjene u biotehnološkim procesima. Redukcijom prokiralnih acetofenona s pomoću soja Serratia marcescens 3,5T nastali su optički aktivni alkoholi u enantiomernom višku od 90 do 99 %, te je utvrđeno da je soj Acinetobacter sp. 6,4T jak biokatalizator oksidacije alkohola.
Sojevi plijesni Aspergillus terreus URM 3371 i A. terreus CCT 4083, izolirani u Brazilu, katalizirali su deracemizaciju (RS)-1-(4-metilselanil)feniletanola (1) i (RS)-1-(4-etilselanil)feniletanola ...(2). Upotrijebljene su cijele stanice plijesni različite mase (1-5 g), pri različitoj pH-vrijednosti (4 i 7) i temperaturi biotransformacije (20 i 32 °C), uz dodatak raznih aditiva (etanol, butanol, propanol i cikloheksanol) radi poboljšanja prinosa i selektivnosti proizvoda. Soj A. terreus URM 3371 transformirao je (RS)-1 u (+)-(RS)-1 s velikim enantiomernim viškom (≥98 %), dobrom pretvorbom (≥98 %) i prihvatljivim prinosom (53 %).
U radu je istražen učinak kloramfenikola na aktivnost jetrenih biotransformacijskih enzima anilin hidroksilazu (Ah) i etilmorfifi n N-demetilazu (EtND) te na razinu serumskih enzima alanin ...aminotransferaze (ALT) i glutamat dehidrogenaze (GLDH) u zamorčića (Cavia porcellus). Osim toga, istražen je utjecaj premedikacije kloramfenikolom na trajanje anestezije pentobarbitalom i kombinacijom ksilazin/ketamin. Zamorčićima muškoga spola, težine 269-353 g, supkutano je apliciran kloramfenikol u obliku natrijeva sukcinata u dozi 60 i 100 mg/kg tjelesne mase tijekom tri uzastopna dana. Nakon toga primijenjeni su anestetici: prvoj skupini 30 mg pentobarbitala/kg t.m., i.p. i drugoj skupini 60 mg ketamina i 4 mg ksilazina/kg t.m., s.c. Rezultati su pokazali da kloramfenikol nije značajno utjecao na koncentaraciju ALT i GLDH u serumu. Međutim, kloramfenikol u dozi od 100 mg/kg t.m. značajno je umanjio aktivnost Ah i EtND, i to za -36,1% i -38,6%. S druge strane, trajanje anestezije nakon primjene pentobarbitala i kombinacije ketamina i ksilazina u zamorčića prethodno obrađenih kloramfenikolom nije bilo statistički značajno produženo. Naši rezultati upućuju na to da umanjena aktivnost biotransformacijskih enzima nakon primjene kloramfenikola nije utjecala na jetreni metabolizam dvaju testiranih anestetika u zamorčića te da primjena kloramfenikola nije produžila vrijeme trajanja anestezije što je suprotno nalazima kod pasa, mačaka, štakora i miševa.
Gentizinamid (GAM), metabolit prvog prolaska salicilamida (SAM), analiziran je uporabom FT-IR, te jednodimenzijskom i dvodimenzijskom homo- i heteronuklearnom 1H i 13C NMR spektroskopijom.
GAM je ...izoliran iz ljudskog urina osam sati nakon oralne primjene SAM-a, a strukturna analiza provedena je pomoću FT-IR, 1H i 13C NMR uporabom kemijskih i supstituentnih pomaka, konstanti spin-spin sprege, te povezanosti u COSY, NOESY, HETCOR i HBMC spektrima.
Iz NOESY spektra DMSO-d zaključeno je da su protoni amidne skupine gentizinamida usmjereni prema orto-protonu na C-6 položaju. Rezultati ukazuju na to da prisustvo dodatne fenolne skupine C5-OH u GAM favorizira stvaranje intramolekulske vodikove veze O...HO tipa između C2-OH protona i kisika amidne skupine.
PDF
