Suvremena istraživanja u povrćarstvu, osim ostvarenja visokog prinosa, nastoje osigurati i rješenja za uzgoj kultivara koji sadrže povećani udio biološki aktivnih spojeva. Ciljana primjena mineralnih ...gnojiva može utjecati na nutritivnu vrijednost, ali i na sadržaj i sastav sekundarnih metabolita u biljci. Međutim, vrlo je malo podataka koji se odnose na utjecaj mineralnih gnojiva na sadržaj sekundarnih metabolita u listu batata. Stoga je u ovom radu istražen utjecaj folijarne prihrane gnojivom Fitolife (glavna komponenta CaCO3) na sadržaj i sastav fenolnih spojeva i antioksidacijsku aktivnost u listovima batata sorte Bat1 i Boniato. Na temelju dobivenih podataka vidljivo je da se istražene sorte različito
ponašaju nakon primjene folijarne ishrane gnojivom Fitolife. U Bat1 sorti gnojivo Fitolife utjecalo je na smanjenje sadržaja ukupnih fenolnih kiselina, uz istovremeno povećanje sadržaja ukupnih flavonoida zbog povećanja kampferola, apigenina i kvercetina. Kod sorte Boniato nisu utvrđene statistički značajne promjene u sadržaju ukupnih fenolnih kiselina, a folijarna aplikacija gnojiva Fitolife negativno je utjecala na sadržaj identificiranih flavonoida, miricetina i kvercetina. Značajne razlike u sadržaju fenolnih kiselina i flavonoida između uzoraka batata ukazuju da je potencijalno moguće manipulirati konvencionalnim uzgojem. Budući da je batat relativno nova kultura na našem tržištu, a posebice o listu
batata se vrlo malo zna, nadamo se da će rezultati ovog rada pobuditi veći interes kod uzgajivača, ali i krajnjih potrošača za list batata kao namirnice visoke nutritivne vrijednosti te da će uzgajivačima, zajedno s agronomskim pokazateljima, pomoći pri procjeni svrhovitosti foliarne primjene Fitolifa.
A method was developed for the determination of flavonoids present in fresh and processed fruit and vegetable products. The flavonoids were extracted using a mixture of dimethylsulphoxide/ethanol ...(1/19 v/v) at ambient temperature and analysed by HPLC with reverse phase C18 column. This method was applied to the characterisation of the phenolic component of fresh products such as tomato cultivars and processed products such as orange, apple and pear juices. The data obtained were compared with those reported in literature and with those obtained using official methods. As to tomatoes, it is to be underlined that with this method it was possible to determine rutin both qualitatively and quantitatively. This has never been reported in literature and only after hydrolysis quercetin the corresponding aglycone, was determined. As to juices, the obtained data were compared with those resulting from the use of a standardised method; the comparison was made using the statistical test of difference of means and the two methods gave similar results. The method proposed in this work proved to be rapid and reliable; the analytical results obtained are repeatable and reproducible
E' stato messo a punto un metodo per l'estrazione e la determinazione di flavonoidi presenti in prodotti ortofrutticoli freschi e trasformati. I flavonoidi sono stati estratti con l'utilizzo di una miscela di dimetilsolfossido/etanolo (1/19 v/v) a temperatura ambiente e analizzati mediante cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC) con colonna C18 a fasi inverse. Questo metodo e' stato applicato per la caratterizzazione della componente fenolica di prodotti freschi quali cultivar di pomodoro e di prodotti trasformati quali succhi di arancia, mela e pera. I dati ottenuti sono stati confrontati con quelli riportati in letteratura e con quelli ottenuti con l'utilizzo di metodi stabiliti mediante norme. Per quanto riguarda il pomodoro, si sottolinea che e' stato possibile con questa metodica determinare quali-quantitativamente la rutina. In letteratura cio' non e' stato mai riportato e solo in seguito a idrolisi e' stata determinata la quercetina, l'aglicone corrispondente. Relativamente ai succhi, sono stati confrontati i dati ottenuti con quelli corrispondenti all'utilizzo di un metodo normato; il confronto e' stato effettuato con l'ausilio del test delle ipotesi sull'uguaglianza delle medie e i metodi hanno dato risultati simili. Il metodo proposto in questo lavoro risulta essere rapido e affidabile: i risultati analitici ottenuti sono ripetibili e riproducibili
U radu je ispitan sastav hlapljivih tvari i flavonoida u kori citrona (Citrus medica L. var. Corsican) uzgojenog na Korzici, različitog stupnja zrelosti izračunatog pomoću sume aktivnih temperatura. ...Razlike u stupnju razvoja plodova kvantitativno su određene plinskom kromatografijom, plinskom kromatografijom u kombinaciji s masenom spektrometrijom, te tekućinskom kromatografijom praćenom tandemskom masenom spektrometrijom. Identificirano je 30 hlapljivih komponenata eteričnog ulja dobivenog iz kore citrona, a najzastupljeniji su bili limonen i γ-terpinen. Komercijalno proizvedeni liker od citrona također je imao veliki udjel monoterpenskih ugljikovodika, među kojima su prevladavala ta ista dva spoja. Glavni su flavonoidi u citronu i likeru bili rutin i neohesperidin. Ovaj se postupak karakterizacije spojeva može primijeniti za procjenu kakvoće prehrambenih proizvoda dobivenih iz ploda citrona (C. medica var. Corsican).
A crude anthocyanin concentrate (CAC) was obtained from pigmented oranges by absorption on a non-ionic resin, elution with 0.1% citric acid in ethanol and concentration under reduced pressure. The ...colour degradation during heating CAC solutions in different pH buffers a 80 deg C followed first order reaction kinetics in all buffers and half-lives decreased from 791 min at pH 2.5 to 197 min at pH 4.5. When solutions of CAC in pH-buffer 3.5 were heated for 3h at different temperatures, the colour loss was less than 20% at 60 deg C, 70 deg C and 80 deg C and more than 50% at 90 deg C and 100 deg C. The rate of thermal degradation at 80 deg C increased linearly when the a subW of a CAC-glycerol-water model system increased from 0.37 to 1.0. The stability of CAC in a carbonated and ethanolic beverage was adversely influenced by storage temperature and exposure to daylight. These findings suggest that this colour extract could be used as a natural colourant in food or beverages with low pH and a subW values stored at low temperatures and in containers that exclude light
Un estratto grezzo di antocianine (CAC) e' stato ottenuto da arance rosse mediante adsorbimento su resina non ionica, successiva eluizione con una soluzione di acido citrico allo 0,1% in alcool etilico e concentrazione dell'eluito a pressione ridotta. Durante il riscaldamento di soluzioni di CAC in soluzioni tampone di differenti pH a 80 gradi C, la degradazione del colore ha seguito una cinetica del primo ordine in tutte le soluzioni tampone ed i tempi di mezza vita sono diminuiti da 791 min a pH 2,5 fino a 197 min a pH 4,5. Quando le soluzioni di CAC in soluzioni tampone pH 3,5 sono state scaldate per 3 ore a differenti temperature. La perdita di colore fu sotto il 20% a 60 gradi C, 70 gradi C e 80 gradi C e sopra il 50% a 90 gradi C e 100 gradi C. La velocita' della degradazione termica a 80 gradi C e' aumentata in modo lineare quando l'a infW del sistema modello CAC in glicerolo-acqua e' aumentata da 0,37 a 1,0. La stabilita' di CAC in una soluzione etanolica carbonatata e' stata influenzata negativamente dalla temperatura di conservazione e dalla esposizione alla luce del giorno. Questi risultati suggeriscono che l'estratto puo' essere usato come colorante naturale soltanto in bevande con basse temperature ed in contenitori adatti a limitare l'effetto della luce
U ovom radu ispitivan je utjecaj vremena i temperature maceracije tijekom pripreme voćnih čajeva (brusnica, borovnica, trešnja i šumsko voće) na sadržaj polifenola, antocijana, flavonoida, ...kondenziranih tanina i antioksidativnu aktivnost. Čajevi su macerirani pri 80 i 100 °C 5 donosno 8 minuta. Ispitivan je i utjecaj ponovljene maceracije istih čajeva na sadržaj navedenih komponenti. Maceracijom čajeva pri 100 °C, u uzorcima je određen veći sadržaj polifenola, antocijana, flavonoida i kondenziranih tanina, a vrijednosti antioksidativne aktivnosti su bile veće. Nakon ponovljene maceracije sadržaj polifenola, flavonoida i kondenziranih tanina bio je znatno manji. Vrijednosti antioksidativne aktivnosti su također bile niže nakon ponovljene maceracije.
U radu je opisano ispitivanje antioksidativnog učinka etanolnog ekstrakta i pojedinih frakcija kore stabljike biljke T. catigua. IC50 (za DPPH test) varirao je između 9,17 ± 0,63 i 76,42 ± 5,87 μg ...mL1, a ukupni sadržaj fenola od 345,63 ± 41,08 i 601,27 ± 42,59 µg GAE po gramu suhog ekstrakta. Etanolni ekstrakt i frakcije značajno su reducirale Fe2+-induciranu lipidnu peroksidaciju. Nadalje, reducirana je oksidacija diklorfluoresceina inducirana ionima kalcija u mitohondrijima, a redukcija je ovisila o dozi etanolnog ekstrakta. Etanolni ekstrakt smanjio je mitohondrijsku Δψ samo pri visokim koncentracijama (40100 μg mL1), što ukazuje da se toksičnost ne preklapa s antioksidativnim učinkom. Rezultati pokazuju da u farmakološko djelovanje T. catigua treba uključiti i antioksidativni učinak.
Capillary electrophoresis (CE) is a powerful microanalytical technique based on electrophoretic separation in narrow capillaries. The fast speed of analysis, high resolution and sensitivity make CE ...an attractive method to separate a wide range of charged and uncharged compounds, including substances of food interest. This review is organized into three parts. The first part deals with fundamental aspects of CE, specifically the relationships between migration time, electrophoretic and electroosmotic mobility in capillary zone electrophoresis (CZE). The second part focuses on the application of those principles to obtain separation of uncharged and charged species by Micellar Electrokinetic Chromatography (MEKC). In the third part the most recent works are reviewed on the application of different modes of CZE and MEKC for analyzing natural and processed foods. A large selection of food components are covered, including carbohydrates, amino acids, proteins colorants and dyestuffs, flavonoids and vitamins. A list of applications reported in Appendix A gives a further overview of the wide application area of CE in food analysis which have appeared in the two last years
L'elettroforesi capillare (CE) e' una tecnica separativa ad alta risoluzione ed efficienza che consente l'analisi rapida di specie chimiche sia cariche che neutre. La presente rassegna e' organizzata in tre parti. Nella prima parte sono riportati gli aspetti fondamentali che regolano il processo separativo in CE, in particolare riguardo la correlazione esistente tra il tempo di migrazione, la mobilita' elettroforetica di analiti carichi ed il flusso elettroosmotico in un sistema elettroforetico in fase libera (CZE). Nella seconda parte sono riportati i principi che regolano il processo separativo di analiti neutri mediante cromatografia elettrocinetica micellare capillare (MEKC). Infine, viene presentata una rassegna delle piu' recenti applicazioni delle tecniche nell'ambito dell'analisi degli alimenti, in particolare riguardo ai lavori pubblicati negli ultimi due anni
U okviru ovog doktorskog rada po prvi put je provedeno opsežno usporedno istraživanje fitokemijskog sastava i bioloških učinaka odabranih vrsta roda Thymus hrvatske flore (T. longicaulis C. Presl, T. ...praecox Opiz subsp. polytrichus (A. Kerner ex Borbás) Jalas, T. pulegioides L., T. serpyllum L. subsp. serpyllum i T. striatus Vahl). Kvalitativna i kvantitativna analiza biološki aktivnih sastavnica provedena je primjenom kromatografskih tehnika (TLC, RP-HPLC-DAD, LC-ESI-MS/MS i GC-MS) i spektrofotometrijskih metoda. Ružmarinska kiselina je bila najzastupljenija polifenolna sastavnica svih istraživanih vrsta. Većina
identificiranih flavonoida bila je iz skupine flavona. Najveći broj pripadao je derivatima luteolina, dok se udjelom isticao skutelarin. Istraživane Thymus vrste značajno su se razlikovale prema sadržaju i sastavu eteričnog ulja. Vrste T. longicaulis i T. pulegioides bile su bogate timolom i/ili karvakrolom, dok je 1,8-cineol bio glavna sastavnica vrste T. serpyllum subsp. serpyllum. U eteričnom ulju planinskih vrsta T. praecox subsp. polytrichus i T. striatus prevladavali su seskviterpenski spojevi. Biološki učinci eteričnih ulja, biljnih ekstrakata i fenolnih sastavnica ispitani su u prikladnim in vitro eksperimentalnim sustavima.
Eterična ulja odabranih Thymus vrsta inhibirala su rast bakterija S. aureus, E. faecalis i E. coli. Ustanovljeno je da se uklapanjem eteričnih ulja u liposome zadržava isti ili se može postići bolji antibakterijski učinak. Istraživanim biljnim ekstraktima dokazana su snažna antioksidacijska svojstva temeljena na sposobnosti hvatanja slobodnih radikala, redukciji i keliranju iona željeza te sposobnost inhibicije lipidne peroksidacije. Thymus ekstrakti su pokazali sposobnost inhibicije Src tirozin kinaze te su
smanjili produkciju proupalnog citokina IL-6 u splenocitima Balb/C miševa. Rezultati provedenih fitokemijskih i bioloških istraživanja pokazali su da, među Thymus vrstama koje rastu u Hrvatskoj, tankolisna majčina dušica (T. longicaulis) ima najveći potencijal za primjenu u farmaciji, usporediv s farmakopejskom vrstom T. vulgaris.
In this doctoral thesis, a comprehensive comparative study of the phytochemical composition and biological effects of selected Thymus species (T. longicaulis C. Presl, T. praecox Opiz subsp. polytrichus (A. Kerner ex Borbás) Jalas, T. pulegioides L., T. serpyllum L. subsp. serpyllum i T. striatus Vahl) from Croatian flora was conducted for the first time. Qualitative and quantitative chemical analyses of bioactive compounds were carried out using various chromatographic (TLC, RP-HPLC-DAD, LC-ESI-MS/MS and GC-MS) and spectrophotometric methods. Rosmarinic acid was found to be the most abundant polyphenolic constituent of all investigated species. Most of the identified flavonoids were from the group of flavones, the largest number belonged to luteolin derivatives, while scutellarin was present with the highest concentration. The investigated Thymus species were significantly different according to the content and composition of
essential oils. Thymol and/or carvacrol were found to be the main components of essential oils of T. longicaulis and T. pulegioides, while T. serpyllum subsp. serpyllum was rich in 1,8-cineole. The mountain species T. praecox subsp. polytrichus and T. striatus were characterised by a high percentage of sesquiterpenes. The biological effects of essential oils, plant extracts and phenolic constituents were studied using different in vitro assays. Selected Thymus essential oils inhibited growth of bacterial strains S. aureus, E. faecalis and E. coli. It was found that encapsulation of essential oils in liposomes can maintain or even improve their antibacterial efficiency. The studied plant extracts displayed strong antioxidant properties by acting as free radical scavengers and reducing agents and, additionally, by chelating transition metals and inhibiting lipid peroxidation. The Thymus extracts showed Src tyrosine kinase inhibitory activity and they
reduced the production of proinflammatory cytokine IL-6 in Balb/C mice splenocytes. The results of phytochemical and biological investigations suggest that, among Croatian Thymus species, T. longicaulis has the greatest potential for pharmaceutical usage comparable to that of pharmacopoeial species T. vulgaris.
Osteoporoza je bolest kostura karakterizirana smanjenjem koštane mineralne gustoće (BMD) i poremećajem mikroarhitekture koštanog tkiva. Rizik za osteoporozu može biti genetski ili stečeni. Stečenom ...riziku pridonose brojni lijekovi, uključujući 13-cis retinoičnu kiselinu (13cRA). U ovome radu dokazano je da 13cRA u dozi od 80 mg kg-1 tijekom 14 dana uspješno uzrokuje osteoporotske promjene u štakora putem mehanizama povećanog oksidativnog stresa (OS) i stvaranja reaktivnih radikala, smanjenja aktivnosti osteoblasta i povećanja aktivnosti osteoklasta, smanjenja razine estrogena i pojavnosti upalnih citokina koji aktiviraju osteoklaste i uzrokuju apoptozu osteoblasta, smanjenja aktivnosti receptora vitamina D, smanjenja apsorpcije Ca2+ u crijevima i povećanja izlučivanja Ca bubrezima i učincima na paratireoidni hormon. Kroz model osteoporoze prouzročen 13cRA (RMO) u ovom istraživanju prikazana su protuoksidativnna, protuupalna, fitoestrogenska i regenerativna svojstva flavonoida (krizina, proantocijanida, naringenina, ikarina i kvercetina ) na osteoblaste i inhibiciju osteoklasta, što je pokazano odnosima između biljega OS, biokemijskim biljezima koštanog preokreta, mjerenjima koštane mase i geometrijskih odrednica bedrenih kosti, mjerenjima proupalnih citokina i histopatoloških oštećenja kosti. Učinci flavonoida uspoređeni su kroz navedene odrednice sa alendronatom, danas lijekom izbora u liječenju osteoporoze, a prikazana je i procjena oštećenja DNA kod RMO štakora nakon obrade flavonoidima i alendronatom. Dobiveni rezultati pokazuju mogućnost novog farmakoterapijskog pristupa u terapiji osteoporotičnih promjena u kojem laka dostupnost, ekonomska isplativost i nedostatak toksičnosti mogu biti prednost u primjeni flavonoida u odnosu na alendronat. Nadalje ovo istraživanje pridonosi boljem razumijevanju odnosa između prehrane i zdravlja te razvoja koncepta funkcionalne hrane s temeljnim ciljem postizanja boljeg zdravstvenog statusa, spriječavanja i liječenja bolesti.
Osteoporosis is a skeletal disease characterized by decreased bone mineral density (BMD) and bone microarchitecture disorder. The risk of osteoporosis can be genetic or acquired. Numerous medications including 13-cis retinoic acid (13cRA) contribute to the acquired risk. In this PhD thesis it has been proved that 13cRA at a dose of 80 mg kg-1 during 14 days successfully causes osteoporotic changes in the rats through the mechanisms of increased oxidative stress (OS) and the formation of reactive radicals, reduced activity of osteoblasts and increased osteoclast activity, decreased estrogen levels and the appearance of inflammatory cytokines which activate osteoclasts and cause osteoblasts apoptosis, reduction in vitamin D receptor activity, decreased absorption of Ca2+ in the intestine, increase the Ca secretion by kidneys and the effects on the parathyroid hormone. Through the model of osteoporosis caused by 13cRA (RMO) in this study are shown antioxidative, anti-inflammatory, phytoestrogenic and regenerative features of flavonoids (chrysin, proanthocyanidins, naringenin, icariin and quercetin) on osteoblasts and osteoclasts inhibition, which has been shown by the relationships between markers of OS, biochemical markers of bone turnover, measurements of bone mass and geometric determinants of thigh bones, measurements of proinflammatory cytokines and histopathological bone damage. The effects of flavonoids are compared through these features with alendronate, nowadays the medication of choice to treat osteoporosis, and the evaluation of DNA damage at RMO rats after the treatment with flavonoids and alendronate is presented. The results show the possibility of a new pharmacological approach for the treatment of osteoporotic changes, where easy accessibility, cost-effectiveness and lack of toxicity may be an advantage in the application of flavonoids with respect to alendronate. Furthermore, this study contributes to a better understanding of the relationship between diet and health and development of the concept of functional foods with the fundamental aim of achieving better health status, prevention and treatment of disease.
Ekstrakcija aktivnih sastojaka iz prirodnog materijala ovisi o različitim čimbenicima. Poznavanje utjecaja različitih parametara važno je za optimiranje procesa, a i za mogućnost predviđanja prinosa ...ekstrakcije. Svrha je rada bila ispitati utjecaj otapala (40–80 %-tna vodena otopina etanola), temperature (40–80 °C) i omjera tekuće-kruto (10-30 mL/g) na prinos ekstrakcije ukupnih fenola i flavonoida te antioksidacijsku aktivnost lista crnog duda (Morus nigra L.). Dobivene eksperimentalne vrijednosti ukupnih fenola, izražene u ekvivalentima klorogene kiseline, bile su u rasponu od 18,6 do 48,7 mg CAE po g suhog materijala, dok su ukupni flavonoidi, izraženi u ekvivalentima rutina, bili od 6,0 do 21,4 mg RE po g suhe tvari. Antioksidacijska aktivnost, izražena kao koncentracija inhibicije 50 % (IC50 vrijednost), bila je u rasponu od 0,019 to 0,078 mg po mL ekstrakta. Metoda odzivnih površina upotrijebljena je za određivanje optimalnih uvjeta ekstrakcije i za utvrđivanje utjecaja različitih procesnih uvjeta na svojstva ekstrakta. Rezultati potvrđuju da je kvadratni polinom pokazao dobra slaganja s eksperimentalnim podacima (R˄2>0.90), što upućuje na činjenicu da je odabrana metoda odzivnih površina uspješno primijenjena za ispitane uvjete ekstrakcije.