Anderson-Fabryjeva bolest (AFB) je X-vezan poremećaj nakupljanja supstrata u lizosomima uzrokovan mutacijama gena za galaktozidazu (GLA). Znatno smanjena ili odsutna aktivnost enzima α-galaktozidaza ...A (α-Gal A) rezultira progresivnim nakupljanjem glikolipida, prije svega globotriaosilceramida (Gb3) u cirkulaciji i brojnim stanicama, tkivima i organima, posljedica je višestruko zatajivanje organskih sustava. Bolesnici s tim genetskim poremećajem imaju veliki rizik od razvoja neuropatije malih vlakana, uglavnom ishemijskog moždanog udara, kronične bolesti bubrega, fibrotske srčane bolesti što rezultira poremećajima srčanog ritma i provođenja, kao i progresivnom hipertrofičnom kardiomiopatijom. Iako je AFB povezan s X-kromosomom, obolijevaju osobe oba spola. Dijagnoza AFB-a zahtijeva odlično poznavanje te bolesti i vrlo osnovanu kliničku sumnju, dobar detaljan fizikalni pregled, laboratorijske i slikovne preglede za pojedine organe, a potvrđuje se nalazom bitno smanjene aktivnosti enzima α-Gal A homozigotnih muškaraca i tipizacijom gena u heterozigotnih žena. Enzimska nadomjesna terapija (ENT), oralna terapija šapronom i ciljano liječenje poremećaja pojedinih organskih sustava može dovesti do bitnog kliničkog poboljšanja. Međutim, u današnjoj medicinskoj literaturi možemo naći podatke o liječenju (ENT-om, šapronom, simptomatska terapija) bolesnika s uznapredovalim AFB-om, što znači da je već došlo do značajnog oštećenja organa. Uspjeh u liječenju bolesnika s AFB-om ovisi o personaliziranom pristupu skrbi za bolesnika (odražava fenotip genetske bolesti), sveobuhvatnoj procjeni oštećenja organa prije početka liječenja s ENT-om ili šapronom, odgovor na terapiju, kao i temeljitu prosudbu možebitnih oštećenja organa asimptomskih bolesnika. Bolesnike treba istovremeno liječiti zbog organ-specifičnih oštećenja (živčani sustav, srce, bubrezi, probava i dr.). Budući da je AFB multisistemska bolest, skrb o pacijentima treba povjeriti iskusnom multidisciplinskom timu. Nakon početne procjene bolesti, učestalost kontrolnih pregleda ovisi o kliničkoj slici i stupnju zahvaćenosti pojedinih organskih sustava. Početnu procjenu bolesti treba obaviti za oba spola. U žena s potvrđenom dijagnozom potrebno je utvrditi stupanj zahvaćenosti pojedinih organa. Kontrolni pregled žena koje nemaju simptome bolesti treba obaviti svake 2 godine (starenjem bolesnica povećava se učestalost kontrola), dok žene s izraženim simptomima treba, kao i muškarce s AFB-om, kontrolirati svakih 6 mjeseci. Unatoč značajnom napretku u liječenju i skrbi za bolesnike s AFB-om potrebno je dodatno pojasniti patofiziologiju bolesti i odrediti idealni trenutak za početak liječenja bolesnika različitih fenotipova. Treba uložiti dodatne napore u razvijanju učinkovitijih specifičnih lijekova.
Anderson-Fabryjeva bolest uzrokovana je nedostatnom aktivnošću enzima α-galaktozidaze A što rezultira nakupljanjem glikosfi ngolipida u lizosomima stanica različitih organskih sustava. Bolest se ...nasljeđuje X-vezano te je zastupljena u oba spola, no u muškaraca, koji su hemizigoti za mutirani gen, simptomi se ispoljavaju ranije uz izraženiji fenotip. Nakupljanje u stanicama bubrega uzrokuje isprva reverzibilne, a potom i ireverzibilne patološke promjene u svim segmentima nefrona što dovodi do proteinurije i bubrežne disfunkcije s postepenom progresijom do terminalnog stadija bubrežnog zatajenja. U ovom radu osvrnuli smo se na trenutne terapijske mogućnosti u obliku intravenske enzimske nadomjesne terapije agalzidazom alfa i agalzidazom beta uz noviju peroralnu metodu liječenja molekularnim šaperonima. Razmotreni su trenutni dosezi istraživanja genske terapije ugradnjom funkcionalnog GLA gena u genom bolesnika, što je budućnost liječenja nasljednih bolesti. Pravovremeno prepoznavanje i liječenje Anderson-Fabryjeve bolesti značajno smanjuju mortalitet i morbiditet pacijenata te povećavaju njihovu kvalitetu života.
Bioničke kiseline su bioaktivni spojevi koji imaju niz zanimljivih svojstava. Najčešće se dobivaju kemijskom ili enzimskom oksidacijom disaharida. U ovom je radu ispitan galaktozil derivat glukonske ...kiseline, dobiven novom metodom sinteze bioničkih kiselina transglikozilacijom pomoću β-galaktozidaze uz laktozu kao supstrat. Proizvodi dobiveni ovom metodom imaju drukčiju strukturu (a time vjerojatno i svojstva) od onih dobivenih tradicionalnom oksidacijom disaharida. Svrha je ovoga rada bila odrediti utjecaj odabranih parametara (koncentracije i omjera supstrata, količine enzima, vremena, pH-vrijednosti i prisutnosti soli) na tijek reakcije katalizirane enzimskim pripravkom Lactozym, što sadržava β galaktozidazu iz kvasca Kluyveromyces lactis. Istraživanje je pokazalo da se s povećanjem udjela suhe tvari u osnovnoj otopini (do 50 % mase po volumenu) i dodatkom soli povećao prinos proizvoda. S druge strane, s povećanjem pH-vrijednosti sa 7,0 na 9,0 i dodatkom magnezijeve i manganove soli smanjio se udjel derivata. Osim toga, s povećanjem doze β-galaktozidaze na više od 35 000 jedinica u 100 g laktoze također se smanjio prinos proizvoda. Najpovoljniji molarni omjer natrijevog glukonata i laktoze bio je 2,225:0,675. Ovisno o uvjetima sinteze, koncentracija proizvoda u reakcijskoj smjesi bila je između 17,3 i 118,3 g/L, što odgovara masenom udjelu suhe tvari od 6,64 do 23,7 %. Rezultati dobiveni u ovom radu mogu poslužiti za dizajn industrijskog procesa.
U radu je ispitana proizvodnja hidrolaza iz žitarica te mogućnost njihove primjene umjesto mikrobnih enzima u proizvodnji hrane. Istražen je utjecaj temperature na predobradu, namakanje te klijanje ...zrna ječma i pšenice radi praćenja aktivnosti β-glukozidaze, β-galaktozidaze i lipaze. Statistički je model pokazao da je aktivnost β-glukozidaze porasla pri niskim temperaturama namakanja i klijanja zrna ječma, te pri niskoj temperaturi namakanja i visokoj klijanja zrna pšenice. Maksimalna je aktivnost β-glukozidaze u ekstraktima pšenice bila (585±151) nkat/g, a u ekstraktima ječma (109±15) nkat/g suhe tvari, dok je najveća aktivnost β-galaktozidaze u ječmu bila (34±12) nkat/g, a u pšenici (63±23) nkat/g. U usporedbi s glikozidazom, maksimalna je aktivnost lipaze bila bitno manja i iznosila je (6,7±0,14) nkat/g suhe tvari ječma, i (4,6±4,4) nkat/g suhe tvari pšenice. Ispitane su i aktivnosti ostalih hidrolaza u ekstraktima, kao što su npr. peptidaza i α-amilaza. Rezultati ovog istraživanja čine osnovu moguće primjene hidrolaza iz žitarica u preradi hrane, što bi moglo privući pažnju kupaca.
U radu je ispitan utjecaj tretiranja mladica tieguanyin oolong čaja ljetne berbe iz kineske pokrajine Anxi egzogenim enzimima, i to lakazom i α-galaktozidazom, na ublažavanje gorkog okusa te ...poboljšanje arome i senzorske kakvoće čaja. Prije početka sušenja, mladice su čaja bile prskane otopinama lakaze i/ili α-galaktozidaze. Rezultati senzorske analize pokazuju da su enzimskom obradom bitno poboljšana organoleptička svojstva čaja. Najbolji su rezultati postignuti tretiranjem mladica otopinom 8,25 U lakaze i 22 U α-galaktozidaze po kilogramu svježih mladica. Pomoću metoda HPLC i GC-MS ispitani su sastojci arome, pri čemu je metodom HPLC utvrđeno da se nakon obrade enzimima udjel katehina smanjio za 11,9 %, a ukupnih polifenola za 13,3 %, te povećao udjel ukupnih topljivih šećera za 19,4 % i vodenog ekstrakta za 6,6 %, u usporedbi s netretiranim uzorkom. Smanjenjem udjela katehina i ukupnih polifenola smanjila se gorčina i trpkost čaja, a povećanjem udjela ukupnih topljivih šećera i vodenog ekstrakta dobiven je čaj blagog i slatkog okusa. Rezultati analize aromatskih spojeva metodom GC-MS pokazuju da se ukupni udjel eteričnih ulja u uzorcima čaja tretiranim s oba enzima bitno povećao, i to aldehida za 23,28 %, alkohola za 37,05 %, estera za 20,10 % i alkena za 38,99 %. Dobiveni podaci upućuju na zaključak da se obradom oolong čaja ljetne berbe egzogenim enzimima može poboljšati okus i aroma čaja.
Rano postavljanje dijagnoze i liječenje bolesnika s Fabryjevom bolesti zahtijeva multidisciplinarni pristup niza stručnjaka. Cilj je ovog dokumenta predstaviti našoj medicinskoj javnosti smjernice za ...dijagnozu i liječenje odraslih bolesnika s Fabryjevom bolesti. Smjernice su sastavili stručnjaci iskusni u radu s bolesnicima koji boluju od rijetkih bolesti metabolizma i plod su iskustva rada s rijetkim bolestima u Zavodu za bolesti metabolizma Klinike za unutarnje bolesti KBC-a Zagreb, Referentnog centra Ministarstva zdravlja i Socijalne skrbi Republike Hrvatske za rijetke i metaboličke bolesti. Ove su smjernice jednoglasno prihvaćene na Godišnjoj skupštini Hrvatskog društva za rijetke bolesti Hrvatskoga liječničkog zbora. Radi se o prvim takvim smjernicama u Republici Hrvatskoj pa se ovom inicijativom Hrvatska priključuje ostalim europskim državama koje su donijele smjernice iz područja rijetkih bolesti metabolizma. Ove smjernice daju sažetak o Fabryjevoj bolesti, o tome kako dijagnosticirati, liječiti i pratiti bolesnike koji boluju od ove rijetke lizosomske bolesti nakupljanja.
Primjenom metodologije odzivnih površina optimirana je proizvodnja α-galaktozidaze s pomoću novog soja aktinomiceta Streptomyces griseoloalbus u pokusima na tresilici. Primjenom Plackett-Burmanova ...statističkog plana ispitan je utjecaj varijabli na proizvodnju α-galaktozidaze. Od jedanaest ispitanih faktora, na proizvodnju enzima bitno su utjecali salinitet, koncentracija magnezijeva sulfata i temperatura. Optimalne vrijednosti tih varijabli i njihovo uzajamno djelovanje na proizvodnju enzima određeno je primjenom Box-Behnken statističkog plana. Međusobnim utjecajem saliniteta i koncentracije magnezijeva sulfata poboljšana je proizvodnja α-galaktozidaze, za razliku od temperature čiji utjecaj nije ovisio o ta dva faktora. Primjenom takva postupka proizvodnja α-galaktozidaze povećana je sa 17 na 50 U/mL.
Provider: - Institution: - Data provided by Europeana Collections- Fabryjeva bolest je X-vezana nasljedna metabolička bolest nakupljanja uzrokovana
smanjenom aktivnošću enzima α-galaktozidaze A. ...Posljednično tome dolazi do nakupljanja
nerazgrađenog supstrata (globotriazilceramida) u endotelnim i glatkim mišićnim stanicama
krvnih žila što dovodi do njihovog oštećenja. Dosadašnji rezultati pokazuju da samo
nakupljeni supstrat nije jedini uzrok kasnijim kliničkim manifestacijama bolesti. Ovo
istraživanje obuhvatilo je određivanje asimetričnog dimetilarginina (ADMA) kao važnog
čimbenika u patologiji promjena endotela krvnih žila u skupini bolesnika s Fabryjevom
bolešću, te koncentracija aminokiselina L-arginina, L-metionina i L-citrulina kao i njihovih
međusobnih omjera s ADMA. Određivanjem koncentracije ADMA u predkliničkoj fazi i za
vrijeme enzimske nadomjesne terapije, željeli smo ispitati da li postoji povezanost genotipa i
fenotipa bolesnika s Fabryjevom bolešću s koncentracijama ADMA u serumu, te procjeniti
moguću klinički primjenu koncentracije ADMA kao novi dijagnostički i prognostički
pokazatelj oštećenja krvnih žila kod bolesnika s Fabryjevom bolesti.
Rezultati pokazuju da ADMA ne može biti pouzdani marker za procjenu stanja bolesnika s
Fabryjevom bolešću. Nadomjestaj L-arginina ili L-citrulina mogao bi biti dodatak ERT kao
prevencija pogoršanja vaskulopatije zbog nedostatka L-arginina i posljedično tome
bioraspoloživosti NO.- Fabry disease is X-linked inherited metabolic storage disease caused by reduced activity of
the enzyme α-galactosidase. Consequently that leads to accumulation of substrate
(globotriaosylceramide) in endothelial and smooth muscle cells of blood vessels and to their
damage. Results so far show that only the accumulated substrate is not the only cause of
subsequent clinical manifestations of disease. This research would include determining
asymmetric dimethylarginine (ADMA) as an important factor in the pathology changes of the
endothelium of blood vessels in the patients group with Fabry disease. By determining the
concentration of ADMA in preclinical phase and during enzyme replacement therapy, we will
examine whether there is an association of genotype and phenotype in patients with Fabry
disease with aDMA concentrations in serum and evaluate the possible clinical application of
the concentration of aDMA as a new diagnostic and prognostic marker of vascular damage in
patients with Fabry disease.
This study provides evidence that ADMA could not be reliable marker of vascular damage in
patients with Fabry disease. Supplementation of L-arginine or L-citrulline could be add on
treatment on ERT as prevention of vascular damage due to reduced biosintheses of L-arginine
and availability of NO.- All metadata published by Europeana are available free of restriction under the Creative Commons CC0 1.0 Universal Public Domain Dedication. However, Europeana requests that you actively acknowledge and give attribution to all metadata sources including Europeana
Ispitana je aktivnost β-galaktozidaze u sedam sojeva vrste Kluyveromyces u sintetskoj podlozi. Za optimiranje podloge odabran je soj Kluyveromyces marxianus CCT 7082 koji je proizveo najviše enzima. ...Pri određivanju najznačajnijih varijabla sastava podloge za proizvodnju enzima primijenjen je reducirani faktorski plan 2^(4-1). Istraženi su sljedeći parametri: koncentracija laktoze, kvaščeva ekstrakta i (NH4)2SO4 te pH-vrijednost, pa je utvrđeno da svi parametri značajno utječu na proizvodnju enzima. Prema rezultatima prvoga faktorskog plana, za izradu 2³ centralno složenog rotacijskog plana odabrani su koncentracija laktoze, kvaščeva ekstrakta i (NH4)2SO4. Daljnjim optimiranjem uvjeta fermentacije postignuta je veća aktivnost enzima, i to čak do 10,6 U/mL.
Tri mikrobne galaktozidaze, Aspergillus oryzae, Escherichia coli i Kluyveromyces marxianus β-galaktozidaza, upotrijebljene su kao katalizatori sinteze alkil-β-galaktozida u monofaznim alkoholnim ...medijima transgalaktozilacijom. Njihova selektivnost prema alkoholnim nukleofilima kvantificirana je određivanjem omjera transgalaktozilacije i hidrolize u smjesama alkohola i vode čiji je udjel vode ispod razine zasićenosti. p-Nitrofenil-β-galaktozid uporabljen je kao glikozilni donor u koncentraciji od 10 mM. Ukupna brzina reakcije (transgalaktozilacija+hidroliza), a i omjer reakcija transgalaktozilacije (alkoholize) i hidrolize, povećavali su se s većom aktivnosti vode. Pritom je Aspergillus oryzae β-galaktozidaza, koja je inače pokazala relativno slabu ukupnu aktivnost (3,13 μmol/(min·mg) protein), imala najveću selektivnost prema nukleofilu heksanola (0.65). Vrijednosti faktora selektivnosti su u svim ispitanim slučajevima bili ispod jedinice, što upućuje na to da prevladava hidroliza, a ne sinteza. Ukupna brzina reakcije transgalaktozilacija+hidroliza) bila je pod jakim utjecajem aktivnosti vode, te je za određenu vrijednost aktivnosti vode rasla prema ovom redoslijedu: n-oktanol, n-heksanol, n-butanol.
PDF
