DNA vakcine predstavljajo obetaven pristop imunoterapije raka, predvsem zaradi njihove enostavnosti, stabilnosti in varnosti. DNA vakcine temeljijo na vnosu plazmidne DNA z zapisom za enega ali več ...tumorskih antigenov, udeleženih v nastanku, napredovanju ali zasevanju rakavih celic. Z vnosom DNA vakcine spodbudimo imunski odziv usmerjen proti tumorskemu antigenu, kar potencialno vodi do uničenja rakavih celic. Kljub številnim prednostim DNA vakcin pred klasičnimi vakcinami njihovo uporabo v humani kliniki omejuje prešibak antigen-specifični imunski odziv. Za izboljšanje imunogenosti DNA vakcin se razvoj osredotoča na optimizacijo sestave plazmidne DNA, raziskovanje novih tumorskih antigenov, razvoj novih dostavnih sistemov in sočasna uporaba adjuvantnih in imunomodulatornih molekul. Tovrstni pristopi so del številnih kliničnih raziskav na področju imunoterapije raka in predstavljajo korak bližje k izboljšanju imunogenosti DNA vakcin, učinkovitejšemu uničenju rakavih celic in lažjemu prenosu DNA vakcinacije v humano klinično prakso.
Poultry infected with Mycoplasma gallisepticum and Mycoplasma synoviae produce antibodies to their cysteine protease CysP Major poultry pathogens, Mycoplasma gallisepticum and Mycoplasma synoviae ...possess cysteine protease CysP, which in vitro cleaves chicken immunoglobulin G (IgG) into Fab (antigen-binding fragment) and Fc (crystallisable region fragment). We used recombinant CysP of M. synoviae (rCysP) in enzyme immunoassays to detect antibodies to CysP in sera, synovial fluids, and in washings of respiratory tract and oviducts of chickens and turkeys experimentally or naturally infected with M. gallisepticum or M. synoviae. In poultry infected with M. synoviae, 70.4 % of samples contained antibodies reacting with rCysP. In birds infected with M. gallisepticum we detected CysP antibodies in 63.1 % of samples. Our data demonstrate that CysP is immunogenic for chickens and turkeys and indicate that M. gallisepticum and M. synoviae infecting chickens and turkeys synthesise CysP in vivo. This is the first study demonstrating that proteases of any Mycoplasma species can induce production of specific antibodies in the natural host.
Perutnina ob okužbi z bakterijo Mycoplasma gallisepticum ali Mycoplasma synoviae proizvede specifična protitelesa proti njuni cisteinski proteazi CysP Mycoplasma gallisepticum in Mycoplasma synoviae sta pomembna patogena mikroorganizma pri perutnini. Sintetizirata cisteinsko proteazo CysP, ki in vitro razgrajuje kokošje imunoglobuline G na Fab in Fc fragment. Za dokazovanje protiteles proti CysP z encimsko imunskimi testi v serumih, sinovialnih tekočinah in v izpirkih dihalnih traktov in jajcevodov ptic naravno ali eksperimentalno okuženih z M. synoviae ali M. gallisepticum, smo uporabili rekombinanten protein CysP (rCysP). Pri perutnini okuženi z M. synoviae je protitelesa proti CysP vsebovalo 70,4 % vzorcev, pri perutnini okuženi z M. gallisepticum pa smo protitelesa proti CysP dokazali pri 63,1 % vzorcih. Pridobljeni podatki potrjujejo, da je CysP za perutnino imunogen protein in nakazujejo, da M. gallisepticum in M. synoviae ob okužbi perutnine sintetizirata CysP in vivo. Z našo študijo prvič dokazujemo, da lahko mikoplazemska proteaza inducira nastanek specifičnih protiteles v naravnem gostitelju.
Dijareja nakon odbića (DNO) prasadi uzrokuje glavninu proizvodnih gubitaka u svinjogojskoj industriji širom svijeta. Ne postoji sigurno i učinkovito cjepivo protiv svinjskih enterotoksigenih sojeva ...bakterije Escherichia coli (ETEC) koji se smatraju etiološkim uzročnicima DNO. Ovo je istraživanje planirano radi vrednovanja: (1) učinkovitosti oralnog bivalentnog F4ac+/F18ac+ ne-ETEC pokusnog živog cjepiva (cjepivo) u stimuliranju sistemske i crijevne stanične imunosti 4 tjedna stare odbijene prasadi, (2) pojave i trajanja zaštitne imunosti odbijene prasadi protiv prirodnog zaražavanja uzročnicima DNO tijekom razdoblja od 6 tjedana nakon odbića i (3) potencijala dodatka hrani zeolita klinoptilolita (KPL), antimikrobnog minerala i/ili imunomodulatora/adjuvansa cjepiva (CJEPIVO + KPL). Prasad imunizirana ili cjepivom ili njegovom kombinacijom s dodatkom hrani KPL-om imala je znakovito povećan prirast tjelesne mase od 7. do 42. dana (P<0,05) pokusa u usporedbi s kontrolnom skupinom prasadi (KONTROLA). Suprotno tome, prasad koja su primila samo dodatak hrani KPL, imala su pretežito znakovito nižu (P<0,05) tjelesnu masu. Prasad koja je primila CJEPIVO + KPL nije imala ni dijareju, niti je bilo uginuća tijekom razdoblja trajanja pokusa. Ukupni broj izdvojenih bakterija iz jejunuma bio je mnogo manji u prasadi iz sve tri pokusne skupine od onoga u kontrolne prasadi (30 x 108 vs. 18 x 107 vs. 14 x 107 vs. 13 x 107 CFU/mL). Specifična imunizacija s CJEPIVOM
ili CJEPIVOM + KPL stimulirala je znakovit porast udjela CD4+ i CD8+ T stanica (P<0,05) od 7. do 42. dana pokusa. Vrlo su slični nalazi dobiveni za CD21+ B stanice, s obzirom da je njihov udjel bio znakovito povišen u prasadi tretirane ili s CJEPIVOM ili s CJEPIVOM + KPL (P<0,05 ili P<0,05). Prasad iz skupine koja je primila CJEPIVO + KPL, imala je značajno viši udjel CD45+ lifoidnih stanica od prasadi iz KONTROLA skupine (P<0,05). Rijetko raspodjeljeni CD45RA+ naivni T limfociti opaženi su u lamini propriji crijevnih resica jejunuma, u Lieberkühnovim kriptama te u submukozi prasadi KONTROLE skupine i skupine hranjene s dodatkom KPL. Tretman CJEPIVOM izazvao je umjerenu proliferaciju CD45RA+ u interfolikularnim (IFP) i folikularnim područjima (FP) Peyerovih ploča (PP) jejunuma u prasadi 6 tjedana nakon cijepljenja. U KONTROLNE prasadi, CD45RC+ memorijske T stanice nisu bile brojne i uglavnom su bile dispergirane u sredini lamine proprije resica, a samo rijetko u blizini bazalne membrane crijevnih enterocita. Te su stanice brojnije u lamini propriji resica u prasadi iz KPL skupine u odnosu na KONTROLNU prasad. No, CD45RC+ memorijske T stanice još su brojnije, što je primijećeno u lamini propriji resica jejunuma prasadi koja je primila CJEPIVO. Te su stanice pretežito nađene u lamini propriji resica i u IFP-u, ali su manje brojne u FP-u jejunalnih Peyerovih ploča u prasadi koja je primila CJEPIVO i KPL. Zbog naravi bolesti, izazovi vezani za razvoj cjepiva protiv DPO će i dalje postojati. Premda je naš istraživački pristup bio samo djelomično uspješan, razvoj sigurnog i imunogeno učinkovitog živog oralnog cjepiva protiv DPO, koje će pružati solidnu zaštitu i održive stanične i humoralne imunosne odgovore, i nadalje je izvanredan izazov.
PDF
