Za izdvajanje bioaktivnih peptida iz kompas meduze (Chrysaora sp.) izoliran je kolagen, te je hidroliziran s pomoću tri proteaze: tripsina, alkalaze i komercijalnog prozivoda Protamex. Izmjeren je i ...uspoređen učinak različito inhibiranih peptida na inhibiciju angiotenzin konvertirajućeg enzima (ACE), te je pomoću metoda FRAP i DPPH ispitana njihova antioksidativna aktivnost. Osim toga, ispitan je utjecaj trajanja hidrolize na bioaktivnost peptida, tj. na inhibiciju ACE i antioksidativnu aktivnost. Najveća je ukupna antioksidacijska aktivnost (FRAP) izmjerena u hidrolizatima dobivenim pomoću komercijalne proteaze Protamex (25-27 mM) nakon 7 sati hidrolize, te nakon 9 sati hidrolize pomoću tripsina (24-26 mM). Nasuprot tome, hidrolizati dobiveni pomoću tripsina imali su najveću sposobnost uklanjanja DPPH radikala (94 % nakon 1 sata i 92 % nakon 3 sata). Hidrolizati dobiveni pomoću tripsina imali su najbolju sposobnost inhibicije ACE (89 % nakon 3 sata). Pomoću dvojne masene spektrometrije određene su sekvencije peptida koje su imale najveću aktivnost, a rezultati pokazuju da su hidrolizati imali veći udjel hidrofobnih aminokiselina i jedinstvenih sekvencija aminokiselina, što vjerojatno pridonosi njihovoj biološkoj aktivnosti.
U radu je opisana sinteza serije 6,7,8,9-tetrahidro-5H-5-(2'-hidroksifenil)-2-(4'-supstituiranih benzilidin)tiazolo(2,3-b)kinazolin-3(2H)-ona (4a-j) i ...6,7,8,9-tetrahidro-5H-5-(2'-hidroksifenil)-2-(4'-supstituiranih benzilidin)-3-(4-nitrofenilamino)tiazolokinazolina (5a-j) prema objavljenoj metodi te ispitano njihovo inhibitorno djelovanje na fosfodiesterazu. Svi testirani spojevi pokazuju dobro djelovanje. Proučavan je i odnos strukture i djelovanja. U obje serije spojeva, elektron-odvlačeći supstituenti doprinose jačem djelovanju. Među ispitivanim spojevima pronađeno je da 6,7,8,9-tetrahidro-5H-5-(2'-hidroksifenil)-2-(4'-fluorobenzilidine)-3-(4-nitrofenilamino)tiazolokinazolin (5e), 6,7,8,9-tetrahidro-5H-5-(2'-hidroksifenil)-2-(4'-nitrobenzilidine)-3-(4-nitrofenilamino)tiazolokinazolin (5j) i 6,7,8,9-tetrahidro-5H-5-(2'-hidroksifenil)-2-(4'-klorobenzilidin)-3-(4-nitrofenilamino)tiazolokinazolin (5f) imaju jače djelovanje od teofilina (IC50 u mmol L–1 1,34 ± 0,09 za 5f, 1,44 ± 0,02 za 5e, 1,52 ± 0,05 za 5j nasuprot 1,72 ± 0,09 za teofilin).
U radu je testiran utjecaj jedanaest vrsta eteričnih ulja (klinčićevac, ružmarin, list cimeta, kadulja, bor, gorka naranča, metvica, anis, kim, lavanda, timijan) na porast micelija dvanaest ...fitopatogenih gljiva (Fusarium graminearum, F. verticillioides, F. subglutinans, F. oxysporum, F. avenaceum, Diaporthe helianthi, Diaporthe phaseolorum var. caulivora, Phomopsis longicolla, P. viticola, Helminthosporium sativum, Colletotrichum coccodes, Thanatephorus cucumeris). Sva eterična ulja koja smo koristili, izuzev ulja bora i gorke naranče, pokazala su određeno inhibitorno djelovanje prema nekim ili svim istraživanim gljivama. Najbolje antifungalno djelovanje imala su ulja timijana, lista cimeta, klinčićevca i anisa. U usporedbi s kontrolom, ulja bora, gorke naranče i kadulje pozitivno su utjecala na porast micelija nekih gljiva.
Antimikrobna otpornost patogenih mikroorganizama predstavlja ozbiljan problem u proizvodnji hrane, a naročito zbog rastućeg broja multirezistentnih sojeva. Sve je veća potreba za novim i efikasnim ...antimikrobnim agensima i modulatorima otpornosti radi prevladavanja ovog problema, pri čemu biljke predstavljaju bogat izvor takvih spojeva. U ovom je radu ispitan antimikrobni učinak fenolnog ekstrakta, eteričnog ulja i destilacijskog ekstrakta sjemenki biljke Alpinia katsumadai, te njihov utjecaj na modulaciju otpornosti sojeva Campylobacter jejuni i Staphylococcus aureus. Ekstrakt sjemenki i postdestilacijski ekstrakt imali su relativno snažan antimikrobni učinak na bakteriju C. jejuni, dok je bakterija S. aureus pokazala veću otpornost. Fenolni ekstrakt, eterično ulje i destilacijski ekstrakt A. katsumadai u kombinaciji sa svim ispitanim antimikrobnim agensima (ciprofloksacin, eritromicin, triklosan, soli žučne kiseline i etidijev bromid) uspješno su modulirali otpornost svih sojeva C. jejuni. Učinak je ekstrakata i eteričnog ulja na bakteriju S. aureus ovisio o bakterijskom soju i primjenjenom antimikrobnom agensu, ali je uspješno smanjena otpornost svih sojeva na soli žučne kiseline. Eterično je ulje sjemenki biljke A. katsumadai potaklo akumulaciju etidijevog bromida unutar bakterijskih stanica, čime je dokazano da se može upotrijebiti kao inhibitor efluksne pumpe bakterija C. jejuni i S. aureus.
Sastojci formulacija mogu djelovati na toksičnost organofosfatnih insekticidnih pripravaka u životinja. Cilj je ovog istraživanja bio ispitati i usporediti akutnu inhibiciju kolinesteraza u pilića ...starih 7 do 14 dana koji su na usta primili organofosfatne insekticide diklorvos i diazinon u odgovarajućim formulacijama za veterinarsku odnosno poljoprivrednu primjenu. Dvadesetčetverosatna akutna letalna doza (LD50) diklorvosa bila je 11,1 mg kg-1 u veterinarskim odnosno 6,51 mg kg-1 u poljoprivrednim formulacijama, a diazinona 6,4 mg kg-1 odnosno 6,7 mg kg-1. Do kolinergičke toksikoze u pilića došlo je jedan sat nakon primjene. Nakon izlaganja organofosfatima in vivo i in vitro izmjerena je aktivnost kolinesteraza u plazmi i mozgu s pomoću elektrometrije. Oralne doze diklorvosa (8 mg kg-1) odnosno diazinona (4 mg kg-1) putem veterinarskih odnosno poljoprivrednih formulacija značajno su smanjile aktivnost kolinesteraza u plazmi i mozgu pilića. In vitro su također oba organofosfata inhibirala aktivnost kolinesteraza, bez obzira na formulaciju. Poljoprivredna formulacija diklorvosa izazvala je najjaču inhibiciju (50 %) u mozgu pilića, dok je poljoprivredna formulacija diazinona najjače inhibirala (52 %) aktivnost u plazmi. Ovo istraživanje pokazuje da različite formulacije organofosfatnih insekticida mogu dovesti do različita otrovanja i različito djelovati na kolinesteraznu aktivnost u mozgu i plazmi.
Zadnjih nekoliko godina poduzimaju se mnoge uspješne mjere zaštite od infekcije bakteriofagom. Tako su npr. konstrukcije tehnoloških hnija u proizvodnji sira poboljšane, mljekarske se kulture ...aseptički razmnožavaju, bolja je selekcija kultura tj. bakterijskih sojeva.
U uvjetima in vitro istražen je inhibitorni učinak pčelinjeg otrova, samog ili združenog s citostatikom bleomicinom, na rast stanica HeLa i V79. Rabljene su sljedeće metode: brojenje stanica, metoda ...klonskog rasta i apoptoza. Poznato je da neki antagonisti kalcija i kalmodulinski inhibitori povisuju unutarstaničnu razinu protutumorskih lijekova inhibirajući njihov prijenos iz stanice. Unutarstanična akumulacija melitina izravno povećava citotoksični učinak protutumorskog lijeka. Obrada stanica HeLa i V79 u eksponencijalnoj fazi rasta bleomicinom uzrokuje oštećenje DNA ovisno o dozi te smanjenje broja živih stanica. Uočeno je da se letalni učinak bleomicina može pojačati dodatkom neletalne doze pčelinjeg otrova. Pčelinji otrov pritom inhibira popravak nastalih oštećenja u stanicama HeLa i V79 te sprječava oporavak stanica tretiranih bleomicinom. Apoptoza, nekroza i liza mogući su mehanizmi kojima pčelinji otrov inhibira rast i stvaranje kolonija stanica V79, dok HeLa-stanice pokazuju pojačanu otpornost na pčelinji otrov. Istraživanje također potvrđuje mogućnost uporabe pčelinjeg otrova u povećanju citotoksičnosti bleomicina.
Cilj: Utvrditi utjecaj inhibitora prisutnih u uzorcima krvi i njenih frakcija te u uzorcima iz respiratornog sustava na rezultate PCR-a za Streptococcus pneumoniae u bolesnika s izvanbolničkom ...pneumonijom.
Ispitanici i metode: U istraživanje je bilo uključeno 80 ispitanika s izvanbolničkom pneumonijom u kojih je, osim konvencionalnih mikrobioloških pretraga, napravljena i lančana reakcija polimeraze (engl. polymerase chain reaction, PCR) za fragment gena pneumolizina na uzorcima seruma (N=77) i bronhoalveolarnih ispiraka (BAL) (N=19). U uzorcima je utvrđivana prisutnost PCR inhibitora, a za njihovo uklanjanje korišteno je razrjeđivanje uzoraka.
Rezultati: Primijenjenim mikrobiološkim metodama S. pneumoniae dokazan je kod ukupno 25 (31,3 %) ispitanika s izvanbolničkom pneumonijom. PCR rezultati u svih 77 uzoraka seruma bili su negativni, a prisutnost PCR inhibitora utvrđena je u jednom uzorku seruma. PCR je u uzorcima BAL-a bio pozitivan kod tri ispitanika, a inhibitori nisu utvrđeni niti u jednom uzorku BAL-a.
Rasprava: Pri planiranju i izvođenju PCR-a na kliničkim uzorcima treba misliti na moguću prisutnost PCR inhibitora koji mogu biti uzrok lažno-negativnih rezultata. Određenim postupcima PCR inhibitori mogu se ukloniti iz kliničkih uzoraka ili se njihovo djelovanje može umanjiti (metoda izolacije DNA, optimizacija uvjeta umnažanja, razrjeđivanje uzoraka). Prisutnost inhibitora u uzorku može se utvrditi dodavanjem interne kontrole u svaki uzorak ili pomoću spikinga.
Zaključak: S obzirom na to da je u ovom istraživanju prisutnost inhibitora utvrđena samo u jednom uzorku seruma, može se zaključiti da PCR inhibitori u uzorcima seruma i BAL-a ne utječu na rezultate PCR-a za S. pneumoniae u bolesnika s izvanbolničkom pneumonijom.
Ljekovite i aromatične biljke s alelopatskim djelovanjem potencijalni su izvor prirodnih herbicida. Pokus je proveden kako bi se utvrdio herbicidni potencijal livadne kadulje (Salvia pratensis L.) na ...klijanje i rast korovnih vrsta Teofrastov mračnjak (Abutilon theophrasti Med.) i poljski kukolj (Agrostemma githago L.). Vodeni ekstrakti od suhe biomase S. pratensis u različitim koncentracijama procijenjeni su u kontroliranim laboratorijskim uvjetima u pokusu u Petrijevim zdjelicama. Herbicidni utjecaj ekstrakata S. pratensis ovisio je o koncentraciji ekstrakta i vrsti korova. Općenito, više koncentracije vodenog ekstrakta pokazale su veći negativan učinak na klijavost i parametre rasta klijanaca korova. Vrsta A. githago pokazala je veću osjetljivost na ekstrakte S. pratensis sa smanjenjem klijavosti i rasta klijanaca do 100 % u tretmanima s koncentracijama ekstrakta od 7,5 % i 10 %. Vodeni ekstrakti nisu imali utjecaja na klijavost A. theophrasti, ali je zabilježeno značajno smanjenje duljine korijena i izdanaka kao i svježe mase klijanaca. S. pratensis pokazala se kao perspektivna biljna vrsta za daljnja istraživanja.
Curcuma amada Roxb. jedinstveni je začin jer morfološki nalikuje đumbiru, a po okusu je sličan mangu. Provedena je sekvencijska ekstrakcija praha dobivenog od rizoma te biljke pomoću heksana, ...kloroforma, etilnog acetata, acetona, metanola i vode. Udjel fenola bio je najveći u ekstraktu dobivenom pomoću metanola, zatim acetona i etilnog acetata, a najmanji u vodenom ekstraktu. Ekstrakt dobiven pomoću kloroforma imao je najveću sposobnost inhibicije peroksidacije lipida i keliranja metala, a onaj dobiven pomoću etilnog acetata najbolje svojstvo uklanjanja DPPH i superoksidnih radikala. Ekstrakti biljke Curcuma amada Roxb. imali su i sposobnost inhibicije agregacije trombocita te citotoksična svojstva.
PDF
