DIKUL - logo
(UL)
  • Osamitev in molekularna identifikacija bifidobakterij iz tankega črevesa podgan, krmljenih s surovim fižolom (Phaseolus vulgaris L.) : doktorska disertacija = Isolation and molecular identification of bifidobacteria from small intestine of rats fed with raw kidney bean (Phaseolus vulgaris L.) : doctoral dissertation
    Fanedl, Lijana
    S tehniko naključnega pomnoževanja polimorfne DNA smo preučevali genetsko raznovrstnost 15-ih izolatov bifidobakterij in jih primerjali z 20-timi sevi iz rodu Bifidobacterium. Preučevani sevi so bili ... izolirani iz laboratorijskih podgan, ki smo jih v prehranskem poskusu krmili s surovim fižolom in tako preučevali učinke fitohemoglutinina na sestavo mikrobne združbe. S sedmimi (odpreizkušenih 80) različnimi dekamrnimi začetnimi oligonukleoidi smo z reakcijami RAPD testirali preučevane seve in ugotovili, da izolati kažejo nizko stopnjo podobnosti s preiskovanimi izolati in tipskimi sevi. 13 izolatovse je uvrstilo v dve koherentni skupini, medtem ko se dva izolata bifidobakterij (64, 100) nista uvrstila v omenjeni skupini. Pri osmih izbranihizolatih smo sekvencirali prvi del gena za manjšo ribosomsko podenoto (16S rRNA) in sekvenco primerjali z že znanimi sekvencami drigih bifidobakterij in bakterij sorodnih sevov. S filogenetsko analizo smo ugotovili, da vsi izolati tvorijo svojo skupino z dvema podskupinama in da so najbolj sorodni vrsti B. pseudolongum. Skupaj z njo in še nekaterimi drugimi bifidobakterijami se uvrščajo v širšo skupino B. lactis. Stopnja podobnosti med sekvencami 16S rRNA izolatov se giblje med 91,4-95,8 odstotki. Na osnovi sekvenc osmih izolatov iz tankega črevesa podgan smo oblikovali za preiskovaneizolate, ter vrsto B. pseudolongum specifično oligonukleotidno sondo BifRO1. Specifičnost sonde smo preverili s specifično reakcijo PCR in hibridizacijo točkovnega odtisa. V vzorcih sprednjega in končnega dela tankegačrevesa podgan v poskusu smo s specifičnimi reakcijami PCR semikvantitativno odkrivali različne bakterijske populacije. Ugotovili smo, dase v tankem črevesu podgan v poskusu s surovim fižolom ne poveča samo število E. coli, temveč v manjšem obsegu tudi število bifidobakterij in bakterij iz rodov Bacteriodes in Provotella. Uporabnost sond BifRO1 in Bif164,označenih s TRITC, smo preizkusili še z in situ hibridizacijo na modelutankega črevesa podgan, ki so bile v poskusu krmljene s surovim fižolom.Po hibridizaciji smo opazili, da sta sondi v vzorcih tankega črevesa poskusnih podgan prepoznali več bifidobakterij kot v vzorcih kontrolnih podgan.
    Vrsta gradiva - disertacija ; neleposlovje za odrasle
    Založništvo in izdelava - Ljubljana : [L. Fanedl], 2002
    Jezik - slovenski
    COBISS.SI-ID - 1305736

Knjižnica Signatura – lokacija, inventarna št. ... Status izvoda
Narodna in univerzitetna knjižnica, Ljubljana GS II 545256 glavno skladišče prosto - za čitalnico
BF, Centralna biotehniška knjižnica, Ljubljana Skladišče
DR II 9216
IN: 02002056520
prosto - na dom, čas izposoje: 30 dni
BF, Oddelek za zootehniko, Ljubljana Naloge
Dd FANEDL Osamitev
IN: 120020272
prosto - za čitalnico
loading ...
loading ...
loading ...