Priprava celičnih linij HeLa z izbitima genoma APOBEC3A in APOBEC3B = Generating APOBEC3A and APOBEC3B knock-out HeLa cells : enoviti magistrski študij farmacija
Blanc, Maja
Družina proteinov AID/APOBEC (aktivacijsko inducirana deaminaza/ katalitičnemu polipeptidu podoben encim, ki preureja mRNA apolipoproteina B) je skupina evolucijsko ohranjenih citidniskih deaminaz, ...encimov, ki katalizirajo deaminacijo citidina v uridin na enoverižnih polinukleotidih in vplivajo na različne fiziološke funkcije. Gena APOBEC3A in APOBEC3B sta del te družine in se v človeškem genomu nahajata na koromosomu 22, kjer sta v tandemu zložena z ostalimi APOBEC3 geni. Proteini družine APOBEC3 so del prve obrambne linije proti mnogim eksogenim in endogenim retrovirusom, retroelementom in DNA virusom. Prav tako pa igrajo vlogo pri rakavih obolenijih, kjer aberacijski DNA mehanizmi lahko privedejo do tumorskih mutacij. Protein A3A močno inhibira retrotranspozone in viruse. Protivirusno delovanje izraža proti AAV, HSV-1, HPV, HBV, HCMV, HIV-1 in HTLV-1. Delovanje A3A se pojavi tudi pri rakavih obolenjih, kjer preko somatske mutacije na prehodno izpostavljenih ssDNA povzroča mutagene spremembe. Protein A3B inhibira retroelemente in izraža protivirusno delovanje proti HBV, HIV, HTLV-1, EBV, KSHV in HSV-1. Vpleten je tudi v proces mutageneze celičnega genoma. Ekspresija A3B korelira s celičnim cikom in DNA popravnimi geni. V sklopu magistrske naloge smo pripravili celicno linijo z izbitim genom A3A oz. A3B. V ta namen smo uporabili sistem CRISPR/Cas9, ki služi za tarčno preurejanje genomov. Plazmidna konstrukta, ki kodirata zaporedja RNA vodnice in protein Cas9 (pX458-A3Ag1, A3Ag2, A3Bg2) smo trasficirali v človeške HeLa celice. Z ustrezno redčitvijo celic smo pričeli enocelične linije in jih vzdrževali, tako da so nastale nove linije iz ene celice. Uspešnost eksperimenta smo potrdili s pomočjo Sangerjevega sekvenciranja genomskega lokusa z izbitim genom. Priprava enocelične linije HeLa celic z izbitim A3B genom ni bila uspešna. Uspešno smo pridobili enocelično linijo HeLa celic z izbitim A3A genom. Pripravljena celična linija bo služila kot osnova za raziskovanje virusov in njihovo obnašanje znotraj človeških celic.
Vrsta gradiva - magistrsko delo
; neleposlovje za odrasle
Založništvo in izdelava - Ljubljana : [M. Blanc], 2023
Knjižnica emšf 547 BLANC MAJA Priprava 1281 IN: 0017768
prosto - za čitalnico
Vnos na polico
Dodajanje gradiva na polico je uspelo.
Dodajanje gradiva na polico je spodletelo.
Dodajanje gradiva na polico ni bilo potrebno.
Bibliografsko gradivo je bilo uspešno dodano na polico.
Dodajanje bibliografskega gradiva na polico ni uspelo.
Gradivo je že na polici.
Trajna povezava
URL:
Faktor vpliva
Dostop do baze podatkov JCR je dovoljen samo uporabnikom iz Slovenije. Vaš trenutni IP-naslov ni na seznamu dovoljenih za dostop, zato je potrebna avtentikacija z ustreznim računom AAI.
Leto
Faktor vpliva
Izdaja
Kategorija
Razvrstitev
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
Izberite knjižnično izkaznico:
Baze podatkov,
v katerih je revija indeksirana
Ime baze podatkov
Področje
Leto
Povezave do osebnih bibliografij avtorjev
Povezave do podatkov o raziskovalcih v sistemu SICRIS
Storitev za pridobivanje naslova trenutno ni dostopna, prosimo, poskusite še enkrat.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in naslov za dostavo ter dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrani naslov za dostavo in dokončali postopek rezervacije.
Obvestilo
Trenutno je storitev za avtomatsko prijavo in rezervacijo nedostopna. Gradivo lahko rezervirate sami na portalu Biblos ali ponovno poskusite tukaj kasneje.
Citiranje
Funkcionalnost trenutno ni na voljo. Prosimo, poskusite kasneje.
