DIKUL - logo
(UL)
  • Razvoj molekularnih orodij in metod za genetsko manipulacijo vampnih bakterij iz rodu Prevotella : doktorska disertacija = Development of molecular tools and methods for genetic manipulation of the rumen bacteria of the genus Prevotella : doctoral dissertation
    Accetto, Tomaž
    Razvili smo hitro metodo za vnos genov v sev TC1-1 vampne bakterijske vrste Prevotella bryantii z elektrotransformacijo plazmidne DNA. Metoda se je izkazala za ponovljivo in učinkovito, saj smo lahko ... vnesli tudi produkte ligacijskih reakcij. Da bi z elektrotransformacijo lahko vnesli gene tudi v druge seve te vrste, ki imajo vsi močno izraženo izvencitoplasemsko nespecifično nukleazno aktivnost, bi morali inaktivirati gene, ki kodirajo te nukleaze. Zato smo morali najprej klonirati njihove gene in ugotoviti, kateri kodira prevladujočo nukleazo. Uspeli smo klonirati dva gena, ki kodirata nespecifični nukleazi, nucA in nucB, v sevih P. bryantii TC1-1 in B spodaj 1 4ter ju tudi izraziti. Gen nucA smo izrazili v in vitro sistemu osnovanem na E.coli, gen nucB pa v P. bryantii TC1-1. Po vsej verjetnosti pa gena, ki kodira prevladujočo 45 kDa veliko nespecifično nukleazo v P. bryantii, še nismo uspeli klonirati, saj oba klonirana gena kodirata proteine s premajhno molsko maso. Sev sorodne vrste Prevotella intermedia 17, za katerega smo ugotovili, da ima na odsekih DNA, ki smo jih klonirali, podoben oz. enak vrstni red genov, vsebuje poleg genov nukleaz, ki smo jih klonirali v pričujočem delu, še dodaten gen katarega produkt ima napovedano molsko maso 42kDa in je naša naslednja tarča. Ker za v vampu prevladujočo vrsto prevotel, to je P. ruminicola, ni orodij za vnos genov smo na osnovi na novo opisane in sekvencirane plazmidne DNA iz P. ruminicola TC18 skonstruirali več različic prenosljivega vektorja. Le-tega zaenkrat kljub več poskusom iz doslej neznanih razlogov nismo uspeli vnesti v tipski sev P. ruminicola 23.
    Vrsta gradiva - disertacija ; neleposlovje za odrasle
    Založništvo in izdelava - Ljubljana : [T. Accetto], 2004
    Jezik - slovenski
    COBISS.SI-ID - 1638792

Knjižnica Signatura – lokacija, inventarna št. ... Status izvoda
Narodna in univerzitetna knjižnica, Ljubljana GS II 606346 glavno skladišče prosto - za čitalnico
BF, Centralna biotehniška knjižnica, Ljubljana Skladišče
DR II 9302
IN: 02004056700 		prosto - na dom, čas izposoje: 30 dni
BF, Oddelek za zootehniko, Ljubljana Naloge
Dd ACCETTO Razvoj
IN: 120040293 		prosto - za čitalnico
BF, Oddelek za živilstvo, Ljubljana Knjižnica
DD 315
IN: 0024658 		prosto - na dom, čas izposoje: 1 mes.
loading ...
loading ...
loading ...

Vnos na polico