Določanje aktivnosti in proteinskih nivojev katalitičnih podenot proteasomov v trombocitih zdravih darovalcev = Determining the activity and protein levels of catalyticaly active proteasome subunits in platelets of healthy donors : magistrski študijski program Laboratorijska biomedicina
Grosek, Vanja
Proteasom je večkatalitični proteazni kompleks, ki omogoča razgradnjo proteinov. Obstaja v več strukturnih oblikah in tkivno specifičnih različicah. Najbolj pogosta oblika je konstitutivni proteasom ...ter imunoproteasom. Nedavne raziskave so pokazale, da se proteasomi nahajajo tudi v trombocitih, pri čemer je njihova vloga precej neznana. Trombociti se lahko glede na posamezne lastnosti med posamezniki močno razlikujejo. Na podlagi tega smo sklepali, da obstajajo razlike med posamezniki tudi v izražanju in aktivnosti posameznih katalitičnih podenot proteasoma. Našo domnevo smo preverjali na vzorcih naključnih darovalcev, katerim smo določili proteinske nivoje standardnih in imunoproteasomskih katalitičnih podenot v trombocitih s prenosom western. Rezultati so pokazali razlike med posamezniki, pri tem pa smo opazili, da so razlike večje med izražanjem imunoproteasomskih kot konstitutivnih podenot. Istim vzorcem darovalcev smo nato s sondami za aktivnost določili še katalitično aktivnost posamezne podenote, kjer smo prav tako opazili razlike in višjo aktivnost imunoproteasomskih podenot β1i in β5i kot konstitutivnih podenot β1c in β5c, kar potrjujejo tudi podatki iz literature. V nadaljevanju smo preučevali vpliv selektivnih zaviralcev katalitičnih podenot imunoproteasoma, kjer smo za zaviranje ß1i podenote uporabili KZR-504, za zaviranje ß5i podenote pa LMP7-IN-1. Pri tem se je izkazalo, da 50 nM koncentracija obeh selektivnih zaviralcev po 3-urni izpostavitvi povzroči skoraj popolno zaviranje β1i oziroma β5i podenote. To koncentracijo zaviralcev smo nato uporabili pri naslednjem poskusu, kjer nas je zanimalo, ali aktivacija trombocitov z adenozin difosfatom (ADP) kakorkoli vpliva na aktivnost podenot imunoproteasoma. Ugotovili smo, da ADP pod danimi pogoji ne vpliva na katalitično aktivnost β1i ali β5i podenote proteasoma. Nadalje smo preverili, ali zaviranje imunoproteasoma vpliva na aktivacijo trombocitov. S tem namenom smo s pretočno citometrijo določili sproščanje izbranih kemokinov iz trombocitnih granul. Pri tem smo ugotovili, da vodi aktivacija trombocitov z ADP v povečano sproščanje kemokina RANTES, vendar prisotnost zaviralcev KZR-504 in LMP7-IN-1 ne vpliva statistično značilno na njegov nivo. Rezultati kažejo na razlike v proteinskem nivoju in aktivnosti katalitičnih podenot proteasoma v trombocitih posameznikov. Katalitične podenote lahko uspešno zaviramo že po nekajurni izpostavitvi selektivnim zaviralcem. Potrebne so nadaljnje študije za osvetlitev vloge proteasomov v procesu aktivacije trombocitov.
Vrsta gradiva - magistrsko delo
; neleposlovje za odrasle
Založništvo in izdelava - Ljubljana : [V. Grosek], 2024
Bibliografsko gradivo je bilo uspešno dodano na polico.
Dodajanje bibliografskega gradiva na polico ni uspelo.
Gradivo je že na polici.
Trajna povezava
URL:
Faktor vpliva
Dostop do baze podatkov JCR je dovoljen samo uporabnikom iz Slovenije. Vaš trenutni IP-naslov ni na seznamu dovoljenih za dostop, zato je potrebna avtentikacija z ustreznim računom AAI.
Leto
Faktor vpliva
Izdaja
Kategorija
Razvrstitev
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
Izberite knjižnično izkaznico:
Baze podatkov,
v katerih je revija indeksirana
Ime baze podatkov
Področje
Leto
Povezave do osebnih bibliografij avtorjev
Povezave do podatkov o raziskovalcih v sistemu SICRIS
Storitev za pridobivanje naslova trenutno ni dostopna, prosimo, poskusite še enkrat.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in naslov za dostavo ter dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrani naslov za dostavo in dokončali postopek rezervacije.
Obvestilo
Trenutno je storitev za avtomatsko prijavo in rezervacijo nedostopna. Gradivo lahko rezervirate sami na portalu Biblos ali ponovno poskusite tukaj kasneje.
Citiranje
Funkcionalnost trenutno ni na voljo. Prosimo, poskusite kasneje.
