To analyze the association between sitting time and biomarkers of insulin resistance and inflammation in a sample of healthy male workers. Cross-sectional study carried out in a sample of 929 volunteers belonging to the Aragon Workers’ Health Study cohort. Sociodemographic, anthropometric, pharmacological and laboratory data were collected: lipids—total cholesterol, high-density lipoprotein cholesterol, low-density lipoprotein cholesterol, triglycerides, apolipoproteins A-1 and B-100, lipoprotein (a)—, insulin resistance—glucose, glycated hemoglobin, homeostasis model assessment of insulin resistance, insulin, and triglyceride/high-density lipoprotein cholesterol ratio—, and inflammatory profile—C-reactive protein and leukocytes. Information on sitting time and physical activity was assessed using a questionnaire. Sedentary behavior was analyzed in terms of prevalences and medians, according to tertiles, using a multivariate model (crude and adjusted linear regression) with biomarkers of inflammation and insulin resistance. The most sedentary individuals had higher body mass index, greater waist circumference, and higher systolic blood pressure, with a significant upward trend in each tertile. Likewise, they had a worse lipid profile with a higher C-reactive protein level, homeostasis model assessment of insulin resistance index, triglyceride/high-density lipoprotein cholesterol ratio, and insulin concentration. In the multivariate analysis, we observed a significant association between the latter parameters and sitting time in hours (log C-reactive protein β = 0.07, log homeostasis model assessment of insulin resistance index β = 0.05, triglyceride/high-density lipoprotein cholesterol ratio β = 0.23, and insulin β = 0.44), which remained after adjustment for metabolic equivalents-h/week. Workers who spend more time sitting show a worse inflammatory and insulin resistance profile independently of the physical activity performed. Analizar la asociación entre tiempo sentado y biomarcadores de resistencia a la insulina e inflamación en una población de trabajadores varones. Estudio transversal realizado sobre 929 voluntarios, pertenecientes a la cohorte del Aragon Workers’ Health Study. Se obtuvieron datos sociodemográficos, antropométricos, farmacológicos y bioquímicos: lipídicos —colesterol total, colesterol unido a lipoproteínas de alta y baja densidad, triglicéridos, apolipoproteínas A1 y B100 y lipoproteína (a)—, glucídicos —glucosa, glucohemoglobina, homeostasis model assessment of insulin resistance, insulina y cociente triglicéridos/colesterol unido a lipoproteínas de alta densidad— e inflamatorios —proteína C reactiva y leucocitos—. El tiempo sentado y la actividad física realizada se obtuvieron mediante cuestionarios. Se realizó un análisis de prevalencias y medianas según terciles de sedentarismo y multivariable (regresión lineal bruta y ajustada) con los biomarcadores de inflamación y de resistencia a la insulina. Los trabajadores más sedentarios presentan unas medianas de índice de masa corporal, perímetro de cintura y presión arterial sistólica mayores, con una tendencia significativa de aumento en cada tercil, peor perfil lipídico, valores más elevados de proteína C reactiva, homeostasis model assessment of insulin resistance, cociente triglicéridos/colesterol unido a lipoproteínas de alta densidad e insulina. En el modelo de regresión lineal bruta y ajustada, encontramos una asociación significativa de estas últimas variables con el tiempo de sedestación medido en horas (β = 0,07 log proteína C reactiva; β = 0,05 log homeostasis model assessment of insulin resistance; β = 0,23 triglicéridos/colesterol unido a lipoproteínas de alta densidad, y β = 0,44 insulina) que no se modifican tras ajustar por los equivalentes metabólicos-h/semana. Los trabajadores más sedentarios presentan parámetros inflamatorios y de resistencia a la insulina más altos de manera independiente de la actividad física realizada.