DIKUL - logo
E-viri
  • Inhibicija lipaze pomoću pr...
    Mhatre, Sveeta V.; Bhagit, Amita A.; Yadav, Raman P.

    Food Technology and Biotechnology, 03/2019, Letnik: 57, Številka: 1
    Web Resource

    U radu je ispitana inhibicija lipaze (enzima kojega luči gušterača) pomoću proteina izoliranog iz sjemenki azijske trešnje (Litchi chinensis). Protein je izoliran taloženjem pomoću amonijevog sulfata i dijalizom. Inhibicija lipaze u prisutnosti proteina ispitana je na sintetičkom (pnitrofenil palmitat) i prirodnom (maslinovo ulje) supstratu. Protein je pri koncentraciji od 100 ug/mL inhibirao 68,2 % lipaze na sintetičkom i 60,0 % na prirodnom supstratu. Svojstva inhibitora ispitana su tripsinizacijom. Protein je bio osjetljiv na dodatak 0.05 % tripsina, pri čemu je izgubio 61,9 % aktivnosti. Njegova IGO vrijednost na sintetičkom supstratu bila je 73,1 gg/mL. Također je bio osjetljiv na promjenu pH-vrijednosti, te je najveću aktivnost imao pri pH=8,0, a najmanju pri pH=3,0. Osim toga, protein je ispitan pomoću poliakrilamidne gel elektroforeze u nereducirajućim uvjetima uporabom 10 %-tne otopine natrijevog dodecil sulfata. Nakon obrade bojilom Coomassie brilliant blue zamijećena je prisutnost samo jedne proteinske vrpce od (61±2) kDa. Izolirani je protein naposljetku kristaliziran šaržnom kristalizacijom radi ispitivanja njegove homogenosti. Kristali su bili dobro formirani, s jasno definiranim rubovima. Protein je pokazao dobru aktivnost inhibicije lipaze.