Relata-se o primeiro caso de isolamento de Paracoccidioides brasiliensis (P. brasiliensis) em sangue de paciente HIV positivo, 28 anos, sexo masculino, natural de Nova Londrina que, ao exame físico e ultrassonográfico, apresentava esplenomegalia febril a esclarecer. Para estabelecer o diagnóstico etiológico, hemoculturas em triplicata foram realizadas para pesquisa de bactérias aeróbias, micobactérias e fungos. As hemoculturas para bactérias aeróbias e micobactérias foram negativas e P. brasiliensis foi isolado de duas hemoculturas, na fase leveduriforme em ágar BHI, 20 dias após a semeadura, a partir do meio de Negroni. O paciente classificado, segundo o "Centers for Disease Control (CDC)", no grupo IV devido a uma pneumocistose pulmonar, interrompeu o tratamento por problemas particulares na segunda dose de anfotericina B, sendo tratado alternativamente com 800 mg/dia de cetoconazol. O óbito ocorreu um ano após o isolamento do P.brasiliensis em hemocultura.A case of an AIDS-patient with positive blood culture for Paracoccidioides brasiliensis is reported. The patient was a 29 years old male born in Nova Londrina (Paraná State, Brazil) who presented splenomegaly and fever of unknown origin. Three blood cultures were performed, each one of them for aerobic bacteria, mycobacteria and fungi. Cultures for aerobic bacteria and mycobacteria were negative. However, the yeast phase P. brasiliensis was isolated from two cultures in BHI agar, 20 days after inoculation in Negroni medium. The patient was classified in group V according to the Centers for Disease Control (CDC) criteria for AIDS, due to a Pneumocystis carinii pneumonia. Treatment was discontinued due to an individual decision of the patient on the second dose of amphotericin B. This antibiotic was replaced by ketoconazole in the daily dose of 800 mg. The patient died one year after the isolation of P. brasiliensis on blood culture.