-
Izdelava strategije izolacije in renaturacije podaljšane oblike rekombinantnega humanega limfotoksina alfa (LT-▫$\alfa$▫)Repnik, Katja ...Izdelali smo strategijo za izolacijo podaljšane oblike rekombinantnega humanega limfotoksina alfa (LT-f ). S pomočjo tehnologije rekombinantne DNA je bil predhodno pripravljen rekombinantni sev ... bakterije E. coli, ki izraža humani limfotoksin alfa s histidinskim podaljškom na N-terminalnem koncu molekule. Večina rekombinantnega proteina se je izločala v obliki inkluzijskih teles, zato smo le-ta raztopili v visoki koncentraciji denaturanta, in sicer v 8 M urei in 6 M gvanidinijevem hidrokloridu (Gdn-HCl).Pri tem smo protein popolnoma denaturirali. Kot glavno kromatografsko stopnjo za izolacijo proteina smo uporabili kovinsko kelatno afinitetno kromatografijo (IMAC), z Ni-NTA nosilcem, ki je specifičen za vezavo proteinov s številnimi zaporednimi histidinskimi ostanki. Protein se je v denaturirani obliki vezal na nosilec. Elucijo smo izvedli s pufrom, kateremu smo dodali EDTA. Renaturacijo denaturiranega proteina smo izvedli z zamenjavo pufra, redčenjem v renaturacijskem pufru in renaturacijo na koloni. Najboljše rezultate smo dosegli z redčenjem v pufru, ki je vseboval 2 M ureo in 1 M nemicelarni sulfobetain NDSB 201. Uspešnost renaturacije smo kontrolirali z merjenjem biološke aktivnosti.Source: Slovenski kemijski dnevi 2006, Maribor, 21. in 22. september 2006 [Elektronski vir] (6 str.)Type of material - conference contributionPublish date - 2006Language - slovenianCOBISS.SI-ID - 10755094
Author
Repnik, Katja |
Potočnik, Uroš, 1969- |
Milunović, Tatjana |
Kunstelj, Menči |
Gaberc-Porekar, Vladka
Topics
limfotoksin alfa |
dejavnik tumorske nekroze |
citokini |
IMAC |
rekombinantni proteini |
izolacije proteinov |
inkluzijska telesa |
E.coli |
renaturacija |
lymphotoxin alpha |
tumor necrosis factor |
cytokines |
recombinant proteins |
isolation of proteins |
inclusion bodies |
E.coli |
renaturation
Shelf entry
Permalink
- URL:
Impact factor
Access to the JCR database is permitted only to users from Slovenia. Your current IP address is not on the list of IP addresses with access permission, and authentication with the relevant AAI accout is required.
Year | Impact factor | Edition | Category | Classification | ||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP |
Select the library membership card:
DRS, in which the journal is indexed
Database name | Field | Year |
---|
Links to authors' personal bibliographies | Links to information on researchers in the SICRIS system |
---|---|
Repnik, Katja | 28417 |
Potočnik, Uroš, 1969- | 16340 |
Milunović, Tatjana | 23123 |
Kunstelj, Menči | 30674 |
Gaberc-Porekar, Vladka | 06108 |
Select pickup location:
Material pickup by post
Notification
Subject headings in COBISS General List of Subject Headings
Select pickup location
Pickup location | Material status | Reservation |
---|
Please wait a moment.