Summary
Desulfovibrio are sulfate‐reducing anaerobic gram‐negative rods that have been proposed as potential periodontopathogens. We investigated the capacity of Desulfovibrio to invade epithelial ...cells and induce cytokine secretion from these cells. Desulfovibrio strains were co‐cultured with KB cells and counts of intracellular bacteria evaluated up to 3 days after infection. Desulfovibrio desulfuricans and Desulfovibrio fairfieldensis were able to survive within epithelial cells. Intracytoplasmic location of both bacterial species was confirmed by confocal laser scanning microscopy and transmission electron microscopy. Invasion was sensitive to nocodazole, an inhibitor of microtubule polymerization, but not to cytochalasin D, a microfilament inhibitor, suggesting that microtubule rearrangements were involved in the internalization of Desulfovibrio strains by KB cells. Infection by Desulfovibrio resulted in increased production of IL‐6 and IL‐8 by KB cells. The ability of D. desulfuricans and D. fairfieldensis to survive within oral epithelial cells and to modulate the epithelial immune response may contribute to the initiation and progression of periodontal diseases.
Background, aims: The composition of gingival crevicular fluid (GCF) is likely to reflect inflammatory modifications that take place in the gingiva during periodontal diseases.
Method: In this study, ...GCF was collected at 3 different sites from 23 periodontal patients. The sites were assessed to be healthy, presenting gingivitis or periodontitis. 10 healthy individuals without any form of periodontal disease formed the control group and were sampled at one site each. The cell content of GCF was collected using Durapore Millipore strips, and 2 types of cells were studied: epithelial cells (EC) and polymorphonuclear neutrophils (PMN). The expression of CD9 and HLA‐DR within or on the surface of these cells was studied in immunofluorescence on cytospin smears.
Results: Both CD9 and HLA‐DR expression on EC differed significantly from control subjects, and the latter decreased according to the severity of the pathology. None of the PMN found in controls expressed CD9 or HLA‐DR. However, in periodontal patients, the expression of HLA‐DR within PMNs was detectable and increased according to the severity of lesions. CD9 expression on PMNs also increased with inflammation.
Conclusion: This study shows that clinically healthy sites of periodontal patients already present signs of immunological activation characterised by a down modulation of HLA‐DR expression on EC and an upregulation of these 2 molecules in PMN.
Zusammenfassung
Die Zusammensetzung der gingivalen creviculären Flüssigkeit (GCF) reflektiert wahrscheinlich entzündliche Modifikationen, die während parodontaler Erkrankungen in der Gingiva stattfinden. In dieser Studie wurde GCF von 3 unterschiedlichen Flächen bei 23 parodontalen Patienten gesammelt. Die Flächen waren gesund, hatten eine Gingivitis oder eine Parodontitis. 10 gesunde Personen ohne jegliche Art von parodontaler Erkrankung bildeten die Kontrollgruppe, und eine Fläche von ihnen wurde für die GCF Sammlung genutzt. Der zelluläre Inhalt von GCF wurde unter Nutzung von Durapore Millipore Streifen gesammelt. 2 Typen von Zellen wurden untersucht: Epitheliale Zellen (EC) und polymorphkernige Neutrophile (PMN). Die Produktion von CD9 und HLA‐DR innerhalb oder an der Oberfläche dieser Zellen wurde mit Immunfluoreszenz und Cytospin Abstrichen untersucht. Sowohl die CD9 als auch die HLA‐DR Produktion von EC unterschied sich signifkant von den Kontrollpersonen, und die letztere verringerte sich in Beziehung zur Schwere der Pathologie. Keine der PMN Bei den Kontrollen produzierte CD9 oder HLA‐DR. Bei den parodontalen Patienten jedoch war die Produktion von HLA‐DR innerhalb der PMN’s sichtbar und verstärkte sich in Beziehung zur Schwere der Läsion. Die CD9 Produktion von PMN’s vergrößerte sich auch mit der Entzündung. Diese Studie zeigt, daß klinisch gesunde Flächen von parodontalen Patienten schon Zeichen einer immunologischen Aktivität präsentieren, was durch eine verringerte Produktion von HLA‐DR bei EC und eine verstärkte Regulation von diesen 2 Molekülen in PMN charakterisiert war.
Résumé
La composition du fluide gingival (GCF) reflète vraissemblablement les modifications inflammatoires qui ont lieu dans la gencive au cours des maladies parodontales. Dans cette étude, le GCF a été prélevé sur 3 sites différents chez 23 patients atteints de parodontite. Les sites étaient considérés comme sains, présentant une gingivite ou présentant une parodontite. 10 individus sains sans aucune forme de maladie parodontale formaient le groupe contrôle et le prélèvement était réalisé sur un site chacun. Le contenu cellulaire du GCF était prélevéà l’aide de bandelettes Durapore Millipore, et 2 types de cellules furent étudiées: les cellules épithéliales (EC) et les polymorphonucléaires neutrophiles (PMN). L’expression de CD9 et HLA‐DR à l’intérieur ou à la surface de ces cellules a étéétudiée par immunofluorescence sur étalement par cytocentrifugation. Par rapport aux sujets contrôles, il y avait une différence significative de l’expression, à la fois de CD9 et de HLA‐DR, sur les EC, et cette dernière diminuait en fonction de la gravité de la pathologie. Aucun des PMNs trouvés chez les contrôles n’exprimait CD9 ou HLA‐DR. Cependant, chez les patients atteints de parodontite, l’expression de HLA‐DR était détectable au sein des PMNs et augmentait en fonction de la sévèrité des lésions. L’expression du CD9 sur les pMNs augmentait également avec l’inflammation. Cette étude montre que les sites cliniquement sains de patients atteints de parodontite présentent déjà des signes d’activation immunologique caractérisés par une sous modulation de l’expression de HLA‐DR sur les EC et d’une surrégulation des 2 molécules dans les PMNs.
Objectives: Non‐carious cervical lesions (NCCL), also termed abfractions, have long been thought to be produced by excessive brushing. Nearly 20 years ago an occlusal etiology was proffered (Lee & ...Eagle 1984). Controversy still exists concerning these two concepts. The present work was carried out to verify the occurrence of signs of excessive brushing or occlusal disturbances associated with abfractions.
Material and methods: All first consultants were screened for the presence of abfractions during one trimester. NCCL were found in 61 patients who consequently received a thorough examination searching for clinical evidence of excessive brushing or occlusal disturbances. The presence of plaque, calculus, periodontitis, or mobility was also noted. Simple frequency and percentage were used to describe the occurrence of different clinical signs in association with the presence of abfractions.
Results: Abfractions often exist in mouths presenting plaque (40.1%), calculus (41.7%), or periodontitis (20.4%). Ulceration of the gingiva is a rare finding (1.6%). However, subgingival apical limits were frequent (32.5%). NCCL coexist almost systematically with occlusal wear facets (94.5%). Lack of canine disclusion (77.2%) was also closely associated with the presence of abfractions. Conversely, mobility was seldom found (1.9%).
Conclusions: Clinical signs of excessive brushing were lacking, whereas signs of occlusal disturbance were very consistent with the presence of abfractions.
Zusammenfassung
Ziele: Man denkt seit langem, dass kariesfreie zervikale Läsionen (NCCL), auch als keilförmige Defekte bezeichnet, durch exzessives Putzen produziert werden. Vor fast 20 Jahren wurde auch eine okklusale Ätiologie vorgeschlagen (Lee und Eagle, 1984). Es existiert immer noch die Kontroverse bezüglich dieser 2 Konzepte. Die vorliegende Arbeit wurde ausgeführt, um das Auftreten von Zeichen exzessiven Putzens oder okklusaler Störungen, die mit keilförmigen Defekten assoziiert sind, zu verifizieren.
Material und Methoden: Während eines Trimesters wurden alle Erstkonsultationen hinsichtlich des Vorkommens von keilförmigen Defekten gescreent. Es wurden 61 Patienten mit NCCLs gefunden. Bei ihnen erfolgte die klinische Untersuchung bezüglich der Merkmale für exzessives Putzen oder für okklusale Störungen. Auch das Vorhandensein von Plaque, Zahnstein oder Zahnbeweglichkeit wurde dokumentiert. Die Häufigkeit und der prozentuale Anteil wurden verwendet, um das Vorkommen von verschiedenen klinischen Merkmalen in Verbindung mit dem Vorhandensein von keilförmigen Defekten zu beschreiben.
Ergebnisse: Keilförmige Defekte existieren oft in Mündern, die Plaque (40.1%), Zahnstein (41.7%) oder Parodontitis (20.4%) aufweisen. Ulzerationen der Gingiva sind ein seltener Befund (1.6%). Jedoch waren subgingivale apikale Grenzen häufig (32.5%). Fast schon systematisch koexistieren NCCLs mit okklusalen Schlifffassetten (94.5%). Das Fehlen einer Eckzahnführung (77.2%) war auch eng mit dem Vorkommen von keilförmigen Defekten assoziiert. Im Gegensatz zur Zahnbeweglichkeit, die selten vorgefunden wurde (1.9%).
Schlussfolgerungen: Klinische Anzeichen von exzessivem Putzen fehlten, während Zeichen okklusaler Störungen mit dem Vorhandensein von keilförmigen Defekten vergesellschaftet waren.
Résumé
Des lésions cervicales non‐cariogènes (NCCL), aussi appelées abfractions, ont longtemps été considérées comme le résultat d'un brossage exagéré. Il y a presque 20 ans une étiologie occlusale a été avancée (Lee & Eagle 1984). Une controverse existe toujours en ce qui concerne ces deux concepts. Le but de l'étude présente a été de vérifier l'apparition des signes d'un brossage excessif ou des perturbations occlusales associées avec les abfractions. Tous les consultants ont été examinés pour la présence d'abfractions durant le premier trimestre. NCCL ont été trouvés chez 61 patients qui ont ensuite reçu un examen complet afin de vérifier la présence clinique de brossage excessif ou de perturbations occlusales. La présence de plaque dentaire, de tartre, de parodontite ou de mobilité ont également été notées. La fréquence et le pourcentage ont été utilisés pour décrire l'apparition des différents signes cliniques en association avec la présence d'abfraction. Les abfractions existent souvent dans les bouches présentant de la plaque dentaire (40.1%), du tartre (41.7%) ou la parodontite (20.4%). L'ulcération de la gencive est une découverte rare (1.6%). Cependant, des limites apicales sous‐gingivales étaient fréquentes (32.5%). NCCL coexistaient presque systématiquement avec les facettes occlusales d'usure (94.5%). Un manque de protection canine (77.2%) était aussi souvent associáà la présence des abfractions. Par contre la mobilitéétait rarement trouvée (1.9 %). Des signes cliniques de brossage excessif manquaient tandis que des signes de perturbation occlusale étaient très souvent trouvés en présence d'abfractions.
Sulfate‐reducing bacteria have recently been associated with periodontitis and proposed to play a role in the pathogenesis of this chronic inflammatory process. Eight isolates of sulfate‐reducing ...bacteria belonging to the genus Desulfovibrio were obtained from the periodontal pockets of five out of seven patients presenting with active periodontitis. A multiplex PCR was devised for their identification at the species level. All isolates were identified as Desulfovibrio fairfieldensis, a recently proposed new species. This finding reinforces the suggestion that Desulfovibrio fairfieldensis is a human bacterium that may present a pathogenic potential.
Il a été suggéré que les Desulfovibrio, qui sont des bactéries anaérobies sulfato-réductrices, pourraient être impliqués dans les parodontites. Nous avons évalué le pouvoir invasif de Desulfovibrio ...vis-à-vis de cellules épithéliales et leur capacité à induire la production de cytokines par ces cellules. Nous avons montré que Desulfovibrio desulfuricans et Desulfovibrio fairfieldensis sont capables d'envahir et de se multiplier dans les cellules épithéliales buccales (cellules KB). La localisation intracytoplasmique de ces deux bactéries a été confirmée par microscopie confocale et électronique à transmission. L'internalisation de ces souches était dépendante de la polymérisation des microtubules mais pas de celle de l'actine. L'infection avec Desulfovibrio était responsable d'une augmentation de la production d'IL-6 et d'IL-8 par les cellules KB. La capacité de D. desulfuricans et de D. fairfieldensis à survivre dans les cellules épithéliales et à moduler leur réponse immunitaire pourrait contribuer au développement des maladies parodontales. Desulfovibrio ainsi que d'autres parodontopathogènes peuvent produire des ß-lactamases et sont capables d'envahir les cellules épithéliales. Il a été suggéré que l'hydrolyse de l'amoxicilline pourrait être évitée grâce à l'utilisation d'un complexe amoxicilline-ß-cyclodextrine (ßCD) et que la diffusion intracellulaire d'agents antimicrobiens pourrait être améliorée après complexation avec des ßCD. Un complexe stable amoxicilline-ßCD, caractérisé après analyse spectrale et thermique, n'a ni amélioré l'activité de l'amoxicilline vis-à-vis de souches produisant des ß-lactamases ni augmenté la diffusion intracellulaire de ce composé.
It has been suggested that Desulfovibrio, which are sulfate-reducing anaerobic bacteria, may be involved in periodontitis. We investigated the capacity of Desulfovibrio to invade epithelial cells and induce cytokine secretion from these cells. We showed that Desulfovibrio desulfuricans and Desulfovibrio fairfieldensis were able to invade and to multiply within oral epithelial cells (KB cells). Intracytoplasmic location of both bacteria was confirmed by confocal laser scanning and transmission microscopy. Invasion of these strains involved microtubule but not microfilament polymerization. Infection by Desulfovibrio resulted in an increase of the production of IL-6 and IL-8 by KB cells. The ability of D. desulfuricans and D. fairfieldensis to survive within oral epithelial cells and to modulate the epithelial immune response may contribute to the initiation and progression of periodontal diseases. Desulfovibrio as well as other periodontopathogens may produce ß-lactamases and have the capacity to invade epithelial cells. It has been suggested that the hydrolysis of amoxicillin might be prevented by using an amoxicillin-ß-cyclodextrin (ßCD) complex and that intracellular diffusion of antimicrobial agents might be enhanced after complexation with ßCDs. A stable 1:1 amoxicillin-ßCD complex, characterized by spectroscopic and thermal analysis, did neither improve the activity of amoxicillin against ß-lactamase producing strains nor enhance the intracellular diffusion of this compound.
L’ostéointégration dans un os sain est un processus largement documenté et maîtrisé. De nombreuses données montrent que ce processus peut être perturbé chez des patients souffrant de maladies ...générales ou polymédicamentés. Le but de cet article est de fournir au praticien des recommandations cliniques quant à leur influence sur l’ostéointégration des implants.
Osteointegration in a healthy bone site is a well documented and controlled biological process. Abundant data demonstrate difficulties in patients with systemic diseases or polymedicated. The goal of this article is to provide the practitioner with clinical rationale to obtain osteointegration.
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