Comparison of different extenders on the quality characteristics of turkey semen during storage Iaffaldano, N. (Università del Molise, Campobasso (Italy). Dipartimento di Scienze Vegetali e dell´Ambiente); Rosato, M.P. (Università del Molise, Campobasso (Italy). Dipartimento di Scienze Vegetali e dell´Ambiente); Manchisi, A. (Università del Molise, Campobasso (Italy). Dipartimento di Scienze Vegetali e dell´Ambiente) ...
Italian journal of animal science,
01/2005, Volume:
4, Issue:
sup2
Journal Article
Peer reviewed
Open access
The effect of three different extenders, BPSE, Lake and IGGKPh, on the quality of turkey semen during storage for 48 h at 5 deg C was evaluated. Each semen pool was divided into 3 aliquots, which ...were diluted with the above mentioned extenders; on each semen aliquot, motility, viability and membrane integrity by hypo-osmotic test were determined. Quality of turkey semen worsened (P0.01) during 48 h storage; however, vitality, motility and membrane integrity values were higher (P0.01) after 24 h and 48 h with BPSE compared to IGGKPh and Lake estenders.
E´ stato valutato l´effetto di tre differenti diluenti, BPSE, Lake e IGGKPh, sulla qualità del seme di tacchino durante la conservazione per 48 h a 5 gradi C. Ogni pool di seme è stato diviso in 3 aliquote, le quali sono state diluite rispettivamente con i tre medium e sulle quali sono state determinate in vitro la motilità, la vitalità e l´integrità di membrana previo stress ipoosmotico. La qualità del seme di tacchino peggiorava (P0,01) durante la conservazione per 48 h; tuttavia i valori di vitalità, mobilità e integrità di membrana sono risultati più alti (P0,01) dopo 24 h e 48 h con BPSE rispetto ai diluenti IGGKPh e Lake
The chemical role of copper chelates on ascorbic acid oxidation was examined. The kinetics of uncatalyzed and Cu(II) ion-catalyzed oxidation of ascorbic acid in aerated and buffered (e.g., acetate, ...citrate, tartrate and phthalate) solutions was studied at 20 deg C. The rate of the oxidation reaction in presence of cupric ion as catalyst, in the pH range investigated (3.2-6.5), was found to be a first-order reaction with respect to ascorbic acid. The effects of pH and cupric ion concentration on the reaction rate suggest a mechanism that may involve the formation of a transition complex between monohydrogenascorbate ion and Cu(II)-buffer chelate. The differences in the reaction rates in the various buffers are due to the different complexing abilities of Cu(II) with the various buffer salts. Coordinatively unsaturated Cu(II)-buffer complexes, which are comparatively less stable than the higher chelates, were more active in the Cu(II)-induced oxidation of ascorbic acid
E' stato esaminato il ruolo chimico dei chelati di rame nell'ossidazione dell'acido ascorbico. E' stata studiata la cinetica di ossidazione dell'acido ascorbico non catalizzata e catalizzata dallo ione Cu(II) in soluzioni aerate e tamponate (per esempio: acetato, citrato, tartrato, ftalato), alla temperatura di 20 gradi C. Nell'intervallo di pH considerato (3,2-6,5), la velocita' della reazione di ossidazione in presenza di ione cuprico come catalizzatore faceva ritenere quest'ultima una reazione di primo ordine rispetto all'acido ascorbico. Gli effetti del pH e della concentrazione dello ione cuprico sulla velocita' di reazione facevano supporre l'esistenza di un meccanismo che potrebbe interessare la formazione di un complesso di transizione fra ione monoidrogenascorbato e chelato Cu(II)-tampone. Le differenze nelle velocita' di reazione nei vari tamponi sono dovute alle diverse capacita' complessanti di Cu(II) con i vari sali delle soluzioni tampone. I complessi Cu(II)-tampone insaturati in misura coordinata, meno stabili dei chelati superiori, risultavano piu' attivi nell'ossidazione dell'acido ascorbico indotta da Cu(II)
Sixty-three S. enterica strains isolated from pork and poultry meat were searched for chromosomic (invA and phoP) and plasmidic (spvC and spvR) genes and for phenotypes connected to their virulent ...attitude. The strains were subjected to biochemical assays, in order to evaluate their ability to hydrolize rhamnose, ortho-nitrophenyl-galactopiranoside (ONPG), mannitol and citrate. InvA gene was detected in all the strains but one S. enteritidis, whereas phoP factor was detected in 82.5 of strains. Twenty strains carried spvR fragment; on the contrary, spvC gene was never detected, with the exception of one S. enteritidis. An high percentage of salmonellae (82.5) metabolized rhamnose, mannitol and citrate. The most part of the strains (74.6) did not use ONPG. The time (hours) required to observe a reduction of over 50 in the transmittance value for all the strains was registered. This threshold was considered significant, in order to evaluate the intensity of enzyme activity. With regard to citrate, the most part of S. Enteritidis strains (55) exceeded this value within 5 hours from the beginning of the test. With regard to mannitol, the most part of the strains exceeded the threshold limit in just one hour, with no differences among the serovars. The phenotypic characterization confirmed that S. typhimurium and S. enteritidis can be considered the most virulent strains, while S. derby, S. anatum, S. london and S. agona the less virulent ones. S. virchow, finally, showed an intermediate pathogenicity
Sono state individuate sequenze geniche cromosomiche (invA e phoP) e plasmidiche (spvC e spvR) e valutate caratteristiche fenotipiche legate alla capacità infettante di 63 stipiti di S. enterica, isolati da matrici avicole e suine. I ceppi sono stati sottoposti a saggi biochimico-enzimatici per quantificare la velocità di idrolisi dei substrati ramnosio, O-nitrofenil-beta-D-galattopiranoside (ONPG), mannitolo e citrato. Il gene invA è stato rilevato in tutti gli stipiti, con l'esclusione di un ceppo di S. enteritidis, mentre la sequenza genica phoP è stata riscontrata nell'82,5 dei campioni. Il frammento spvR è risultato presente in 20 stipiti, a differenza del gene spvC, apparso sempre assente, tranne in un ceppo di S. enteritidis. Un'elevata percentuale di salmonelle (82,5) ha metabolizzato il ramnosio, il mannitolo e il citrato. La maggioranza degli stipiti (74,6) non ha idrolizzato l'ONPG. E' stato determinato il tempo (ore) necessario affinché i ceppi raggiungessero il valore soglia arbitrariamente prefissato, ovvero una diminuzione di oltre il 50 della trasmittanza, limite ritenuto significativo per valutare l'intensità delle attività enzimatiche. Relativamente al citrato, la maggior parte dei ceppi di S. enteritidis (55) ha superato tale valore entro 5 ore dall'inizio del test. Per il mannitolo, già nell'arco di un'ora, la maggior parte degli stipiti ha raggiunto il limite soglia, indipendentemente dal serovar di appartenenza. La caratterizzazione fenotipica ha confermato che S. typhimurium e S. enteritidis possono essere considerati i sierotipi più patogeni, mentre S. derby, S. anatum, S. london e S. agona i meno virulenti; tra questi due gruppi si può collocare S. virchow, con una patogenicità intermedia
Résumé CONTEXTE Malgré un usage ancien, ce n’est qu’en 1999 que l’OMS propose dans son manuel d’examen du sperme humain de doser plusieurs composés biochimiques du plasma séminal pour l’exploration ...fonctionnelles des glandes annexes. A la même période, un effort international s’organise pour standardiser les examens de laboratoires et augmenter leur performance avec l’accréditation selon la norme ISO 15189. Dans ce contexte, la participation des laboratoires aux programmes d’évaluation externe de la qualité (EEQ) est une exigence fondamentale. Afin de les aider à faire face à cette obligation, nous avons organisé un EEQ pour la biochimie séminale basé sur des échantillons commutables. Dans ce travail, nous souhaitons rapporter une vue globale sur l’offre analytique française, sur les méthodes de dosage utilisées et leurs performances. Nous évaluons également leur potentiel à répondre aux exigences de la norme concernant l’accréditation. RESULTATS Nous avons proposé entre 2014 et 2019 sept enquêtes. Une médiane de six laboratoires a répondu à chaque enquête, soit un ratio d’un laboratoire pour 11.2 millions d’habitants. Sept marqueurs séminaux sont dosés en routine mais un noyau dur de 4 marqueurs est partagé par tous les laboratoires: citrate, zinc (prostate), fructose (vésicules séminales) et α-1,4 glucosidase (épididyme). L’usage de méthodes marquées CE-IVD a concerné entre 0 et 75% de l’ensemble des dosages. Tous les laboratoires ont rendu des résultats de zinc dans les limites acceptables définies, 75% pour le citrate et α-1,4 glucosidase et 67% pour le fructose. En combinant toutes les données recueillies, nous avons construit un score qui a permis de classer le potentiel d’accréditation des marqueurs séminaux: l’accréditation du citrate, fructose et zinc ne devrait pas poser problème, l’ α-1,4 glucosidase présente une faiblesse analytique mais la phosphatase prostatique, la L-carnitine libre et la glycérophosphocholine ne sont pas accréditables en l’état actuel. Conclusion Nous avons organisé un programme d’EEQ de biochimie séminale pour aider les laboratoires français à répondre à l’exigence d’accréditation totale en 2020. Ce programme est. perfectible mais il a permis de révéler les forces et faiblesses de ce paysage analytique. Des méthodes sont disponibles pour une exploration biochimique efficiente de la prostate et des vésicules séminales mais celle des épididymes est apparue particulièrement fragile. Ce problème andrologique doit être pris en compte par les autorités sanitaires et les sociétés savantes concernées.
Résumé Contexte Chez les hommes infertiles qui présentent une azoospermie non obstructive (NOA), le citrate de clomifène a été proposé comme pré-traitement avant la chirurgie pour extraction ...testiculaire de spermatozoïdes (TESE), surtout quand la testostérone sérique est basse. Présentation du cas Nous rendons compte, ici, d’un patient azoospermique de 33 ans avec antécédent de traitements répétés par TESE « frais » et par citrate de clomifène (50 mg/jour sur 6 mois) avant de subir une biopsie testiculaire bilatérale assistée microscopiquement. L’étude histologique et immunohistochimique a révélé un arrêt hétérogène de la spermatogénèse au stade de spermatogonies ou de spermatocytes primaires, avec des foyers de spermatogenèse préservée jusqu’au stade de spermatides allongées dans le testicule droit. Dans le testicule gauche, la majorité des tubules (>70%) ne présentaient ni lumière tubulaire ni épithélium séminifère régulier mais un grand nombre de cellules spermatogonies-like. Ces cellules se sont avérées être des spermatogonies normalement différenciées (positives pour l’antigène 4 associé au mélanome (MAGEA4), négatives pour la phosphatase alcaline placentaire (PlAP)) avec une activité proliférative accrue (positives pour l’antigène nucléaire de prolifération cellulaire (PCNA)) et un taux un peu plus élevé de cellules apoptotiques. Comparée à celle d’un tissu témoin avec spermatogenèse normale, l’expression des récepteurs aux hormones sexuelles, récepteur aux androgènes (AR), récepteur aux estrogènes (ER) alpha et récepteur 1 à la protéine G couplée aux estrogènes (GPER1), n’était pas modifiée dans les échantillons du patient. Les cellules de Sertoli semblaient matures (positives à la vimentine, négatives cytokératine 18), tandis que l’expression de la protéine 1 de la zone occludens (ZO-1), de la claudine 11, et de la connexine 43 était absente ou délocalisée dans les tubules présentant une abondance de spermatogonies. Conclusion Ces résultats suggèrent que la formation de la barrière hémato-testiculaire est perturbée dans les tubules affectés. À notre connaissance, il s’agit de la première observation d’une prolifération excessive et non maligne de spermatogonies chez un patient avec NOA. Bien que les mécanismes moléculaires sous-jacents restent à élucider, nous supposons que cette pathologie inhabituelle a été déclenchée par le traitement au citrate de clomifène à haute dose précédant la biopsie testiculaire.
Résumé
Les tumeurs cancéreuses se comportent comme des parasites métaboliques qui puisent dans les réserves de l’hôte pour alimenter leurs biosynthèses, tandis qu’elles sécrètent des déchets (NO, ...polyamines, ammoniac, lactate…) qui favorisent la croissance tumorale et un microenvironnement acide aidant à l’envahissement et à la prolifération. Dans le métabolisme de la cellule cancéreuse, le citrate joue un rôle majeur, étant à la fois la jauge de l’énergie cellulaire (avec l’ATP), le donneur d’acétyle pour la synthèse des acides gras et/ou l’acétylation des protéines. Par conséquent, son taux cytosolique est abaissé, ce qui a été confirmé dans des biopsies de cancer de la prostate. Les stratégies visant à remonter le taux de citrate dans les cellules cancéreuses pourraient être pertinentes comme nous l’avons montré au laboratoire.
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