Mice and men: An antibody conjugate with trans‐cyclooctene was administered to tumor‐bearing mice, and the resulting chemically tagged tumors were subsequently treated with an 111In‐labeled tetrazine ...probe in an inverse‐electron‐demand Diels–Alder reaction. The adduct was formed in a remarkable 52–57 % yield in vivo and used for non‐invasive pretargeted tumor imaging in mice (see picture).
Engineering cysteines at specific sites in antibodies to create well-defined ADCs for the treatment of cancer is a promising approach to increase the therapeutic index and helps to streamline the ...manufacturing process. Here, we report the development of an in silico screening procedure to select for optimal sites in an antibody to which a hydrophobic linker–drug can be conjugated. Sites were identified inside the cavity that is naturally present in the Fab part of the antibody. Conjugating a linker–drug to these sites demonstrated the ability of the antibody to shield the hydrophobic character of the linker–drug while resulting ADCs maintained their cytotoxic potency in vitro. Comparison of site-specific ADCs versus randomly conjugated ADCs in an in vivo xenograft model revealed improved efficacy and exposure. We also report a selective reducing agent that is able to reduce the engineered cysteines while leaving the interchain disulfides in the oxidized state. This enables us to manufacture site-specific ADCs without introducing impurities associated with the conventional reduction/oxidation procedure for site-specific conjugation.
Wie sieht's aus in der Maus? Ein trans‐Cycloocten‐Antikörper‐Konjugat wurde Tumormäusen verabreicht. Die derart chemisch markierten Tumore wurden dann mit einer 111In‐markierten Tetrazin‐Sonde in ...einer Diels‐Alder‐Reaktion mit inversem Elektronenbedarf umgesetzt, die das Addukt in vivo mit einer bemerkenswerten Ausbeute von 52–57 % ergab. Mit diesem nichtinvasiven Verfahren gelang die Abbildung von Tumoren in Mäusen (siehe Bild).
Diels‐Alder‐Reaktionen mit inversem Elektronenbedarf können effizient in lebenden Tieren ausgeführt werden. In ihrer Zuschrift auf S. 3447 ff. beschreiben M. S. Robillard et al. eine Ausbeute von 52 ...% für die In‐vivo‐Umsetzung von trans‐Cycloocten‐Markierungen an einem Antikörper, der in einem Tumor lokalisiert ist, mit einer 111In‐markierten Tetrazin‐Sonde. Die schnelle Reaktion führte zu einer merklichen Ansammlung von Radioaktivität im Tumor eines Mausmodells, die durch nichtinvasive Bildgebung nachweisbar war.
PDF
