U radu je prikazan doprinos istraživanju glukozinolata u razdoblju 2005. – 2020. koji je ostvaren radom na Kemijsko-tehnološkom fakultetu, Sveučilišta u Splitu. Pregledom sveoubuhvatne dokumentacije ...utvrđeno je da znatnom broju predloženih struktura nedostaju važne strukturne informacije koje bi osigurala NMR i MS spektroskopija, pa je danas broj glukozinolata još uvijek varijabilan. U najnovijem istraživanju, u rodu
Hesperis
, identificiran je 4-
O
-D-apiozilglukomatronalin, čime ukupni broj glukozinolata danas broji između 89 i 136 struktura. U svrhu identificiranja izvora specifičnih glukozinolata koji bi mogli djelovati kao prekursori biološki aktivnih izotiocijanata, istraživan je sadržaj glukozinolata u biljkama. Istraživanja uključuju i razgradnju glukozinolata (enzimska, termička i kemijska) kao i biološku aktivnost (citotoksična, antimikrobna, protuupalna i dr.).
This review paper presents a contribution to the research of glucosinolates over the period 2005–2020, which was obtained during work at the Faculty of Chemical Technology, University of Split. After review of the comprehensive documentation, it was determined that a significant number of proposed structures lack important structural information that would be provided by NMR and MS spectroscopy, and today the number of glucosinolates is still variable. In the recent study of
Hesperis
genus, 4-
O
-D-apiosylglucomatronalin was identified, which gives the total number of glucosinolates today ranging from 89 to 136 structures. In order to identify the sources of specific glucosinolates that could act as precursors of biologically active isothiocyanates, the content of glucosinolates in plants was investigated. The study also includes the degradation of glucosinolates (enzymatic, thermal, and chemical), as well as biological activity (cytotoxic, antimicrobial, anti-inflammatory,
etc.
).
Salicylic acid is a phytochemical with beneficial effects on human well-being. Salicylic acid is a phenolic compound and is present in various plants where it has a vital role in protection against ...pathogenic agents. Natural sources include fruits, vegetables and spices. The most famous and defined effect of salicylic acid is prostaglandin synthesis inhibition. Salicylic acid has antiinflammatory effects through suppression of transcription of genes for cyclooxygenase. Most of the pharmacological properties of salicylic acid can be contributed to the inhibition of prostaglandin synthesis. Also, it was discovered that salicylic acid has other in vivo cyclooxygenase-independent pathways. Since salicylic acid does not inhibit cyclooxygenase considerably, the anti-inflammatory effect is not a consequence of direct inhibition of cyclooxygenase activity. Because of its fundamental role, it was suggested that inhibition of nuclear factor kappa B by salicylic acid is one of the key anti-inflammatory mechanisms of action for salicylates. One of the most studied properties of salicylic acid is its antioxidative activity. Salicylic acid is a confirmed inhibitor of oxidative stress. Salicylic acid is capable of binding iron. This fact is significant for antioxidative effect of salicylic acid because iron has an important function in the course of lipid peroxidation.
Salicilna kiselina je fitohemikalija sa povoljnim efektima na ljudsko zdravlje. Salicilna kiselina je fenolna komponenta i prisutna je u različitim biljkama, gde ima važnu ulogu u zaštiti od patogenih agenasa. U prirodi se nalazi u voću, povrću i začinima. Najpoznatiji i najbolje proučen efekat salicilne kiseline je inhibicija sinteze prostanglandina. Salicilna kiselina ostvaruje anti-zapaljensko dejstvo preko supresije gena za ciklooksigenazu. Većina farmakoloških svojstava salicilne kiseline mogu se objasniti inhibicijom sinteze prostanglandina. Otkriveno je da salicilna kiselina pored ovog ima i druga in vivo dejstva. Pošto salicilna kiselina ne inhibira značajno ciklooksigenazu, anti-zapaljensko dejstvo nije posledica direktne inhibicije ovog enzima. Predloženo je da je inhibicija nuklearnog faktora kapa B od strane salicilata jedno od glavnih mehanizama anti-zapaljenskog dejstva salicilata. Jedno od najviše proučavanih svojstava salicilne kiseline je antioksidativna aktivnost. Salicilna kiselina je dokazani inhibitor oksidativnog stresa. Salicilna kiselina ima sposobnost vezivanja gvožđa. Ova činjenica je značajna za antioksidativno dejstvo salicilne kiseline zbog toga što gvožđe ima važnu ulogu u procesu lipidne peroksidacije.
The aim of this study was to compare the biological activities of ethanolic propolis extracts of
obtained from Ardahan and Erzurum provinces of Turkey. Samples were tested for antioxidant, ...anticytotoxic, anticarcinogenic, antibacterial, and antifungal potentials using different techniques. Propolis samples from the two provinces had different mineral and organic compositions related to their geographical origin. The ferric reducing antioxidant power (FRAP) test showed superiority of Ardahan propolis over the Erzurum. Regardless of origin and the presence of mitomycin C in the culture medium, propolis enhanced human peripheral lymphocyte viability, which depended on the duration and propolis concentration. Antiperoxidative activity on MCF-7 breast cancer cells was concentration-dependent. Erzurum propolis showed the highest anticarcinogenic activity at the concentrations of 62.5 μg/mL and 125 μg/ mL, which dropped at higher concentrations. All propolis samples also showed antibacterial activity against the tested human pathogens similar to ampicillin and penicillin controls, except for
. However, they did not exert any antifungal activity against
and
. In conclusion, propolis samples from both provinces showed promising biological activities, but further research should focus on finding the right concentrations for optimal effect and include the cell necrosis pathway to get a better idea of the anticarcinogenic effects.
Kumarin i njegovi derivati su široko rasprostranjeni u prirodi i nalazimo ih u mnoštvu različitih biljaka, voća i povrća. Kumarin i njegovi derivati pokazuju niz bioloških aktivnosti, međutim njegova ...upotreba je ograničena, a dopuštena koncentracija u namirnicama određena zakonom. Vrlo su se često kao model za proučavanje toksičnosti kumarina koristili štakori, ali novija istraživanja pokazuju da je metabolizam, a samim time i štetnost kumarina, kod ljudi i štakora, različita. Ovaj rad daje pregled osnovnih bioloških svojstava kumarina i njegovih derivata, kao i opis i specifičnosti metabolizma kumarina kod ljudi u odnosu na štakore.
Artičoka (Cynara cardunculus L. var. scolymus) potječe s Mediterana i uzgaja se u nekoliko zemalja. Građena je od stabljike, listova i glavice, koja se još naziva capitulum, na kojoj se nalaze ...zeleni, šiljasti pricvjetni listovi. Bogata je polifenolima, flavonoidima, antocijanima, fenolnim spojevima, inulinom, kumarinima, terpenima, prehrambenim vlaknima, enzimima, polisaharidima, mineralnim tvarima i vitaminima, zbog čega ima široku primjenu u prehrambenoj industriji, biomedicini i proizvodnji biogoriva. Nekoliko je istraživanja pokazalo da artičoke imaju različita svojstva, kao što su antioksidacijska, protuupalna, antimikrobna, antikancerogena, anti-HIV, kardioprotektivna, hepatoprotektivna, te da snizuju razinu lipida i kolesterola u krvi. Svrha je ovoga rada bila dati pregled literature o fitokemijskom sastavu, biološkoj aktivnosti i primjenama artičoke, s naglaskom na metodama ekstrakcije, pročišćavanju i koncentraciji enzima u artičokama.
Cilj je ovoga istraživanja bio usporediti biološku aktivnost etanolnih ekstrakata propolisa pčelinje pasmine Apis mellifera caucasica iz dviju turskih provincija: Ardahana i Erzuruma. Testirana su ...njihova antioksidacijska, anticitotoksična, antikancerogena, antibakterijska i antifungalna svojstva. Uzorci iz tih dviju provincija razlikovali su se u mineralnom i organskom sastavu koji je odražavao njihovo zemljopisno podrijetlo. Test redukcije željeza/antioksidacijske snage (engl. ferric reducing antioxidant power, krat. FRAP) otkrio je superiornost ardahanskoga propolisa nad erzurumskim, no bez obzira na podrijetlo i prisutnost mitomicina C u mediju, oba su propolisa povećala vijabilnost ljudskih perifernih limfocita, a učinak je ovisio o koncentraciji i trajanju. Propolis iz Erzuruma iskazao je najveću antikancerogenu aktivnost u koncentracijama od 62,5 i 125 μg/mL, no ona se smanjila s višim koncentracijama. Oba su propolisa također iskazala antibakterijsku aktivnost sličnu ampicilinskoj i penicilinskoj kontroli, osim kad se radilo o bakteriji Pseudomonas aeruginosa. Međutim, oba su zakazala protiv plijesni Candida albicans i Yarrowia lipolytica. Može se zaključiti da uzorci propolisa iz obiju provincija pružaju obećavajuće biološke aktivnosti, no u daljnja istraživanja, koja se trebaju usmjeriti na traženje optimalnih koncentracija za postizanje željenog učinka, treba uključiti i nekrotični put u mehanizmu djelovanja kako bi se stekao bolji uvid u njihovo antikancerogeno djelovanje.
Aim of our work has been investigation of biological activity of methylamino-
and metoxy- derivatives of avarone, their bioconjugates of lysozyme and study
of the mechanism of their biological ...action. For synthesis were chosen
derivatives for which it was expected to have more negative half-wave
potential than avarone and therefore a higher activity. The selected
compounds are 3’-methylamino, 4’-methylamino- and 3’-methoxyavarone.
Antimicrobial activity of the synthesized derivatives was investigated
towards Gram positive bacteria: Bacilus subtilis, Clostridium sporogenes,
Sreptosporangium longisporum., Micrococcus flavus, Sarcina lutea and
Staphylococcus aureus, Gram negative bacteria: Klebsiella pneumoniae, Proteus
vulgaris, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enteritidis and Escherichia coli
and fungi cultures: Aspergilus niger, Candida albicans and Sacharomyces
cerevisiae, all by disc diffusion method. Toxicity against Artemia salina
nauplii was surveyed as well. Antioxidant activity of avarone and its
derivatives was assessed by DPPH assay. Antitumor activity was determined for
all derivatives towards eight lines of tumor cells (myelogenous leukemia
(K562), cervix carcinoma (HeLa), human malignant melanoma cells (Fem-X),
Jurkat T cell leukemia, estrogen receptor negative breast carcinoma
(MDA-MB-231), estrogen receptor positive breast carcinoma (MCF7), human fetal
lung fibroblast (MRC-5) and human promyelocytic leukemia (HL-60)). For all
derivatives toxicity towards lymphocytes was determined. Model enzyme
lysozyme was modified with the synthesized quinones and for all the obtained
bioconjugates MIC value towards Gram positive and Gram negative bacteria were
determined. Modification reaction was monitored by UV/VIS spectrophotometry,
SDS electrophoresis and mass spectrometry. Binding position of quinone
derivatives on lysozyme was determined by MALDI TOF spectrometry after
trypsin digestion. Since the avarone derivatives were found to bind to lysine
(Lys-97) in lysozyme,
4’-((5-((tert-butoxycarbonyl)amino)-5-carboxypentyl)-amino)avarone has been
synthesized as a model compound for further investigation of the biological
activity of lysozyme―quinone aduct. For all obtained modifications of
lysozyme, activity towards Micrococcus luteus after reaction of modification
was determined. The mechanism of action of avarone and its derivatives on
circular plasmids pRB322 and pUC18 DNA and their action on DNA of bovine
thymus was investigated as well. UV spectra of plasmid and bovine thymus DNA
and their modifications were recorded and interactions with quinones were
studied by electrophoresis on agarose gel.
Cilj našeg rada bio je ispitivanje biološke aktivnosti metilamino- i
metoksiderivata avarona i razjašnjavanje mehanizma njihovog biološkog
dejstva. Za sintezu su izabrani derivati za koje se očekivalo da će imati
negativniji polutalasni potencijal od avarona i samim tim pokazivati povećanu
aktivnost. Sintetisani su 4'-(metilamino)-avaron, 3'-(metilamino)-avaron i
3'-metoksi-avaron. Antibakterijska aktivnost dobijenih derivata je ispitivana
prema gram-pozitivnim bakterijama: Bacillus subtilis, Clostridium sporogenes,
Streptosporangium longisporum, Micrococcus flavus, Sarcina lutea i
Staphylococcus aureus, prema gramnegativnim bakterijama: Klebsiella
pneumoniae, Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enteritidis,
Escherichia coli i prema kulturama gljivica: Aspergillus niger, Candida
albicans i Saccharomyces cerevisiae disk-difuzionom metodom. Takođe,
ispitivana je i toksičnost derivata na račiće Artemia salina. Potencijalna
antioksidativna aktivnost avarona i dobijenih derivata ispitivana je testom
sa DPPH. Antitumorska aktivnost ispitivana je za sve derivate na osam vrsta
ćelija raka (ćelijske linije raka grlića materice, melanoma i leukemije, rak
dojke pozitivan na estrogeni receptor, rak dojke negativan na estrogeni
receptor, rak pluća, leukemija T-ćelija i promijelocitna leukemija) pri čemu
je ispitivana i njihova citotoksičnost na limfocite. Svim hinonskim
derivatima hemijski je modifikovan model-enzim lizozim. Dobijenim
modifikatima lizozima je nakon modifikacije određena enzimska aktivnost. Sama
modifikacija je praćena UV/Vis spektrofotometrijom, SDS elektroforezom i
masenom spektrometrijom. Mesto vezivanja hinonskih derivata za molekul
lizozima određeno je tehnikom MALDI TOF posle tripsinske digestije
modifikata. S obzirom na uočeno vezivanje avaronskih derivata za ε-amino
grupu lizina (Lys-97) u lizozimu, sintetisano je jedinjenje
4'-((5-tert-butoksikarbonil)amino)-5-karboksipentil)amino)- avarona, koje je
poslužilo kao model jedinjenje za dalja ispitivanja biološke aktivnosti
lizozim-hinonskog adukta. Dobijenim modifikatima lizozima određena je MIC
vrednost prema gram-pozitivnim i gram-negativnim bakterijama. Ispitivano je i
dejstvo avarona i njegovih derivata na cirkularnu DNA plazmida pRB322 i pUC18
pri čemu je sama interakcija sa hinonima proučavana elektroforezom na
agaroznom gelu. Ispitivano je i dejstvo hinona na DNA timusa teleta.
Snimljeni su UV i fluorescentni spektri hinonskih modifikata DNA iz timusa
teleta, na osnovu kojih su doneseni zaključci o interakcijama između
hinonskih jedinjenja i DNA sisarskog porekla.
Prirodni proizvodi poput žitarica, orašastih plodova, voća, povrća i ljekovitog bilja sadrže brojne biološki aktivne tvari (fenolne spojeve, glukozinolate, karotenoide, alkaloide i dr.) koje mogu ...imati različite povoljne, ali i nepovoljne učinke na organizam. Povoljni učinci na zdravlje ljudi povezuju se s antitumorskim, antialergijskim, antibiotičkim, antioksidacijskim i drugim svojstvima koje mogu posjedovati biološki aktivne tvari iz biljaka. Utvrđeno je da djelovanje navedenih tvari ima zaštitni učinak kod širokog raspona tumorskih oboljenja, smanjuje mogućnost pojave koronarnih bolesti, srčanog udara te štiti organizam od oksidativnog stresa uzrokovanog slobodnim radikalima. Stoga se sve više ispituje primjena biološki aktivnih tvari iz biljaka kao izvora novih lijekova, pri čemu se u istraživanjima često koriste in vitro testovi koji uključuju uporabu različitih humanih staničnih linija.
Stanične linije koriste se u procjeni toksičnosti kemikalija i uzoraka iz okoliša te predstavljaju vrlo koristan alternativni pristup u (eko)toksikološkim istraživanjima. Također, često se koriste pri ispitivanju biološke aktivnosti spojeva prisutnih u biljkama, osobito voću i povrću, te raznih proizvoda koji se baziraju na tim sirovinama. Interakcija ispitivane tvari i bioloških sustava odvija se ponaprije na staničnoj razini, na čemu se temelji primjena in vitro staničnih kultura, koje omogućuju brže i ekonomičnije studije u odnosu na in vivo istraživanja. Kod in vitro testova najčešće se određuje tzv. bazalna citotoksičnost, kojom se određuje učinak ispitivane tvari na preživljenje stanica u kulturi, a tako dobiveni rezultati mogu poslužiti kao smjernice za daljnja in vivo istraživanja.
Kukuruz je druga najpoznatija krušarica iza pšenice. U Hrvatskoj se najviše kukuruza proizvodi u kontinentalnom dijelu gdje postoje najpovoljniji uvjeti za njen rast i razvoj. Za uzgoj kukuruza ...potrebni su određeni uvjeti. Cilj je uzgojiti zdravo i krupno zrno te postići što veći prinos po jedinici površine. Zanimalo nas je u kojoj mjeri će sideracija, zelene gnojidba, utjecati na obogaćivanje tla organskom tvari, povećanje njegove biološke aktivnosti, promjene u teksturi i strukturu tla te u vodozračnim odnosima u tlu.
Rod Centaurea, porodica Asteracea, taksonomski je vrlo složen, a 80 od ukupno 400 do 700 vrsta nalazimo na području Republike Hrvatske. Cilj ovoga doktorskog rada bio je odrediti fitokemijski i ...citogenetski profil odabranih vrsta roda Centaurea: Centaurea ragusina, Centaurea rupestris i Centaurea solstitialis. Fitokemijski profil, određen kroz kemijski sastav izoliranih hlapljivih ulja, istražen je vezanim sustavom plinska kromatografija - masena spektrometrija. Citogenetski profil, određen kao veličina genoma i osnovni broj kromosoma istraživanih vrsta, istraživan je protočnom citometrijom i standardnim kariološkim metodama. Citogenetski profil fitokemijski proučavanih vrsta u skladu je s prethodnim istraživanjima, čime je utvrđena autentičnost istraživanih vrsta bez dvojbe prilikom botaničke determinacije. Dominantne su komponente hlapljivih ulja odabranih vrsta roda Centaurea neoksidirani i oksidirani seskviterpenski spojevi te neterpenske kiseline i ugljikovodici. Germakren D, -kariofilen i heksadekanska kiselina identificirani su u svim proučavanim eteričnim uljima. Izolirana hlapljiva ulja pokazuju slab antioksidacijski potencijal i slabu sposobnost inhibicije acetilkolinesteraze i butirilkolinesteraze kao i značajan antimikrobni potencijal.
The Centaurea genus, Asteraceae family, taxonomically is very complex. It contains 80 species from Croatia, of about 400 up to 700 in total. The aim of this doctoral thesis was to determine the phytochemical and cytogenetic profiles of selected Centaurea species: Centaurea ragusina, Centaurea rupestris and Centaurea solstitialis. Phytochemical profile, determined as chemical composition of isolated volatile oil, was assesed with associated gas chromatography-mass spectrometry. Cytogenetic profile, expressed as genome size and chromosome number, was assessed by flow cytometry and standard karyological methods. Cytogenetic profile of species selected for phytochemical research, is in accordance with previous research, which aproves authenticity of the studied taxa. Dominant components of volatile oils of Centaurea species are oxidized and nonoxidized sesquiterpenes, and nonterpene acids and hydrocarbons. Germacrene D, -caryophyllene and hexadecanoic acid are identified in all Centaurea volatile oils. Isolated volatile oil showed weak antioxidant potential and inhibiton of acetylcholinesterase and butyrylcholinesterase, as well as significant antimicrobial potential.