Straipsnyje siekiama atskleisti ekspresionizmo meninės praktikos ryšius su iracionalistine ir formalistine meno filosofija. Didžiausias dėmesys skiriamas formalistiniam ekspresionizmo sparnui, ...kuriame ryškus estetizmas, nihilizmas ir polinkis į formą. Ekspresionistai, kaip ir F. Nietzsche, buvo įsitikinę, kad techninė civilizacija ir masinės kultūros formavimasis grasina menininkui jo dvasios praradimu, individo laisvės apribojimu ir meno nužmoginimu. Į vidinį menininko pasaulį, jo sąmonę ekspresionistai žvelgė kaip į aukščiausią absoliučią realybę, sugebančią per psichologines būsenas išreikšti būties tiesas. Apsiribojusi daugiausia formaliųjų meno kūrinio pusių analize, formalistinė estetika faktiškai eliminavo turinio kategoriją. Pasisakydama už meno atitrūkimą nuo realaus gyvenimo, ji kartu filosofiškai pateisino beprasmį estetizmą ir meno suvedimą į grynai formalias struktūras. Ekspresionistai ignoravo socialiai reikšmingus idealus, suabsoliutino vidinės ekspresijos reikšmę, linko į maksimalų spalvos ir formos autonomiškumą.
MONALESSA-2 je placebo kontrolirana randomizirana klinička studija faze 3 koja je uključila bolesnike s uznapredovalim karcinomom dojke s pozitivnim hormonskim receptorima (HR+) estrogenski receptori ...(ER) i/ili progesteronski receptori (PR) te negativnim receptorom za humani epidermalni faktor rasta 2 (eng. HER2-). Studija je pokazala kako je preživljenje bez progresije bolesti (eng. PFS) bilo značajno dulje u onih bolesnika koji su primali ribociklib inhibitor ciklinovisne kinaze 4 i 6 (CDK4/6) uz letrozol u usporedbi s pacijentima koji su primali placebo i letrozol. Međutim, ER+/PR+ grupa imala je viši omjer rizika (eng. hazard ratio) za preživljenje bez progresije bolesti (PFS) od ER+/PR- grupe (0.62 vs. 0.36). Dokazi iz modela staničnih linija sugeriraju kako je signalni put PR usko vezan za regulaciju staničnog ciklusa kod inhibicije aktivnosti CDK 4/6 nakon izlaganja progestinu. Moguće objašnjenje ovih saznanja može biti povezano s visokom ekspresijom PR koja interferira s aktivnošću ribocikliba na razine ciklin-kinaze. Stoga, upitno je da li razina ekspresije PR receptora utječe na učinkovitost primjene ribocikliba, tj. da li njegova veća ekspresija može uzrokovati smanjenje učinkovitosti ribocikliba. S obzirom na sigurnosni profil ribocikliba, potrebno je izvršiti analize PFS vrijednosti bolesnika koji primaju ribociklib ovisno o razinama ekspresije hormonskih receptora kako bi se potencijalno odredile vrijednosti ekspresije PR (ili ER/PR omjera) kao markera učinkovitosti inhibitora CDK4/6.
Baza dojenačkih lica City (engl. City Infant Faces Database, CIFD; Webb i sur., 2018) sadržava 154 slike emocionalnih ekspresija dojenčadi koje se mogu koristiti u eksperimentalnim istraživanjima ...dojenačke facijalne komunikacije, prepoznavanja facijalne ekspresije i roditeljske osjetljivosti. CIFD je validiran samo na malome uzorku iz opće populacije i na studentima primaljstva i sestrinstva u Ujedinjenome Kraljevstvu (UK). Stoga je cilj ovoga istraživanja bio validacija baze na većemu uzorku hrvatskih studenata te roditelja dojenčadi u dobi od 1 do 12 mjeseci. Tristo pedeset studenata (Istraživanje 1) te 422 majke i 106 očeva (Istraživanje 2) gledali su slike dojenačkih lica bijele rase. Studenti su procjenjivali slike iz CIFD-a i Baze dojenačkih lica Tromsø. Također su ispunili upitnike koji mjere empatiju, aleksitimiju te prepoznavanje i ekspresiju emocija. Roditelji su procjenjivali valenciju facijalnih ekspresija slika iz CIFD-a. Rezultati i kod studenata i kod roditelja u skladu su s inicijalnom validacijom, osim što je slaganje za negativne ekspresije niže kod hrvatskih roditelja nego u istraživanju provedenome u UK-u. U usporedbi s istraživanjem provedenim u UK-u studenti su procjenjivali slike kao intenzivnije, jasnije i autentičnije te su kod njih izazivale snažnije emocije. Nadalje, nije bilo razlike u točnosti između majki i očeva ili između onih koji su roditelji prvi put i onih koji su iskusni roditelji. Stoga možemo zaključiti da je CIFD obećavajući instrument za istraživačke svrhe te bi ga trebalo dalje validirati u drugim državama, usmjeravajući se pritom na njegovu prediktivnu valjanost.
Postoji zanimanje istraživača za provjeru pretpostavke o vezi između oksidacijskog stresa i patofizioloških procesa tijekom kliničkog mastitisa. Glavni je cilj ovog istraživanja bio ustanoviti profil ...antioksidacijske genske ekspresije u mliječnih krava s kliničkim mastitisom. Uzorci mlijeka 77 krava s kliničkim mastitisom uzeti su između 15. i 70. dana laktacije (DIM) i analizirani standardnim bakteriološkim testovima. Istraživana je mRNA ekspresija antioksidacijskih gena, kao što je katalaza (CAT), glutation-peroksidaza (GPx) i superoksid-dismutaza (SOD). Osim toga u uzorcima mlijeka zdravih krava i onih s kliničkim mastitisom mjerene su razine lipidne peroksidacije. Izolirane su bakterije Staphylococcus aureus (S. aureus, 10,48 %), Streptococcus agalactiae (7,69 %), Streptococcus dysagalactiae (6,29 %) i Escherichia coli (E. coli, 29,37 %). Dominantan patogen pronađen u mlijeku krava s kliničkim mastitisom u ranoj laktaciji bila je bakterija E. coli. Prosječna vrijednost malondialdehida (MDA) u uzorcima krava s kliničkim mastitisom bila je znakovito veća (P < 0,05) nego u zdravih krava. Rezultati su pokazali da je ekspresija profila SOD-a u mlijeku krava s mastitisom, inducirana bakterijom S. aureus, bila znakovito veća (P < 0,0001) u usporedbi s E. coli. Također, ekspresija mRNA razine GPx-a u mlijeku krava s mastitisom zbog bakterije E. coli bila je znakovito veća (P < 0,0001) u usporedbi s bakterijom S. aureus. Genska ekspresija CAT-a imala je tendenciju povećanja u mlijeku krava s mastitisom uzrokovanim bakterijom S. aureus u usporedbi s mlijekom krava koje su imale E. coli. Rezultati pokazuju da se mRNA razine antioksidacijskih gena mogu razlikovati ovisno o vrsti bakterije i da smanjena ekspresija antioksidacijskih gena može povećati prijemljivost na mastitis.
Do danas nije definirano je li apoptoza folikularnih granuloza-stanica (FGCs) posredovana prekursorom miR-let- 7b putem gena MAP3K1. U ovom je istraživanju FGC transfeciran miR-let-7b imitatorom u ...različitim dozama (0, 40, 60, 80, 100 i 120 μM) i potom razvrstan u kontrolnu skupinu (CG), te u skupine označene kao MIM-1, MIM-2, MIM-3, MIM-4 i MIM-5. Razine ekspresije mRNA i proteina miR-let-7b i mitogenom-aktivirane proteinske kinase kinase kinase1 (MAP3K1) određene su uporabom RT-PCR-a i Western blot-a. Test luciferaze je primijenjen kako bi se potvrdio ciljni odnos između miR-let-7b i MAP3K1. Rezultati su pokazali da je proliferacijska aktivnost FGC-a u skupini MIM-4 bila znakovito manja nego u kontrolnoj skupini i MIM-1 skupini (P<0,05) što ide u prilog pretpostavci da miR-let-7b imitator može u FGCs smanjiti razinu ekpresije miR-let-7b. Najveće smanjenje utvrđeno je u skupini MIM-4. Razine MAP3K1 mRNAs i proteina u skupinama MIM-3 i MIM-4 bile su niže nego u kontrolnoj skupini (P<0,05; P<0,01). Transfekcija let-7b imitatorom znakovito je inhibirala aktivnost luciferaze (P<0,05) u usporedbi s kontrolnom skupinom. Zaključno, miR-let-7b može smanjiti opstojnost stanice i ubrzati apoptozu ovčjih FGC-a. Veće doze miR-let-7b mimic (80 μM i 100 μM) mogu znakovito smanjiti ekspresiju miR-let-7b mRNAs, MAP3K1 mRNAs i proteina u ovčjih FGC-a. MiR-let-7b putem inhibirajućeg gena MAP3K1 doprinosi apoptozi folikularnih granuloza-stanica (FGCs).
Patogene vrste Leptospira uzrokuju zoonotsku bolest leptospirozu koja je raširena u cijelom svijetu. Cilj istraživanja bio je dokazati antigene koji potiču imunosni odgovor i mogu se primijeniti u ...dijagnostičkim kompletima ili za razvoj cjepiva. Vanjska proteinska membrana (OMPs) leptospira potencijalni je kandidat za tu svrhu, a gen Lipl41 je dobro očuvan među patogenim leptospirama. Ekspresija i pročišćavanje rekombinantnog proteina Lipl41 provedeno je u izolatima iz Irana. Uspoređene su sve prikupljene sekvencije proteina Lipl41 i analizirane bioinformatičkim alatom iz baze podataka NCBI. Kompletne sekvencije kodona rekombinantnog proteina Lipl41 u izolatima su optimizirane, zatim subklonirane u pET32a+ vektor i pretvorene u bakteriju Escherichia coli BL21 (DE3). Optimalna ekspresija rekombinantnog Lipl41 (47kDa) postignuta je post-indukcijski pomoću isopropyl β-d-1-thiogalactopyranoside (IPTG). Zatim je pročišćena denaturacijom što je uključilo primjenu serijskih koncentracija ureje. Rekombinantni protein je potvrđen metodom western blot. Istraživanje potvrđuje mogućnost ostvarenja dostatne količine i ekspresije pročišćenog Lip141 da se može upotrijebiti za razvoj dijagnostičkih kompleta i subjediničnih cjepiva.
Pozadina istraživanja. Posljednjih su desetljeća lakaze (p-difenol:dioksigen oksidoreduktaze; EC 1.10.3.2) privukle pažnju znanstvenika zbog raznolikosti moguće primjene u biotehnologiji i ...industriji. Lakaze mogu oksidirati različite organske i anorganske spojeve u biokatalizatore prikladne za biotehnološke procese. Iako se u industriji najčešće koriste lakaze iz plijesni, lakaze iz bakterija pokazale su veliki potencijal primjene jer djeluju na više raznih supstrata u različitim uvjetima. Svrha je ovoga rada bila opisati plazmidno kodiranu višebakrenu oksidazu sličnu lakazama iz bakterije Ochrobactrum sp. BF15, prethodno izolirane iz zagađenog tla.
Eksperimentalni pristup. Za identifikaciju novih gena za oksidazu sličnu lakazi u bakteriji Ochrobactrum sp. BF15 koristili smo in silico profil skrivenih Markovljevih modela. Da bismo okarakterizirali lakazu, proveli smo heterolognu ekspresiju gena u bakteriji Escherichia coli, pročistili enzim i mjerili njegovu aktivnost u supstratima karakterističnim za lakazu.
Rezultati i zaključci. Dobiveni profili skrivenih Markovljevih modela omogućili su identifikaciju nove oksidaze slične lakazi, koju smo nazvali Lac80. In silico analiza nove Lac80 pokazala je prisutnost triju konzerviranih domena bakrene oksidaze karakterističnih za lakaze s tri domene. Uspješno smo proveli heterolognu ekspresiju Lac80 u E. coli, čime nam je omogućeno pročišćavanje proteina za daljnju analizu aktivnosti. Od trinaest ispitanih supstrata tipičnih za lakazu, Lac80 je imao slabiju aktivnost u 2,2’-azino-bis(3-etilbenzotiazolin-6-sulfonskoj kiselini) (ABTS), pirokateholu, pirogalolu i vanilinskoj kiselini, te veću aktivnost u 2,6-dimetoksifenolu.
Novina i znanstveni doprinos. Dobiveni rezultati pokazuju da Lac80 može imati obećavajuću primjenu u industriji. U ovom je radu prikazan značaj lakaza iz bakterija te je naglašena važnost plazmida izoliranih iz okoliša kao vrijednih izvora novih gena koji kodiraju enzime za primjenu u biotehnološkim procesima.
PDF
