La macroautophagie assure l'homéostasie cellulaire en recyclant du matériel cytosolique obsolète ou délétère et sa dérégulation est associée à plusieurs pathologies. Elle constitue aussi un mécanisme ...de défense car elle peut éliminer des pathogènes intracellulaires. L'étape cruciale de l'autophagie est la maturation lors de laquelle la vésicule renfermant des substrats cytosoliques, l'autophagosome, fusionne avec des lysosomes et la dégradation a lieu. Nous nous intéressons à la régulation de l'autophagie et aux conséquences de sa perturbation lors des infections, notamment par le virus de la rougeole (VR). Les données de l'équipe montrent qu'il induit et utilise toutes les étapes de l'autophagie, afin de se répliquer efficacement. Mes travaux montrent que des protéines du virus peuvent interagir avec au moins deux protéines cellulaires NDP52 et T6BP qui sont des récepteurs autophagiques (protéines cytosoliques ayant un domaine de liaison aux autophagosomes et un domaine de liaison au substrat à dégrader, par exemple des pathogènes). J'ai alors étudié le rôle des récepteurs autophagiques T6BP, NDP52 et Optineurine dans la réplication virale. J'ai aussi participé à une étude décrivant que NDP52 et Optineurine régulent en plus la maturation. Mes travaux de thèse démontrent un tel double rôle pour T6BP. Cependant, seuls T6BP et NDP52 sont nécessaires à la réplication du VR bien qu'elle requiert la maturation autophagique. Ainsi mes résultats suggèrent d'une part que les trois récepteurs puissent réguler la maturation d'autophagosomes distincts.D'autre part, le VR pourrait exploiter individuellement les autophagosomes dont la maturation dépend de T6BP et NDP52 pour se répliquer
Macroautophagy ensures cell homeostasis through the recycling of obsolete or deleterious cytosolic components and its deregulation is associated with several pathologies. It is also a defense mechanism as it allows the elimination of intracellular pathogens. The most important autophagic step is maturation, during which the cytosolic substrate-containing vesicle, the autophagosome, fuses with lysosomes and the degradation occurs. We study autophagy regulation and the consequences of its disruption during infections and in particular by measles virus (MeV). Our team has shown that MeV induces and exploits all steps of autophagy, to replicate more efficiently. My results indicate that viral proteins can interact with at least two cellular proteins, NDP52 and T6BP, which are autophagy receptors (cytosolic proteins that carry an autophagosome-binding domain and a domain binding substrates that would be degraded, such as intracellular pathogens). I then studied the role of autophagic receptors T6BP, NDP52 and OPTINEURIN in viral replication. I also took part in a study describing NDP52 and OPTINEURIN as autophagosome maturation regulators. My work depicts the same dual role for T6BP. However, only T6BP and NDP52 are necessary for MeV replication even though it requires autophagosome maturation. Thus, my results suggest that the three autophagy receptors might regulate distinct autophagosome maturation on one hand. On the other, MeV could individually exploit autophagosomes, the maturation of which is regulated by T6BP or NDP2 to replicate efficiently
Chez la plupart des mammifères, les ovocytes sont bloqués en métaphase II au moment de l’ovulation et cette inhibition de la méiose est ensuite levée par la fécondation. Chez les chiennes et les ...autres femelles de canidés, les ovocytes sont libérés au stade de prophase I, et il faut encore attendre 48 à 72 heures pour qu’ils atteignent le stade de métaphase II et deviennent fécondables. Cette particularité constitue aujourd’hui un frein au développement des biotechnologies de la reproduction chez les canidés. En effet, dans les essais de maturation in vitro d’ovocytes canins, seuls 10 à 30% des ovocytes atteignent le stade de métaphase au bout de 72 heures de culture. Chez la chienne, la maturation nucléaire se produisant dans l’oviducte, des substituts de l’oviducte (milieux de culture comme le Synthetic Oviductal Fluid, explants d’oviductes, cultures sur tapis de cellules tubaires) ont été utilisés pour les cultures d’ovocytes in vitro, afin d’en améliorer le rendement, mais sans grand succès jusqu’à maintenant. Cet échec peut être dû au manque de données sur la composition du liquide tubaire de la chienne. L’étude de ce microenvironnement prend donc tout son intérêt, celui-ci étant probablement assez différent de celui des autres femelles, ne serait-ce que par l’existence du processus de lutéinisation préovulatoire dans cette espèce. À terme, la conception d’un milieu de maturation sur la base de la composition du liquide tubaire pourrait être une voie intéressante pour augmenter les taux de maturation in vitro.
In most mammals, oocytes are ovulated at the metaphase II stage, and the meiosis inhibition is then lifted by fertilization. In bitches and other Canidae species however, oocytes are released at the prophase I stage, and another 48 to 72h are necessary for them to mature into the metaphase II stage and become fertilizable. This specificity is currently hindering the development of reproductive biotechnologies in these species. In vitro maturation rates of canine oocytes are very low, as only 10 to 30% will reach the metaphase stage after 72h in culture. In bitches, nuclear maturation occurs in the oviduct, and tubal derivatives (culture media, such as Synthetic Oviductal Fluid, oviductal explants, coculture on tubal cell layers) were used to improve the yield, but so far not very successfully. This failure may be due to the lack of data on the composition of oviductal fluid in bitches. Further studies on the oviductal microenvironment of bitches are therefore necessary, as it is probably quite different from the oviductalmicroenvironment of other females, e. g. the presence of preovulatory luteinisation in bitches only. Creating a maturation medium based on the composition of oviductal fluid could be an interesting avenue to explore to improve in vitro maturation rates.
http://dx.doi.org/10.5902/198050985737O lenho juvenil apresenta grande diferença em suas propriedades anatômicas e físicas em relação ao lenho adulto. Essa heterogeneidade da madeira causa uma série ...de transtornos para a indústria de transformação e processamento. O presente trabalho teve como objetivo o estudo das propriedades físicas dos lenhos juvenil e adulto de Pinus elliottii Engelm var. elliottii, com 25 anos de idade, e de Eucalyptus grandis Hill ex Maiden, com 30 anos de idade, provenientes da Estação Experimental de Itapetininga e da Floresta Estadual de Santa Bárbara, pertencentes ao Instituto Florestal do Estado de São Paulo. Para tanto, de ambas as espécies, foram retirados, de tábuas radiais, corpos de prova com dimensões de 20x30x50 mm, para a determinação das massas específicas, dos inchamentos e dos coeficientes de retratibilidade dos lenhos juvenil e adulto. Os resultados das espécies mostraram que os lenhos adultos comparados com os lenhos juvenis apresentaram: (1) um aumento nos valores das massas específicas básica, a 0% e a 12% de umidade, dos inchamentos volumétricos e lineares tangencial e radial a 12% de umidade e máximos, e dos coeficientes de retratibilidade tangencial e radial; (2) uma redução nos valores de inchamentos lineares longitudinais a 12% de umidade e máximos, e do coeficiente de retratibilidade longitudinal.
La pathogénèse de désordres psychiatriques comme les troubles de l'humeur et la schizophrénie met en jeu des facteurs génétiques et environnementaux. La reelin, une protéine de la matrice ...extracellulaire et l'isolement social (IS), un stress environnemental participeraient à l'étiologie de ces maladies. Le cortex préfrontal (CPF) impliqué dans les fonctions cognitives et exécutives, présente des anomalies morpho-fonctionnelles chez les patients atteints de ces troubles. Le but de ma thèse est d'étudier l'effet de l'IS et d'une haplo-insuffisance en reelin (HIR) sur les propriétés du CPF adulte. Nous utilisons des souris hétérozygotes reelin et sauvages soumises à l'IS et procédons à une analyse électrophysiologique, morphologique et comportementale. Nos résultats montrent que l'IS induit des défauts de transmission et de plasticité synaptique et du comportement. Nous avons également montré que l'HIR aggrave ces défauts. Finalement, nous avons exploré une piste thérapeutique prometteuse.
The pathogenesis of psychiatric disorders such as mood disorders and schizophrenia involves genetic and environmental factors. The reelin, a protein of the extracellular matrix and social isolation (SI), an environmental stress participate in the etiology of these diseases. The prefrontal cortex (PFC) involved in cognitive and executive functions, exhibits morpho-functional abnormalities in patients with these disorders. The purpose of my thesis is to study the effect of the SI and a haploinsufficiency in reelin (HIR) on the properties of the adult PFC. We used wild mice and reelin heterozygous mice that underwent and proceed to electrophysiological, morphological and behavioral analyses. Our results show that the SI altered synaptic transmission and plasticity and behavior. We also showed that the HIR aggravates these alterations. Finally, we explored a promising therapy.
Dans une démarche d’éco-innovation, les entreprises cherchent à inventer et mettre en oeuvre de nouvelles activités plus durables parfois en rupture avec leurs pratiques existantes, et qui entraînent ...des changements plus ou moins importants au sein de leurs offres, de leur business model, et parfois sur l’ensemble de leurs écosystèmes. Confrontée à de tels enjeux et des dynamiques associées souvent complexes de par leur nature parfois techniques, économiques, sociales, juridiques, politiques…, l’entreprise et les parties prenantes du projet en émergence semblent ne pas toujours réussir à suffisamment s’écarter consciemment des cadres cognitifs existants pour explorer des alternatives en adéquation avec les ambitions initiales d’un projet d’éco-innovation. Ainsi, les trajectoires empruntées par ces projets sont susceptibles d’entrainer par exemple une dilution des valeurs environnementales et sociales ou de provoquer l’abandon de projets par un manque de considération des dimensions techniques ou économiques.Les travaux présentés ici portent sur la phase de maturation des concepts éco-innovants et cherchent à développer des modalités d’accompagnement pour éviter ou surpasser de telles situations dites de « fixation collective ».L’approche méthodologique repose sur une recherche-action effectuée au sein de l’organisme d’accompagnement Apesa structurée en deux étapes :- L’analyse de trois cas de projets d’éco-innovation nous a d’abord permis de caractériser la problématique des pratiques d’accompagnement et plus précisément les fixations collectives présentes lors de la maturation des concepts.- Cette première étude a alimenté la démarche de conception mise en oeuvre pour élaborer la méthode MIRAS, l’apport principal de notre recherche.La méthode MIRAS propose un panel d’outils d’animation destinés aux acteurs de l’accompagnement pour aider les groupes projets lors des phases de maturation de leur concept et de leur potentiel de soutenabilité en visant un certain équilibre du triptyque économique – environnemental – social). Dans cette optique, MIRAS vise à adopter une pensée systémique, qui ne soit pas centrée seulement sur l’entreprise mais qui reconsidère l’ensemble des dimensions du « réseau élargi des parties prenantes ».
During the development of eco-innovations, companies are looking to implement a new activity that can create ruptures with its existing practices and cause many changes in their business model. In such complex situations, the stakeholders of emerging projects have some difficulties to consciously deviate from existing cognitive frameworks to explore alternatives in line with the initial goals of the project. Thus, they take trajectories that may lead to a dilution of the environmental and social values or cause the abandonment of projects. The work presented here focuses on the maturation of eco-innovative concepts and seeks to develop tools and methods to avoid and overcome such situations called collective fixations.The methodological approach is based on an action research conducted in the organization Apesa and structured in two steps:- The analysis of three case-studies of eco-innovative projects allowed us to characterize supporting practices and deepen our knowledge on the collective fixation present during the maturation of concepts.- This first study has fueled the design process of the MIRAS method, the main contribution of our research.The MIRAS method offers a toolkit designed for eco-innovation intermediaries in order to help them to structure their intervention during the stage of concept maturation. Specifically the tools help to improve the sustainability potential of concepts, to analyze project group behaviors during sessions and to revisit stakeholder networks so as to anticipate future mutations and news ways of incubation.
La tendencia a la concentración de flujos económicos y humanos en las principales aglomeraciones ha generado unos polos de atracción global en detrimento de las opciones de desarrollo del resto de ...territorios. Sin embargo la recomposición territorial está siendo más compleja y afecta también al territorio no metropolitano. La introducción de elementos de creatividad en las economías urbanas es un ejemplo de la relativa dispersión territorial de nuevas actividades productivas. La localización de actividades económicas creativas ha sido analizada para el caso de ciudades medias, periferias urbanas y espacios rurales, pero no para el de ciudades turísticas.El objetivo del trabajo es analizar, a escala local y partiendo del cálculo de un índice sintético de creatividad, el comportamiento de dicho índice y en qué medida la clase creativa se localiza en los destinos turísticos del mediterráneo español y las Islas Canarias en comparación con otros tipos de ciudades y entre ciudades turísticas según su especialización productiva. Los resultados obtenidos permiten formular la hipótesis sobre cómo contribuyen los espacios turísticos a la reorganización productiva del territorio y valorar sus posibilidades de competitividad basadas en la mejora de la tolerancia, la innovación y el emprendimiento, proporcionando oportunidades de desarrollo más integrales y diversificadas en el momento de crisis actual.
Durant ce processus central qu’est la biogenèse des ARNm, la formation de la queue polyA est une étape clé impliquant de nombreuses activités enzymatiques et complexe protéiques. CF IA (Facteur de ...Clivage 1A) est un complexe macromoléculaire essentiel pour les deux étapes de clivage et de polyadénylation durant la formation de la queue poly(A) à l’extrémité 3’ de l’ARNm de levure. Constitué par les protéines RNA14, RNA15, Pcf11 et CLP1 dans une stœchiométrie supposée 2:2:1:1. Cependant, contrairement au complexe CPF (Facteur de Clivage et de Polyadénylation) qui porte les activités de clivage et de polyadénylation, aucune activité enzymatique n’a pu être associé au CF IA, suggérant un rôle d’architecture via d’une part la liaison à l’ARN et à d’autres complexes d’autre part. Dans ce travail, j’ai pu combiner les données obtenues par différentes approches biophysiques pour apporter des précisions sur l’organisation structurale au sein du CF IA mais également étudier l’importance biologique de certains motifs spécifiques.
During this major process which is mRNA biogenesis, the formation of the polyA tail is a key step involving numerous enzymatic activities and protein complex. CF IA (Cleavage Factor IA) is a macromolecular complex essential for both cleavage and polyadenylation steps during the formation of the 3'-end poly(A) tail of the yeast mRNA. Composed by RNA14, RNA15, Pcf11 and CLP1 yeast proteins in an assumed stochiometry of 2:2:1:1. However, unlike CPF (Cleavage and Polyadenylation Factor) complex hosting the both cleavage and polyadenylation activities, no enzymatic activity has been associated to CF IA, suggesting a scaffolding and/or positioning activity through the binding on the one hand to the RNA and on the other hand to other complexes. In this work, I was able to cross-use different biophysical technics to get insights on the structural organization within the CF IA as well as studying the biological importance of some specifics sequences.
Pêssegos 'Chimarrita' e 'Chiripá' foram colhidos nas safras de 2000 e 2001, nos estádios de maturação de vez e maduro e armazenados a 0 ºC e 90% de umidade relativa. Os pêssegos 'Chiripá' ...permaneceram armazenados sob refrigeração por 10 ou 20 dias em 2000 e por 7, 14 ou 21 dias em 2001, enquanto os pêssegos 'Chimarrita' foram conservados em câmara frigorífica nas duas safras por 10, 20 ou 30 dias. Amostras de pêssegos foram avaliadas na colheita, em cada saída de armazenagem refrigerada e após 2 ou 3 dias de amadurecimento a 20 ºC. As perdas de massa fresca não foram afetadas pelo estádio de maturação nas duas cultivares. Em pêssegos com mais de 5% de perdas de peso após amadurecimento, observou-se enrugamento na região do ombro do fruto. Em 2001, a ocorrência de podridões foi maior nos pêssegos 'Chimarrita' colhidos maduros depois de transferidos a 20 °C. A firmeza da polpa diminuiu continuamente durante a armazenagem, principalmente nos frutos maduros. A firmeza dos pêssegos colhidos no estádio de vez foi significativamente maior que a dos pêssegos colhidos no estádio maduro enquanto sob refrigeração, mas após a transferência para 20 °C ela decresceu aos mesmos valores obtidos para os pêssegos colhidos mais maduros. Em 2001, após 30 dias sob refrigeração, observou-se lanosidade nos pêssegos 'Chimarrita' de ambos os estádios de maturação, enquanto apenas nos pêssegos 'Chiripá' de vez ocorreu lanosidade ao término da armazenagem refrigerada.
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