Cefpirom je cefalosporin četvrte generacije lijekova sa širokim spektrom djelovanja protiv gram-pozitivnih i
gram-negativnih mikroorganizama. Istraživanje farmakokinetike pojedinačne doze ...cefpirom-sulfata, primijenjene
intravenski (iv.) i intramuskularno (im.) (10 mg/kg tjelesne mase), provedeno je tekućinskom kromatografijom visoke
djelotvornosti (HPLC) te su utvrđeni pokazatelji za optimalan režim doziranja u ovaca. Nakon intravenske primjene
cefpiroma u ovaca prosječna vrijednost konstante brzine eliminacije (β) bila je 0,43 ± 0,04 h-1, poluvijek eliminacije
(t½β) 1,68 ± 0,21 h, područje ispod krivulje odnosa koncentracije u plazmi i vremena (AUC0-∞) 82,71 ± 3,76 mg.h/
mL, područje ispod krivulje prvog momenta koncentracije u plazmi (AUMC) 211,06 ± 23,99 mg.h2/mL. Nadalje,
srednja vrijednost vremena zadržavanja (MRT) bila je 2,51 ± 0,19 h, prividni volumen distribucije (Vdarea) 0,28 ±
0,03 L/kg i ukupni tjelesni klirens (ClB) 0,11 ± 0,00 L/h/kg. Srednje vrijednosti tijekom intramuskularne primjene
cefpiroma za prethodno navedene parametre bile 0,33 ± 0,01 h-1, 2,04 ± 0,06 h, 73,27 ± 4,04 mg.h/mL, 229,02 ± 20,32
mg.h2/mL, 3,09 ± 0,12 h, 0,45 ± 0,03 L/kg i 0,14 ± 0,01 L/h/kg. Bioraspoloživost nakon intramuskularne primjene
cefpiroma bila je 88,85 ± 4,07 %. Koncentracija cefpiroma u plazmi održavana je iznad ciljne vrijednosti MIK-a (≥
0,25 mg/mL) tijekom 12 sati. Terapijski režim doziranja izračunat na temelju farmakokinetičkih pokazatelja dobivenih
intravenskom primjenom lijeka upućuje na optimalnu dozu cefpiroma kojom se može održati MIK pri vrijednosti ≥
0,25 μg/mL s intervalom doziranja od 12 sati, a ta bi doza u ovaca bila 13,00 mg/kg tjelesne mase.
Cilj istraživanja bio je otkriti prisutnost infekcija virusom maedi visna (MVV) kod ovaca u tri županije u jugozapadnoj Hrvatskoj - Istarskoj, Primorsko-goranskoj i Ličko-senjskoj te procijeniti ...utjecaj geografske lokacije, pasmine, dobi i spola kao čimbenike rizika za stopu prevalencije. Ukupno je pregledano 460 nasumično odabranih ovaca postupkom ELISE ID Screen® MVV/CAEV indirektnog testa VISNAS-5P za otkrivanje protutijela protiv virusa maedi-visna. Stopa prevalencije za cijelu populaciju iznosila je 10,00% (CI 95% 7,26 - 12,74%). Najveća seroprevalencija MVV utvrđena je u Istarskoj županiji (19,02%, CI 95% 13,35–24,70%), zatim u Ličko-senjskoj županija (5,43%, CI 95% 2,17-8,70) i Primorsko-goranska županija (1,07%, CI 95% -1,03 - 3,17) (P<0,01). Usporedbom seroprevalencije između pasmina uočene su statistički znakovite razlike. Najveći broj pozitivnih ovaca nađen je kod istarske ovce (22,97%, CI 95% 13,39 - 32,55%), zatim jezersko-solčavske ovce (23,53%, CI 95% 11,89 - 35,17 %%), pramenke (13,16% , CI 95% 2,41 - 23,91%) i ličke pramenke (9,78%, CI 95% 3,71 - 15,85%). Stopa prevalencije u ostalih istraženih pasmina (krčka ovca, paška ovca i romanovska ovca) bila je niža od 2% (P<0,01). Statistički znakovite razlike u seroprevalenciji prema spola i dobi nisu ustanovljene. Kao glavni čimbenici rizika utvrđeni su zemljopisni položaj i pasmina. U Istarskoj županiji seroprevalencija je bila 4,77 (CI 95% 2,67 - 8,54) puta veća nego u ostalim istraženim područjima (OR = 5,66, CI 95% 2,97-10,79) (P<0,01). Uočene su znakovite razlike između jezerskosolčavske ovce i ličke pramenke (OR = 2,84, CI 95% 1,13-7,14) te istarske ovce u odnosu na pašku ovcu (OR 22,51 , CI 95% 16,99-119,73), krčku ovcu (OR 19,53, CI 95% 5,80-108,27) i ličku pramenku (OR 2,35, CI 95% 1,17-6,47). Rad predstavlja prvo istraživanje seroprevalencije i rizičnih čimbenika za MVV ovaca u jugozapadnoj Hrvatskoj. Rezultati ukazuje na prisutnost MVV infekcije te na važnost daljnjeg istraživanja bolesti u Hrvatskoj.
Reproduktivna procjena, odabir pojedinačnih rasplodnih mužjaka i reproduktivne biotehnologije važni su alati u unaprjeđenju produktivnih i reproduktivnih stopa. Pri odabiru mužjaka za rasplod, ...potrebno je određivanje općeg zdravstvenog statusa te genotipske i fenotipske superiornosti. Ovaj rad procjenjuje konvencionalnu i funkcionalnu kvalitetu sjemena u ovnova. Sjeme jedanaest ovnova različitih čistokrvnih pasmina prikupljeno je elektroejakulacijom. Zamijećene su sljedeće prosječne vrijednosti za svaki konvencionalni parametar: opseg skrotuma (CE, 34,3 cm), volumen sjemena (vol, 1,63 mL), koncentracija (C, 768,4 x 106/mL), pojedinačna pokretljivost (MI, 80 %), ukupna pokretljivost (MM, 4) i vitalnost (Vi, 3,7). S druge strane, funkcionalna analiza pokazala je integritet stanične membrane (PMI) od 45,7 %, potencijal mitohondrijske membrane (MMP) od 38,5 %, indeks fragmentacije DNK (DFI) od 17,0%, lipoperoksidaciju membrane (LPO) od 32,7 % i proizvodnju reaktivnih kisikovih spojeva (ROS) od 28,56 %. Uz to je otkrivena i visoka i pozitivna korelacija za varijable o kvaliteti sjemena: Vi i MM, Vi i MI, MMP i MM, MMP i MI, PMI i MMP, kao i ROS i MMP. Suprotno tome, dobivene su dvije vrlo negativne korelacije (C nasuprot Vol i LPO nasuprot CE). To su prve procjene ocjenjivanja funkcionalne kvalitete sjemena ovaca u Kolumbiji. Uz to, ova studija osigurava početnu vrijednost za sve konvencionalne i funkcionalne parametre sjemena u regiji.
Cilj ovoga rada bio je utvrditi mogućnost korištenja graška kao alternativnog izvora bjelančevina u obrocima ovaca i janjadi u ekološkoj proizvodnji. Grašak (Pisum sativum L.) se u obrocima ovaca i ...janjadi najčešće koristi kao zrno, a rjeđe kao slama. Osobito je njegova primjena raširena u zemljama mediteranskog područja s obzirom na povoljne klimatske uvjete, sve veću cijenu koštanja soje, kontaminiranost soje, zabranu korištenja genetski modificirane soje u obrocima životinja u ekološkim uzgojima, kao i zabranu korištenja mesnog brašna kao izvora bjelančevina u obrocima za životinje. Brojna istraživanja ukazuju na opravdanost korištenja graška u hranidbi ovaca i janjadi s obzirom na njegovu visoku hranidbenu vrijednost zbog obilja bjelančevina (22-34%), dobre izbalansiranosti esencijalnih aminokiselina i nezasićenih masnih kiselina te visokog sadržaja škroba (preko 40% suhe tvari). Sadržaj antinutritivnih tvari u suvremenih kultivara graška je zanemariv u odnosu na prijašnje kultivare te je moguće njegovo korištenje u obrocima ovaca i janjadi i bez primjene toplinskih tretmana. Pri balansiranju obroka čiji se izvor bjelančevina temelji na grašku najčešće se kao žitarica koristi ječam s obzirom na različitu brzinu razgradnje navedenih krmiva. Analizirajući proizvodna svojstva i kvalitetu dobivenih proizvoda ovaca i janjadi (dnevni prirasti, količina i kvaliteta mlijeka, klaonička kvaliteta janjećih trupova i kvaliteta mesa) u brojnim je istraživanjima potvrđena opravdana uporaba graška kao izvora bjelančevina u njihovim obrocima kao potpuna ili djelomična zamjena za soju. Navedene spoznaje bi trebalo proširiti dodatnim istraživanjima vezanim za utvrđivanje odgovarajućeg udjela graška u obrocima ovaca i janjadi u ekološkoj proizvodnji s obzirom na njihova proizvodna svojstva i kvalitetu dobivenih proizvoda.
Cilj ovog istraživanja bio je utvrditi utjecaj dodatka selena (organskog, anorganskog) u obrocima kasno gravidnih ovaca i ovaca u laktaciji na pokazatelje acidobazne ravnoteže. Istraživanje je ...provedeno na 30 gravidnih ovaca Merinolandschaf pasmine. Ovce su podijeljene u tri skupine po 10 životinja. Istraživanje je počelo u jesen, odabirom kasno gravidnih ovaca (90. dan gravidnosti) s jednim janjetom i nastavljeno tijekom proljeća sljedeće godine s istim ovcama nakon janjenja u laktaciji. Krmna smjesa kontrolne skupine ovaca (skupina I) bila je bez dodatka selena, krmna smjesa druge skupine ovaca (skupina II) bila je obogaćena dodatkom 0,3 mg/kg organskog selena, a krmna smjesa treće skupine ovaca (skupina III) bila je obogaćena dodatkom 0,3 mg/kg anorganskog selena. U krvi visoko gravidnih ovaca i ovaca u laktaciji utvrđeni su sljedeći pokazatelji: pH, plinovi (pCO2, pO2), elektroliti (Ca, Na+, K+, Cl- i HCO3-), te izračunata z - vrijednost, BEfw, BECl -, BEalb, anionski procijep (AG) i jaka ionska razlika (SID). Većina pokazatelja acidobazne ravnoteže u sve tri skupine bila je unutar referentnih vrijednosti, a dodatak selena, posebno anorganskog oblika u obrocima ovaca pomaknuo je njihove vrijednosti prema referentnim i izbjegao acido-baznu neravnotežu i povezane poremećaje, koji mogu uzrokovati smanjenu produktivnost i ekonomske rezultate. Utvrđeni pokazatelji acido bazne ravnoteže znak su odgovarajuće hranidbe ovaca i njihove pravovremene i dobre prilagodbe u zahtjevnim reprodukcijskim stanjima.
Istraživanje je imalo za cilj identificirati sezonske i dobne varijacije triglicerida (TRI), paraoksonaze (PON), stimulirane paraoksonaze PON (PON I) i kolesterola (CHOL) kod ekstenzivno držanih ...ovaca pasmine lička pramenka. Iz Karlovačke županije u Hrvatskoj, nasumično je odabrano 30 ekstenzivno uzgajanih, negravidnih ličkih pramenki, raspoređenih u tri dobne skupine. Krv je uzorkovana iz jugularne vene, dva puta u jednoj godini – prvo uzorkovanje obavljeno je u proljeće (travanj), a drugo ujesen (listopad). Rezultati pokazuju da dob ovaca nije znakovito utjecala ni na jedan istraživani pokazatelj, dok je sezonalnost znakovito utjecala na pet od šest analiziranih pokazatelja. Znakovito viša razina lipida i lipidnih spojeva u serumu ujesen može se objasniti utjecajem tradicionalnog načina uzgoja i hranjenja ovaca pasmine lička pramenka. Nadalje rezultati PON I u svim trima dobnim skupinama potvrđuju da su ovce dobro prilagođene okolišu i sustavu u kojem se drže. Buduća istraživanja trebala bi se provesti na većem broju uzgoja/farmi i trebala bi uključiti više ovaca kako bi se objektivno ustanovile referentne vrijednosti serumskih lipida i enzima povezanih s tim lipidima.
Cilj ove studije bio je pratiti i procijeniti rezultate sanitarne i veterinarske inspekcije zaklanih ovaca u Poljskoj u razdoblju 2017. - 2019. godine. Više od 175 000 ovaca je zaklano u Poljskoj u ...tom razdoblju. Obdukcijska veterinarska inspekcija otkrila je simptome i/ili lezije u 19 799 životinja, što predstavlja 11,30 % svih pregledanih ovaca. 134 zaklane životinje smatrane su neprikladnima za konzumaciju (0,08 %). Najbrojniji su bili slučajevi s gnojnim žarištima, kontaminacijom i kongestijom (5,07 %) i fasciolozom (4,72 %). Najveći broj gnojnih žarišta, kontaminacije i kongestije u lešina ovaca pronađen je u Małopolskie i Podlaskie vojvodstvima. Najviše slučajeva koji su smatrani neprikladnima za konzumaciju pronađeno je u Podkarpackie (30), Świętokrzyskie (29) i Podlaskie (23) vojvodstvima, što je predstavljalo više od 61 % svih lešina ovaca proglašenih neprikladnima za konzumaciju u razdoblju 2017.-2019. godine u Poljskoj.
In clinical pathology of sheep, parasitic infections occupy a significant place and besides health, pose a great economic problem in sheep breeding. Sheep are highly susceptible to parasitic ...infections, even under conditions of very low pasture infections. In this way, sheep support the sustainability and amplification of parasitic fauna intensity in an epizootiological region and may at the same time serve as “indicators” of animal species with the aim of evaluating the presence of parasitic fauna in a specific region. The evaluation of parasitic infection intensity in the host is of special significance, primarily for the therapeutic measures necessary to be taken, but also, represents an essential criterion employed in selecting more resistant individuals. The presence of parasites and their developing forms during migration, leads to health disturbances in the animals, when the degree of damage is in direct correlation with the number of parasites present and/or their larval forms, ie. with the intensity of parasitic infection. Free radical species originating during parasitic infections, directly inhibit some of the antioxidative enzymes. Changes on these enzymes and their inhibition have an influence on the protective capacity from oxidative damages and a relative participation of certain components in the total antioxidative potential. For this reason, the hypothesis has been established that the analysis of these changes may serve as a diagnostic tool with the aim of determining the intensity of parasitic infection. SOD (EC 1.15.1.1) presents the first line of defense under conditions of disturbed redox balance, as they prevent the formation of a series of very harmful reactive oxygen and nitrogen species (hydroxyl radicals and peroxynitrites) and the initiation of oxidative chain reactions, which as an outcome are significant damages to biomolecules (lipids, proteins and nucleic acids). A known “paradox” is that SOD 1 is irreversably inactivated at high concentrations of hydrogen peroxide, which is a product of the reaction catalyzed by this enzyme. Considering the previously elaborated fact that parasitic infections lead the organism of the host into oxidative stress, the aim of this doctoral thesis was to more precisely investigate changes in the isoenzymatic profile of SOD 1 in sheep and examine if these may serve as biomarkers for the intensity of parasitic infection. The study was performed on a total of 300 sheep (aged 12 to 18 months), on strains of autochtonous Zackel sheep breed (Sjenicko-pešterska, Lipska and Vlaška vitoroga) which are included in the programme for conserving animal genetic resources in the Republic of Serbia as well as on imported breeds of sheep (Würtemberg, Ile de France and Charollais) kept under semi intensive conditions in four regions. Within each investigated breed/strain, a control group of sheep was established (n=10), negative to parasitic infection. Sampling of feces for parasitological and blood for biochemical assaying was performed during the course of three days , in the morning and in the evening. The distribution of parasites in sheep was evaluated using the native smear corpological technique, by sedimentation and flotation methods. The degree of infection intensity per sheep was quantitatively established by the method of McMaster (modified by Zajicek). The oxidative stress parameters were measured for catalase activity (CAT), the red cell membrane damage by level of malondialdehyde (MDA), while carbonyl and thiol plasma protein group concentrations were used as indicators of the degree of protein oxidative modification. The activity of Cu,Zn - superoxide dismutase (SOD 1) and relative distribution of lactate dehydrogenase (LDH1-LDH5) activity were determined electrophoretically. In the studied regions, in the strains of autochtonous Zackel sheep breed and imported breeds of sheep, parasitic infections were detected as follows: Trichostrongylidae, Nematodirinae, Protostrongylidae, Trichuris spp. Strongyloides spp. Anoplocephalidae, Dicrocoelium dendriticum and Eimeria spp. Coprological examinations revealed various extensities and intensities of parasitic infections in the strains of autochtonous Zackel sheep breed as well in the imported breeds in the regions studied. In the strains of autochtonous Zackel sheep breed, lower extensities and intensities of parasitic infections were determined (p<0.05). The level of oxidative stress in autochtonous strains of Zackel and imported sheep breeds is different depending on the extensity and intensity of parasitic infection. It has been determined that the oxidative modifications of proteins from imported breeds are more expressed under same extensity and intensity of parasitic infection when compared with the autochtonous Zackel sheep strains (p<0.01). It has been determined that the basal level of cell membrane lipid peroxidation is higher in the control group of imported sheep breeds when compared with the autochtonous Zackel strains (p<0.001). In the presence of parasitic infection, both in the autochtonous Zackel strains and imported sheep breeds, results in oxidative modification of lipids, this being more expressed in the imported sheep breeds (p<0.05). The total SOD 1 activity is higher in strains of the autochtonous Zackel breed when compared to the imported sheep breeds (p<0.05), this confirming the stronger response of Zackel strains to oxidative stress provoked by parasitic infection. With the increase of parasite infection intensity, the total activity of SOD 1 enzyme increases in the strains of the autochtonous Zackel breed as well as in the imported breeds. Catalase activity is reduced with the increase in parasite infection intensity, in all studied breeds, strains of the autochtonous Zackel breed and imported sheep breeds (p<0.05). On the basis of the relative isoenzyme distribution of the lactate-dehydrogenase (LDH) enzyme, damages to cells from various organs were determined, this being dependent on the presence of the species and intensity of parasitic infection. In the studied strains of the autochtonous Zackel and imported sheep breeds infected with Strongyloides spp, Dicrocoelium dendriticum and Protostrongylidae, damages to the cells of the miocard (LDH2 ) and lung (LDH3) were determined. In the presence of parasitic infections with Strongyloides spp, Trichuris spp and Dicrocoelium dendriticum damage to liver cells has been detected (LDH5). Depending on the intensity of parasitic infection, production of RNS increases in strains of the autochtonous Zackel breed as well as in the imported sheep breeds. In the imported sheep breeds, the level of nitrosative stress is more intense when compared to the Zackel strains (p<0.001). Applying SDS-PAG electrophoresis and HPLC/MS, the molecular mass of the sheep SOD 1 was determined more precise, 31.84 kDa and 29.5 kDa. By isoelectrofocusing, the isoelectric point of sheep SOD 1 was determined to be 6.42. In in vitro experiments, during exposure of SOD 1 to the action of hydrogen peroxide, a 50% activity inhibition of this enzyme was proven. The degree of activity inhibition of this enzyme depended on the exposure time and applied concentration of hydrogen peroxide. With electrophoretic analyses, it has been determined that exposure of SOD 1 to hydrogen peroxide leads to the dimerization and fragmentation of this enzyme and formation of 6 protein bands with molecular weights of: 63.5 kDa, 31.84 kDa, 26.91 kDa, 21.97 kDa, 15 kDa and 13 kDa. By GC/MS analysis, it was determined that hydrogen peroxide leads to the carbonylation of SOD 1 (m/z 881.91 and m/z 909.42) and irreversible oxidation of the enzyme thiol groups (m/z 938.65 and m/z 969.96). By isoelectrofocusing, also the presence of SOD 1 with an isoelectric point of 5.0 has been determined, which was the consequence of the oxidative modifications of this enzyme. With the aid of spectral electron paramagnetic resonance, in in vitro experiments, for the first time, the formation of the nitrogen dioxide radical was proven as a consequence of SOD 1 oxidative modification. It has been determined that isoenzymatic forms of SOD 1 may be used as biomarkers for evaluating the intensities of parasitic infections in sheep. Depending on the intensity of the parasitic infection and the consequences of oxidative modifications, changes in isoenzymatic forms of SOD 1 appear.
U kliničkoj patologiji ovaca parazitske infekcije zauzimaju značajno mesto i pored zdravstvenog, predstavljaju i veliki ekonomski problem u uzgoju ovaca. Ovce su visoko prijemčive na infekciju parazitima, čak i u uslovima vrlo niske infekcije pašnjaka. Na taj način, ovce omogućavaju održavanje i amplifikaciju intenziteta parazitske faune u jednom epizootiološkom području i istovremeno mogu poslužiti kao „indikator“ vrsta životinja u cilju procene prisutne parazitske faune u nekom području. Procena intenziteta parazitske infekcije u domaćinu je od posebnog značaja, pre svega zbog terapijskih mera koje treba preduzeti, ali takođe, predstavlja i bitan kriterijum koji se koristi u selekciji otpornijih jedinki. Prisustvo parazita i njihovih razvojnih oblika u toku migracije dovodi do poremećaja zdravstvenog stanja životinja, pri čemu je stepen oštećenja u direktnoj korelaciji sa brojem prisutnih parazita i/ili njihovih larvenih oblika, tj. sa intenzitetom parazitske infekcije. Slobodnoradikalske vrste nastale u toku parazitskih infekcija direktno inhibiraju neke od antioksidativnih enzima. Promene na ovim enzimima i njihova inhibicija utiču na kapacitet zaštite od oksidacionih oštećenja i relativni udeo pojedinih komponenti u ukupnom antioksidativnom potencijalu. Iz tog razloga postavljena je hipoteza da analiza ovih promena može da posluži kao dijagnostičko sredstvo u cilju utvrđivanja intenziteta parazitske infekcije. Superoksid dizmutaze (SOD) (EC 1.15.1.1) predstavljaju prvu liniju odbrane u uslovima narušene redoks ravnoteže, jer sprečavaju f