Provider: - Institution: - Data provided by Europeana Collections- ES La detección temprana de enfermedades muchas veces se basa en la medición de una o varias proteínas y/o en el análisis genético. ...El formato microarray es un buen candidato para aplicarlo a los dispositivos de detección porque posee una gran capacidad de trabajo y poco consumo de reactivos y muestra. Sin embargo existen otras aproximaciones para el desarrollo de dispositivos PoC también interesantes, como son las tecnologías basadas en nanobiosensado óptico. En ambos formatos la inmovilización del receptor es crucial en las prestaciones del ensayo final. Tradicionalmente, la inmovilización covalente ha sido la mejor considerada, por su robustez y fiabilidad. En este trabajo se propone el estudio de métodos de inmovilización, en soportes planos y en formato microarray, de fragmentos Fab de anticuerpos (previamente generados y purificados) mediante el empleo de reacciones, inducidas por luz basadas en click-chemistry. El trabajo plantea como objetivos la funcionalización y caracterización de las superficies, el desarrollo de la metodología de escisión de los anticuerpos, y el estudio de distintas aproximaciones de anclaje de Fabs inducidas por luz y de su biodisponibilidad una vez inmovilizados. El objetivo final será su aplicación a la detección de marcadores cardíacos (CRP, troponina, etc¿) utilizando un transductor basado en nanosensado óptico.- EN This project is framed in the European Project PHOCNOSIS (H2020-PHC-634013), which aims the development of a point-of-care (POC) analytical device. It is based in many nanotechnology novel concepts, for its application in the early diagnosis of cardiovascular diseases. The diagnosis will be carried out by means of the fast (<10 minutes), ultra-sensitive (<1 ng/L) and label-free detection of multiple cardiac biomarkers, using a small volume of whole blood (<100 μL). To achieve this goal, one of the main steps is the development of suitable methods for the immobilization of specific receptors (antibodies) for the targeted cardiac biomarkers. This immobilization must be oriented and selective in the sensor areas of the chip, and although it must allow that the biorecognition takes place as close as possible to the surface. The assignment presents the anchorage methodology improvement of the bioreceptors to the material that establish the nanophotonic-based device. These approaches are based in the photoimmbilization using click-chemistry reactions (thiol-ene reactions). The whole work was done using a fluorescence microarray methodologies and two model systems. In this way, the first biosensor is based on BSA (bovine serum albumin)-αBSA system as polyclonal antibody model. Many parameters have been optimized as the antibody fragment to be anchored, the irradiation time and the detection method. According to project’s goal, many similar experiments have been performed with the monoclonal system CRP (C-reactive protein)-αCRP, as in the final device the bioreceptors will be monoclonal antybodies.- All metadata published by Europeana are available free of restriction under the Creative Commons CC0 1.0 Universal Public Domain Dedication. However, Europeana requests that you actively acknowledge and give attribution to all metadata sources including Europeana
Provider: - Institution: - Data provided by Europeana Collections- EN This work has been carried out within the framework of the European project SAPHELY (H2020-ICT-644242) which aims to develop a ...point of care device (POC) that allows early diagnosis of different diseases through ultrasensitive detection of microRNA (miRNA). In this case, it is aimed to detect miRNA-155, marker of colon and breast cancer. The system is based on a nanophotonic sensor with waveguides make out of SOI (silicon on insulator), on which the changes in optical signal is related to the mass that is present on the surface. So as to ensure the specificity molecular beacons (MB) are employed, that change their conformation when hybridizing with their complementary chain. These MBs are coupled with nanoparticles (NPs) with high refraction index, so the change in optical signal is higher. Thus, it is raised the study and characterization of the attachment of MBs to a solid support and their response to hybridization with their complementary chain when whether they have NPs coupled to them. With this goal, essays in microarray format and quartz crystal microbalance (QCM) are performed. The covalent immobilization of MBs in the surface is carried out by means of thiol-ene coupling (TEC) reaction, which is regioselective, biocompatible and high yield reaction. The materials employed (glass in microarray format and silicon oxide in QCM) allow an easy translation of the results to the nanophotonic system. Th studies carried out in this TFG demonstrate that the conformational changes that the attached MBs greatly depend on whether the MBs is coupled with a NP, protein or free, and that they do not present the behaviour that initially was expected. On the other hand, the developments performed in microarray format have allowed to corroborate the correct immobilization of the MBs and their capacity to hybridize once there are attached.- ES Este trabajo se ha realizado en el marco del proyecto europeo SAPHELY (H2020-ICT-644242), que pretende desarrollar un dispositivo de tipo point-of-care (POC) que permita un diagnóstico temprano de diferentes enfermedades mediante la detección ultrasensible de microRNA (miRNA). En este caso se quiere detectar miRNA-155, marcador de cáncer de colon y de mama. El sistema está basado en un sensor nanofotónico de guías de onda de SOI (silicon on insulator), en las que los cambios en la señal óptica transmitida están relacionados con la masa que se sitúa en la superficie. Para garantizar la especificidad de emplean molecular beacons (MB), que cambian de conformación al hibridar con la cadena complementaria. Estos MBs están acoplados a nanopartículas (NPs) con alto índice de refracción, por lo que el cambio en la señal óptica registrado es mayor. Así se plantea estudiar y caracterizar el anclaje de MBs a un soporte sólido y conocer su respuesta frente a la hibridación con su cadena complementaria cuando tienen acopladas o no NPs. Con este objetivo se realizan ensayos en formato microarray y en la microbalanza de cristal cuarzo (QCM). La inmovilización covalente de MBs sobre la superficie es llevada a cabo mediante la reacción de acoplamiento tiol-eno, que es regioselectiva, biocompatible y con alto rendimiento. Los materiales empleados (vidrio en formato microarray y óxido de silicio en chips de la QCM) permiten trasladar fácilmente los resultados obtenidos al sistema nanofotónico. Los estudios llevados a cabo en este TFG demuestran que los cambios conformacionales en los MBs anclados dependen en gran medida de si el MB está unido a una NP, a una proteína, o libre, y que no presentan el comportamiento que inicialmente se esperaba en ellos. Por otro lado, los desarrollos realizados en formato microarray han permitido corroborar la correcta inmovilización de los MBs y su capacidad para hibridar una vez anclados.- All metadata published by Europeana are available free of restriction under the Creative Commons CC0 1.0 Universal Public Domain Dedication. However, Europeana requests that you actively acknowledge and give attribution to all metadata sources including Europeana
Une methode HPLC rapide et sensible a ete mise au point pour le dosage simultane de l'acide ascorbique (AA), du glutathion (GSH) et de la cysteine (CSH) en vue de l'appliquer aux pates de farine de ...ble. La detection electrochimique utilisee permet le dosage des thiols sous leur forme native (sans derivation). La phase mobile est constituee par une solution de dihydrogenophosphate d'ammonium (100 mM) ajustee a pH 2,8 par l'acide o-phosphorique. La premiere electrode de mesure dont le potentiel est fixe a 0,6 V permet le dosage de AA alors que la seconde fixee a un potentiel de 1,05 V permet celui des thiols. Les limites de detection sont de 5 et 10 pmoles injectees pour CSH et GSH et de 1 pmole injectee pour AA, respectivement. Les formes oxydees de ces composes sont quantifiees par la meme technique HPLC apres traitement de l'echantillon par le dithiothreitol. Cette methode a ete appliquee a un milieu contenant GSH,CSH et de l'acide dehydroascorbique (DHA) auquel a ete ajoutee une preparation purifiee de GSH-DHA oxydoreductase. L'analyse du milieu reactionnel apres action de l'enzyme a permis de mettre en evidence la formation simultanee des formes oxydees du glutathion (GSSG), de la cysteine (CSSC), mais aussi du disulfure mixte GSSC
Effect of the Polyethyleneimine in the Activity Catalytic of the horseradish peroxidase Immobilized on
Gold Electrodes Modified with a Self-assembled Monolayer of Thiols (SAMs). Studies were ...conducted by
cyclic voltammetry (CV) to investigate the effect of the polymer polyethyleneimine (PEI) in the electrochemical
reversibility of the mediator thionine and thus the catalytic activity of the enzyme horseradish peroxidase of
recombinant HRP-NHis (horseradish peroxidase to the has been added to a chain of six histidine in the extreme
N-terminal protein). This self produced monolayers of thiols (SAMS) on gold electrodes, with chemical
modifications obtained through successive stages in the solid phase of the electrode. The gold electrodes were
modified with monolayer SAM-TOA-ANTA/DADOO-Co2+ SAM: self-assembled monolayers of thiols,
TOA: dithioctic acid, ANTA: nitrilotriacetic acid, DADOO: 1,8-diamino-3,6-dioxaoctane. The results showed
that the presence of the polymer improves the electrochemical reversibility of the mediator to endure catalytic
currents as high as those that are obtained with molar ratios ANTA:DADOO 10:1 in the absence of PEI, and
improve the response voltammetric obtained. Se realizaron estudios de Voltametría Cíclica (CV) para investigar el efecto del polímero polietilenimina (PEI)
en la reversibilidad electroquímica del mediador tionina y por ende en la actividad catalítica de la enzima
peroxidasa de rábano recombinante, HRP-NHis (peroxidasa de rábano a la que se ha añadido una cadena de seis
histidinas en el extremo N-terminal de la proteína). Para ello se prepararon monocapas autoensambladas de
tioles sobre electrodos de oro, con modificaciones químicas obtenidas mediante etapas sucesivas en la fase
sólida del electrodo. Los electrodos de oro fueron modificados con monocapas SAM-TOA-ANTA/DADOO-
Co2+ SAM: Monocapa autoensamblada de tioles; TOA: Ácido ditióctico; ANTA: Ácido nitrilotriacético;
DADOO: 1,8-diamino-3,6-dioxaoctano. Los resultados obtenidos mostraron que la presencia del polímero
mejora la reversibilidad electroquímica del mediador soportando corrientes catalíticas tan altas como las que se
consiguen con relaciones molares ANTA:DADOO 10:1 en ausencia de PEI y mejorando la respuesta
voltamétrica obtenida.
Influence of state oxidation of cobalt ion in the stability electrodes modified with monolayers SAM-TOA-ANTA-Con+-HRP-NHis. Quartz Crystal Microbalance (QCM) was used to investigate the adsorption of ...the HRP-NHis enzyme (horseradish peroxidase), which was modified by the addition of a tail of six histidine on its extreme N-terminal. The QCM operating at flow of 0.025 mL min-1 on a crystal whose gold electrode was modified with monolayers of SAM-TOA-ANTA-Co2+ and SAM-TOA-ANTA-Co3+. The oxidize form was obtained from the electrochemical oxidation of a monolayer of SAM-TOA-ANTA-Co2+. The results suggest that the HRP-NHis is attached to both monolayers in a similar way; on the contrary, the desortion of the attached protein is dramatically different. Thus, whereas the ligand-Co2+ bonds are reversible, which allows that the anchored protein is easily replaced by imidazol molecules. The 3+ oxidation state of the metal does not allow the interchange of protein by the imidazol molecules.Influence of state oxidation of cobalt ion in the stability electrodes modified with monolayers SAM-TOA-ANTA-Con+-HRP-NHis. Quartz Crystal Microbalance (QCM) was used to investigate the adsorption of the HRP-NHis enzyme (horseradish peroxidase), which was modified by the addition of a tail of six histidine on its extreme N-terminal. The QCM operating at flow of 0.025 mL min-1 on a crystal whose gold electrode was modified with monolayers of SAM-TOA-ANTA-Co2+ and SAM-TOA-ANTA-Co3+. The oxidize form was obtained from the electrochemical oxidation of a monolayer of SAM-TOA-ANTA-Co2+. The results suggest that the HRP-NHis is attached to both monolayers in a similar way; on the contrary, the desortion of the attached protein is dramatically different. Thus, whereas the ligand-Co2+ bonds are reversible, which allows that the anchored protein is easily replaced by imidazol molecules. The 3+ oxidation state of the metal does not allow the interchange of protein by the imidazol molecules. Se realizaron estudios con Microbalanza de Cristal de Cuarzo (QCM) para investigar la adsorción de la enzima HRP-NHis (peroxidasa de rábano), a la que se ha añadido una cola de seis histidinas en el extremo N-terminal. La QCM operó en flujo a una velocidad de 0,025 mL min-1 sobre un cristal cuyo electrodo de oro fue modificado con monocapas de SAM-TOA-ANTA-Co2+ y SAM-TOA-ANTA-Co3+, esta última obtenida a partir de la oxidación electroquímica de una monocapa SAM-TOA-ANTA-Co2+. Los resultados obtenidos sugieren que la unión de la HRP-NHis a la monocapa es muy similar para ambos estados de oxidación del ión cobalto; por el contrario, la desorción es dramáticamente diferente. Así, mientras que las uniones ligando-Co2+ son reversibles con lo cual la proteína anclada es fácilmente desplazable por moléculas de imidazol, este mismo tipo de complejo es inerte respecto al intercambio de ligandos en el estado de oxidación 3+ del ión cobalto.
Impact of some components on Bordeaux roses and clairets aroma Murat, M.L. ((Université de Bordeaux 2, Talence (France). Faculté d'Oenologie)); Tominaga, T; Dubourdieu, D
Journal international des sciences de la vigne et du vin,
(Apr-Jun 2001), Letnik:
35, Številka:
2
Journal Article
Des vins rosés et clairets A.O.C. Bordeaux issus des cépages Cabernet Sauvignon, Cabernet franc et Merlot ont été classés en fonction de l'intensité de leur caractère fruité par l'analyse ...sensorielle. Le 3-mercapto-hexan-1-ol, l'acétate de 3-mercaptohexyle et l'acétate de phényl-éthyle sont présents en quantités d'autant plus élevées que les vins sont jugés fruités par les dégustateurs. Des corrélations très significatives entre les résultats de l'analyse sensorielle et les teneurs en ces composés sont obtenues. Un vin additionné de ces trois molécules est toujours jugé plus fruité que le vin témoin. Ainsi, ces trois composés peuvent être considérés comme composés clefs de l'arôme fruité des vins rosés de Bordeaux
El desarrollo del trabajo se basó en el diseño de un método adecuado para la cuantificación de los tioles volátiles del vino con suficiente sensibilidad basada en una extracción selectiva con ...p-hidroximercuribenzoato. Además se comprobó el efecto sensorial que la adición de estos compuestos en determinadas cantidades produce en el vino.
Thiols derivatization with 4-vinylpyridine Ortín, N., E-mail: nortin@unizar.es; Ferreira, V; Cacho, J. (Universidad de Zaragoza (España). Facultad de Ciencias)
Congresos y Jornadas - Instituto Tecnológico Agrario de Castilla y León (España),
2005
Publication
En los últimos años se ha puesto de manifiesto la importancia sensorial de los tioles en algunas variedades de vino. Hoy en día la cuantificación sigue siendo complicada debido a las bajas ...concentraciones en que se encuentran y a su inestabilidad. En este trabajo se ha explorado la posibilidad de usar un agente derivatizante (4-vinilpiridina) para la obtención de derivados tiólicos estables frente a reacciones de oxidación y adición.
Afin de préciser les conséquences éventuelles sur la composition des raisins et des vins liées à l'application de fongicides sur la vigne, plusieurs modalités de traitements anticryptogamiques ...utilisant le folpel, le cuivre ou un mélange d'éthylphosphite d'aluminium (fosétyl-Al) et de folpel ont été comparées sur des vignes de Cabernet Sauvignon au Chili à une modalité sans aucun traitement fongicide contre le mildiou. Dans les conditions de maturation du centre du Chili, l'application des fongicides anti-mildiou pendant la période végétative de la vigne, n'a pas d'effet défavorable sur le niveau de maturité en sucres des raisins, l'acidité et leur composition anthocyanique. Des variations dans les teneurs en 3-mercaptohexanol sont observées, en particulier avec les traitements cupriques de la vigne, mais globalement l'application phytosanitaire anti-mildiou ne conduit pas à une modification statistiquement significative de la composition des vins
