21.
mlnB基因敲除对解淀粉芽孢杆菌W1杀螨活性的影响
黄莎莎; 何鹏飞; 何月秋 ...
西南农业学报,
2022, Letnik:
35, Številka:
5
Journal Article
Q959; ...
目的研究拟通过构建W1菌株突变体及其杀螨抑菌活性检测以从分子水平探究并验证此菌株的杀螨机理,为二斑叶螨的防治提供一种新的微生物资源和防治策略,为后续开发利用更多微生物资源奠定基础,也为新型微生物杀螨剂的研发与应用提供理论基础.方法前期对解淀粉芽孢杆菌W1的次级代谢产物的活性化合物进行研究,已确定其对二斑叶螨的杀虫活性物质为二酮哌嗪类,大环内酯类及巨杆菌素类等化合物.大环内酯类化合物中以大环内酯A为主要杀螨活性物质,而大环内酯A是由mln基因簇调控合成.通过构建敲除整合载体pBS-mlnB-kanR转化导入W1菌株自然感受态细胞等操作,获得了其杀螨活性化合物——大环内酯生物合成缺陷突变体W1△mlnB::kanR,利用PCR扩增及产物测序和HPLC-MS/MS技术证实敲除突变体的成功构建,并检测其杀螨抑菌活性.结果mlnB基因的敲除不仅导致W1菌株无法合成大环内酯A,还削弱了其对大白菜软腐病菌、柑橘溃疡病菌、大白菜黑腐病菌及茄科青枯菌的拮抗活性,相比W1野生型菌株二斑叶螨的致死率73.33％～77.22％,大环内酯合成缺陷突变体的杀螨活性也下降了 46.66％～50.55％.结论解淀粉芽孢杆菌W1菌株合成的大环内酯A具有杀二斑叶螨活性,同时还能抑制大白菜软腐病菌、柑橘溃疡病菌、大白菜黑腐病菌以及茄科青枯病菌.大环内酯A合成受阻后,W1菌株的活性均明显地被削弱.
več
22.
基质固相分散-液相色谱串联质谱法同时检测鸡蛋中15种真菌毒素生物标志物
朱闰月 赵志勇 杨宪立 聂冬霞 徐斐 武爱波 宋素泉
分析化学,
2015, Letnik:
43, Številka:
7
Journal Article
采用基质固相分散（ Matrix solid phase dispersion, MSPD）技术,结合高效液相色谱-电喷雾离子化串联质谱联用技术（ HPLC-ESI-MS/MS）分析,在多反应监测（ MRM）模式下建立了鸡蛋中呕吐毒素、黄曲霉素、玉米赤霉烯酮等15种真菌毒素生物标志物的同时定量分析的方法。样品与吸附剂C18颗粒直接混合装柱,并用20 mL 1 ...
mmol/L甲酸铵的乙腈/甲醇（1：1, V/V）溶液洗脱、吹干,萃取液经复溶、过滤后即可进行检测,整个分析过程无需复杂的净化、离心等步骤。本方法在0.2-100 ng/mL范围内具有良好的线性关系,相关系数R2逸0.9931,检出限在0.05-2.0μg/kg 之间,定量限在0.2-4.0μg/kg 之间,样品的提取回收率为61%-90%。
več
23.
表面活性素、杆菌霉素L、罗克霉素和泛革素4种脂肽类抗生素高效制备方法及其生物学活性
罗楚平; 张婧; 季冬淳 ...
西南农业学报,
2018, Letnik:
31, Številka:
11
Journal Article
Q93; ...
目的建立一种从枯草芽胞杆菌中高效快速制备4种脂肽类抗生素的方法,初步阐明制备脂肽类抗生素的生物学活性.方法通过构建脂肽类抗生素突变株,采用酸沉淀、有机溶剂抽提和固相萃取的方法从枯草芽胞杆菌Bs916及其突变株的发酵液中提纯表面活性素、杆菌零素L、泛革素和罗克霉素4种脂肽类抗生素;运用HPLC-MS、SDS-PAGE电泳对制备脂肽类抗生素的纯度进行检测;最后采用西瓜枯萎病菌、金黄色葡萄球菌和绵羊血红细胞测定4种脂肽类抗生素的抗真菌、抗细菌和溶血活性.结果蛋白凝胶电泳和液相色谱联用质谱检测结果表明,制备的脂肽类抗生素均达到了电泳纯和色谱纯;生物活性分析实验结果表明,表面活性素和杆菌霉素L具有较强的溶血活性,泛革素和罗克霉素的溶血活性较弱,杆菌霉素L和泛革素具有较强的抗真菌活性,而表面活性素和罗克霉素具有较强的抗细菌活性.结论建立快速从芽胞杆菌中提纯4种脂肽类抗生素色谱方法,测定了4种脂肽类化合物的生物活性,为进一步探究脂肽类抗生素的构效关系、生物合成和开发应用奠定基础.
več
24.
大田软海绵酸和鳍藻毒素-1纯化样品的分析
冯振洲 于仁成 周名江
分析化学,
2012, Letnik:
40, Številka:
4
Journal Article
采用高效液相色谱-荧光检测、高效液相色谱-紫外检测、流动注射进样-质谱检测和高效液相色谱-质谱联用分析等方法对从有毒利玛原甲藻（Prorocentrum lima ...
Dodge）中分离纯化的大田软海绵酸（OA）和鳍藻毒素-1（DTX1）毒素样品进行定性鉴定和纯度分析,为毒素标准品的制备提供材料和方法依据。通过柱前衍生、HPLC-FLD分析,可在样品中检测到OA和DTX1与4-溴甲基7-甲氧基香豆素（BrMmc）的衍生物,表明样品中存在OA和DTX1毒素。HPLC-UV方法在200nm下的检测结果表明,OA和DTX1是样品色谱图中主要的色谱峰,OA样品和DTX1样品纯度可以达到95%和98%。根据正、负离子模式下流动注射-质谱分析结果,毒素样品和标准品质谱图中信号最强离子的m/z相同,应为OA和DTX1毒素的M＋Na＋和M#H#离子,其裂解方式也基本一致。通过HPLC-MS方法,对样品进行了m/z200～1000的全扫描分析,发现OA样品中可检测到少量杂质,而DTX1样品中仅检测到DTX1毒素成分。分析结果表明,前期分离纯化的OA和DTX1毒素样品纯度较高,可以在腹泻性贝毒（DSP）毒素液相色谱和液相色谱-质谱联用分析中用作标准毒素。
več
25.
泰拉霉素在鸡体内的药物代谢动力学研究
徐曹燕 汤春莲 阮祥春 李琳 曾明华
南京农业大学学报,
2015, Letnik:
38, Številka:
3
Journal Article
目的探讨泰拉霉素在鸡体内的药物代谢动力学过程和特征及其生物利用度。方法给受试健康鸡分别进行静脉注射、肌肉注射及口服泰拉霉素,给药后在120 ...
h内分点心脏采血,血浆样品经乙腈-0.1%甲酸溶液（体积比为95∶5）沉淀,离心去蛋白,以HPLC-ESI-MS/MS法检测鸡血浆中泰拉霉素含量,最后采用药动学软件Winnonlin的非房室模型进行数据分析。结果受试鸡经静脉注射、肌肉注射和口服给药后药时数据均适合非房室模型。静脉注射给药后,血浆清除率（CL）为17.71 m L·kg^-1·h^-1,稳态表观分布容积（Vss）为77.15 L·kg^-1,消除半衰期（t1/2）为21.65 h。肌肉注射和口服泰拉霉素后,在0.25和0.5 h时,血浆浓度（Cmax）达峰值,分别为0.83和0.69 ng·mL^-1,血浆中t1/2平均分别为20.96和24.33 h;生物利用度分别为92.59%和62.38%,说明肌肉注射给药较口服吸收完全,生物利用度高。结论泰拉霉素肌肉注射或口服在健康鸡体内表观分布容积大,吸收和分布迅速,达峰时间短,消除缓慢,生物利用度高。
več
26.
高效液相色谱和液相色谱-电喷雾质谱联用法鉴定辛硫磷在鲫鱼肝微粒体中代谢产物及途径
刘荣飞 刘幸 刘晓宇 范雯婷 赵冬冬 石旺荣 朱雨田 李宏
分析化学,
2013, Letnik:
41, Številka:
6
Journal Article
采用差速离心法制备鲫鱼肝微粒体,选择已经建立的肝微粒体系统进行体外孵育,研究有机磷杀虫剂辛硫磷在鲫鱼肝微粒体中的代谢。产物经乙酸乙酯萃取2次,取出有机相于40℃下旋转蒸发至近干,加1 ...
mL甲醇,经高效液相色谱（HPLC）分离测定,液相色谱-电喷雾质谱联用（LC-ESI/MS）鉴定其分子结构,发现了3种代谢产物（M1：二乙基硫代磷酸;M2：四乙基二硫代焦磷酸;M3：辛氧磷）,据此推断辛硫磷在鲫鱼肝微粒体（细胞色素P450酶系）的作用下进行了脱硫氧化、水解反应。从而可推断辛硫磷在鲫鱼肝微粒体中的代谢途径和代谢特点,为进一步研究其体内代谢和代谢酶奠定基础。
več
27.
高速逆流色谱分离制备甜瓜蒂中葫芦素类化合物
金再宿 田红梅 唐岚 饶桂维 方应国 李成平
分析化学,
2011, Letnik:
39, Številka:
6
Journal Article
采用高速逆流色谱法分离制备了甜瓜蒂中3种葫芦素类化合物。以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（1.2∶0.8∶0.8∶1.2,V/V）为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相。在主机转速800 r/min、流动相流速2.0 mL/min、分离温度25℃、检测波长254 nm条件下进行分离,所得产物纯度经HPLC检测,结构经MS、1 H-NMR和13 C-NMR鉴定。4 h内从200 ...
mg经XAD-16大孔树脂预处理的粗提物中一步分离制备得到33.5mg葫芦素B、21.7 mg葫芦素E和14.9 mg葫芦素Ⅰ,纯度分别为99.1%、98.3%和97.5%,结构经鉴定与文献相符。
več
28.
条斑紫菜中砷的亚细胞分布及其解毒机制的研究
尚德荣 张继红 赵艳芳 翟毓秀 宁劲松 丁海燕 盛晓风 段元慧
分析化学,
2013, Letnik:
41, Številka:
11
Journal Article
通过对砷的富集形态变化和亚细胞分布研究,揭示条斑紫菜中砷的区隔化效应及其对砷的解毒机理.将活体条斑紫菜分别暴露于0.05,0.1,0.5和1.0 ...
mg/L的亚砷酸根（As033-）和砷酸根（Aso3-）溶液中6d,每天取样一次,运用HPLC-ICP-MS法分析紫菜中砷的形态变化,运用差速离心技术分析砷在亚细胞水平的分布差异.结果表明,随着介质浓度的升高和暴露时间的增加,藻体中的砷含量呈线性增长趋势,统计分析表明条斑紫菜对As（Ⅲ）和As（Ⅴ）的积累与暴露浓度都呈极显著正相关,相关系数RAs（Ⅲ）=0.99960,p＜0.01;RAs（Ⅴ）=0.9844,p＜0.01;条斑紫菜对As（Ⅲ）的富集速率略高于As（Ⅴ）,暴露在0.1 mg/L As（Ⅲ）和As（Ⅴ）溶液中6d后的富集系数分别是4718.7和4111.5.研究表明,条斑紫菜中砷的亚细胞分布与区隔化差异很大,各组分的砷含量分别为：细胞液80％＞细胞壁15％＞细胞器5％.藻体胞液是砷的主要储存部位,胞液对砷具有非常明显的区隔化作用.通过对其富集过程中砷形态转化规律的研究发现：As（Ⅲ）会迅速被甲基化,然后再转化成砷糖（AsX1）;As（Ⅴ）会迅速被富集还原成As（Ⅲ）,As（Ⅲ）被逐步甲基化,然后再转化成砷糖（AsX1）.
več
29.
高效液相色谱-质谱联用快速筛选并鉴定黄芩甲醇提取物中抗氧化活性成分
杨思敏 陈瑞战 董航 李元 李世哲 李新龙 宋凤瑞 刘志强
分析化学,
2012, Letnik:
40, Številka:
6
Journal Article
建立了高效液相色谱-质谱联用技术快速筛选和鉴定黄芩甲醇提取物中抗氧化活性成分的方法。在黄芩甲醇提物中加入适量的二苯基三硝基苯肼（DPPH.）作为实验组,避光室温反应30 ...
min后直接经液相色谱分析,并与不加入DPPH.的空白组进行比较。有抗氧化活性的成分因会与DPPH.反应而使峰面积减少,而不具有抗氧化活性的成分峰面积则不变。基于色谱数据可以获得有抗氧化活性组分的相对活性强度,基于质谱数据可获得活性组分的结构信息用于结构鉴定。本方法成功地从黄芩甲醇提取物中筛选并鉴定出了黄芩苷、千层纸素A-7-O-Β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷和千层纸素A4种较强的抗氧化活性成分。本方法利用HPLC-MS技术对复杂体系（如中药提取物）中小分子的分离和鉴定优势,可以直接筛选出黄芩甲醇提取物中的抗氧化活性成分,而不需要繁琐的前期分离和纯化,并且不需要仪器改装工作,有利于实现复杂体系中抗氧化活性成分的高通量筛选。
več
30.
高效液相色谱-电喷雾质谱联用测定黄芪黄酮苷酶解产物
肖卫华 韩鲁佳
Fēnxī huàxué,
2008, Letnik:
36, Številka:
10
Journal Article
高效液相色谱-电喷雾质谱（HPLC—ESI—MS）联用分析黄芪中的黄酮类化合物结果表明黄芪黄酮提取物主要包含毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、芒柄花苷、9，10-二甲氧基紫檀烷-3—O-β-D-葡萄糖苷以及2’-羟基-3，4＇-二甲氧基异黄烷-7-O-β-D-葡萄糖苷等黄酮苷，黄芪黄酮提取物经过β-葡萄糖苷酶（1IU／mL）粗酶液酶解后，HPLC—ESI—MS分析酶解生成产物主要为黄酮苷元毛蕊异黄酮、芒柄花素、3-羟基9，10-二甲氧基紫檀烷以及7，2’-二羟基-3，4＇-二甲氧基异黄烷。其中前两种主要的黄酮苷酶解率均达90％以上。酶解后所得产物对DPPH自由基清除率是酶解前的1．4倍。因此，通过β-葡萄糖苷酶水解可以有效地将黄芪黄酮转化为相应的黄酮苷元，大大提高黄芪黄酮提取物的抗氧化活性。
