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郭永翠; 朱玲; 高山; 张建良; 张锐
西南农业学报, 2018, Letnik: 31, Številka: 10Journal Article
S664.1; 目的苯丙氨酸解氨酶(PAL)为木质素单体生物合成途径中的关键酶.采用RT-PCR技术克隆露仁核桃WJ-PAL基因和硬壳完整核桃J-PAL基因,研究PAL基因在硬壳完整和露仁核桃内果皮中发育过程中的表达特性.方法以‘温138’核桃为材料,‘纸皮’核桃作为对照,利用反转录PCR(RT-PCR)方法克隆J-PAL、J-PAL基因、通过生物信息学方法分析,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析WJ-PAL、ZJ-PAL在核桃硬核过程8个不同时期的表达特性.结果WJ-PAL基因cDNA序列包括600 bp ORF,编码200个氨基酸,分子量21.11 kD,理论等电点8.44;ZJ-PAL基因包含690 bp ORF,编码230个氨基酸,分子量24.10 kD,理论等电点7.44.实时荧光定量PCR分析表明,露仁核桃PAL基因在花后100d的相对表达量为花后51 d相对表达量的117倍,硬壳完整核桃PAL基因在花后65 d相对表达量为花后72 d相对表达量的5倍,初步证明PAL基因在硬壳完整和露仁核桃的不同发育时期表达量存在明显差异.结论结果表明该基因参与核桃内果皮(硬壳)硬化过程,影响内果皮木质素的合成,从而造成核桃内果皮发育不全,出现露仁.
