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姚婵媛; 杨金易; 徐振林; 王弘; 雷红涛; 孙远明; 田元新; 沈玉栋
分析化学, 2018, Letnik: 46, Številka: 8Journal Article
针对环境及食品中泰乐菌素残留问题,本研究将泰乐菌素分子结构侧链醛基一步直接氧化为羧基,并将其作为新的半抗原,通过免疫新西兰大白兔制备了特异性的抗泰勒菌素多克隆抗体,优化的反应条件为:包被原稀释6000倍,抗体稀释2000倍,反应缓冲液为pH 7.4、吐温含量0.1％、离子浓度0.01mol/L的PBST,二抗稀释倍数为4000倍,二抗反应时间30min.在此优化条件下,建立了检测泰乐菌素的间接竞争酶联免疫分析法(icELISA),半数抑制浓度(IC50)为1.39ng/mL,线性范围(IC20～IC80)为0.17～11.0ng/mL,检出限(IC10)为0.07ng/mL,与结构功能类似物交叉反应率均小于0.1％.对纯牛奶、自来水、鱼塘水中泰乐菌素的添加回收率在78.4％～105.6％之间,RSD<15％,检测结果与HPLC-MS/MS方法具有良好的相关性(R2=0.97).本研究建立的icELISA方法适用于牛奶及水样中泰乐菌素残留的特异性快速筛查.
