Introducción. Se ha establecido un aumento de la prevalencia de deficiencia de vitamina B12 en los pacientes adultos mayores, pero varía dependiendo de la ciudad o el país de residencia. La elevación por encima del límite superior se ha asociado a mortalidad, neoplasias, enfermedad linfoproliferativa y falla renal. Este estudio determina la prevalencia de deficiencia y la proporción de pacientes con elevación de los niveles de vitamina B12 en pacientes mayores de 60 años residentes en Colombia. Diseño. Estudio de corte transversal. Métodos. Se incluyen todos los pacientes mayores de 18 años a quienes se les realiza medición de vitamina B12 en los laboratorios de Ayudas Diagnósticas Sura, en algunas de las principales ciudades de Colombia, durante los meses de enero y junio del 2017. Se realiza una comparación por grupos de edad para establecer si existe diferencias en los niveles de vitamina B12. Resultados. Se obtienen los datos de 24897 pacientes, 16006 (64,3%) menores de 60 años, 3874 (15,6%) desde 60 a 70 años, n: 2933 (11,8%) desde 70 a 80 años y 80 años o mayores n:2084 (8,4%). Se encontró una diferencia estadísticamente significativa en las siguientes variables por grupo de edad: creatinina, TGP, leucocitos, plaquetas, anemia y VCM. Hay una mayor proporción de pacientes con niveles elevados de vitamina B12 en los tres grupos mayores de 60 años que en menores de esta edad (13,8%, 15,6% y 18,6% vs 9,5% respectivamente) y una mayor proporción de pacientes con deficiencia de vitamina B12 en los dos grupos mayores de 70 años, comparados con los menores de 60 años (4,3% y 4,7% vs 2.9%). Esta diferencia persiste cuando se ajusta por el resto de las variables. Conclusiones. Hay una variación estadísticamente significativa en la prevalencia de niveles alterados de vitamina B12 de acuerdo con el grupo de edad.