E-viri
Recenzirano
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Lambin, P; Debbia, M; Béolet, M; Brossard, Y; Le Pennec, P.Y; Rouger, P
Transfusion clinique et biologique : journal de la Société française de transfusion sanguine, 2/2001, Letnik: 8, Številka: 1Journal Article
Les préparations d'immunoglobulines anti-D (RH1) sont injectées pour prévent la maladie hémolytique du nouveau-né. Ces préparations sont obtenues par le fractionnement du plasma de donneurs immunisés. La mesure de la concentration des anticorps anti-D est nécessaire pour estimer la qualité des préparations d'immunoglobulines et celle des sérums des donneurs. Nous avons mis au point une méthode ELISA pour la quantification des IgG anti-D. Cette méthode comporte la sensibilisation des globules rouges par les anticorps anti-D, la solubilisation des membranes des hématies sensibilisées par le Triton et, enfin, la mesure proprement dite de la concentration des IgG par ELISA. Nous avons utilisé comme sérum de référence la préparation internationale d'anti-D 64 419 . Grâce à cette méthode, nous avons mesuré la concentration des IgG anti-D dans cinq préparations d'immunoglobulines anti-D et dans le sérum de dix donneurs immunisés par l'antigène D. Les résultats ont été comparés avec ceux obtenus par hémagglutination automatique. Dans les préparations d'immunoglobulines, la concentration des IgG anti-D mesurée par ELISA est en moyenne de 56,2 μg/mL. Des résultats peu différents (52 μg/mL) ont été obtenus par hémagglutination automatique. Dans le sérum de 10 donneurs immunisés, la concentration des IgG anti-D varie de 2,2 à 59,1 μg/mL. La corrélation entre l'ELISA et l'hémagglutination automatique est satisfaisante pour l'ensemble des valeurs (r = 0,98, p < 10 −7). En conclusion, le méthode ELISA décrite offre une alternative à l'hémagglutination automatique. Sa mise en œuvre nécessite seulement un équipement standard nécessaire pour réaliser les méthodes immuno-enzymatiques classiques. Immunoglobulin preparations of anti-D (RH1) are injected to prevent haemolytic disease of the newborn. Such preparations are obtained by the fractionation of plasma from immunized donors. Measurement of the concentration of IgG anti-D is required to estimate the potency of anti-D preparations and sera from immunized donors. We have developed an ELISA method for the quantification of IgG anti-D. This method included the following steps, sensitization of red cells by anti-D, solubilization of red cell membranes by Triton, and eventually, measurement of IgG anti-D concentration by ELISA. The international reference preparation of anti-D ( 68 419 ) was used as a reference. With this method, we measured IgG anti-D concentrations in 5 immunoglobulin preparations of anti-D and in the sera of 10 donors immunized by D antigen. The ELISA results were compared with those obtained by automated hemagglutination. A mean anti-D concentration of 56.2 μg/mL was found the ELISA in immunoglobulin preparations. Similar results were obtained by automated hemagglutination (mean 52 μg/mL). In the sera of 10 D-immunized donors, anti-D IgG concentration varied from 2.2 to 59.8 μg/mL. A good correlation between ELISA and automated hemagglutination was observed in these sera (r = 0.98, p < 10 −7). In conclusion, the ELISA technique offers an alternative to automated hemagglutination. It requires only the standard equipment necessary for immuno-enzymatic methods.
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