Uravnavanje izražanja interlevkina 6 preko prostaglandinskega receptorja EP4 : Prešernova nagrada študentom
Kranjc, Tilen
Vezava antigena na imunoglobulinski receptor BCR izzove aktivacijo in proliferacijo pri zrelih limfocitih B ter apoptozo pri nezrelih limfocitih B. Stimulacija BCR aktivira signalne poti v celici, ki ...vodijo do transkripcijskega reprogramiranja. Poveča se tudi izratanje gena Ptger4, ki kodira prostaglandinski receptor EP4, na katerega se vete naravni ligand prostaglandin E2. Prostaglandini so te dlje časa znani kot modulatorji imunskega odziva. Vezava prostaglandina E2 na receptor EP4 povzroči aktivacijo od cikličnega AMP odvisnih in neodvisnih signalnih poti, ki vodijo v modulacijo BCR induciranega fenotipskega odziva limfocitov B. Aktivacija BCR inducira izratanje gena za interlevkin 6, ki ima v svoji promotorski regiji vezavno mesto za transkripcijski faktor CREB. Namen raziskovalnega dela je pojasniti vlogo receptorja EP4 pri modulaciji BCR induciranega izratanja interlevkina 6. Pri eksperimentalnem delu smo se poslutili farmakološkega pristopa. Celično linijo WEHI 231 smo stimulirali z različnimi agonisti, antagonisti in inhibitorji signalnih poti. Vpliv stimulacije receptorja EP4 na BCR inducirano izratanje gena za IL-6 smo spremljali z metodo veritne reakcije s polimerazo v realnem času, izločanje IL-6 v celični medij pa s citometričnim citokinskim testom. Z encimsko imunskim testom za cAMP smo ugotavljali z receptorjem EP4 posredovano nastajanje cikličnega AMP v WEHI 231celicah. Vlogo EP4/cAMP odvisnih signalnih poti pri modulaciji BCR induciranega izratanja IL-6 smo ugotavljali z uporabo izbranih inhibitorjev encima adenilat ciklaze in protein kinaze A. V zadnjem delu raziskovalne naloge smo določili še vpliv IL-6 na proliferacijo WEHI 231 celične linije z metodo MTS. Ugotovili smo, da stimulacija WEHI 231 celic s PGE2 poviša z BCR inducirano izratanje gena za IL-6. Z uporabo specifičnega agonista in antagonista receptorja EP4 smo dokazali, da so učinki PGE2 posredovani preko EP4 podtipa receptorja. Ker stimulacija receptorja EP4 sama po sebi nima vpliva na izratanje gena za IL-6 sklepamo, da stimulacija receptorja EP4 modulira BCR inducirane signalne poti. Stimulacija receptorja EP4 je povzročila dvig intracelularne koncentracije cAMP. Z inhibicijo encima adenilat ciklaze in encima protein kinaze A smo dosegli popolno inhibicijo z receptorjem EP4 posredovane modulacije BCR induciranega izratanja in izločanja IL-6. S tem smo dokazali, da poteka modulacija BCR induciranega izratanja in izločanja IL-6 v nezrelih limfocitih B preko cAMP/PKA odvisne signalne poti, ki najverjetneje vodi v povečano aktivacijo transkripcijskega faktorja CREB. Izločeni IL-6 deluje na celično linijo WEHI 231 stimulatorno, saj se je proliferacija celic v prisotnosti rekombinantnega IL-6 povečala. Kljub povečanemu izratanju gena za IL-6 ob hkratni stimulaciji receptorja EP4 in BCR, pa stimulacija obeh receptorjev vodi v znitano izratanje gena za receptor za IL-6, kar nakazuje obstoj negativne povratne zanke.
Type of material - undergr. thesis
; adult, serious
Publication and manufacture - Ljubljana : [T. Kranjc], 2010
It was not necessary to add the material to the shelf.
Bibliographic material was successfully added on shelf.
Adding bibliographical material on shelf was not successful.
Material is already on the shelf.
Permalink
URL:
Impact factor
Access to the JCR database is permitted only to users from Slovenia. Your current IP address is not on the list of IP addresses with access permission, and authentication with the relevant AAI accout is required.
Year
Impact factor
Edition
Category
Classification
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
Select the library membership card:
DRS,
in which the journal is indexed
Database name
Field
Year
Links to authors' personal bibliographies
Links to information on researchers in the SICRIS system
Subject headings in COBISS General List of Subject Headings
Select pickup location
The material from the parent unit is free. If the material is delivered to the pickup location from another unit, the library may charge you for this service.
