Pozadina istraživanja. Afinitetna kromatografija pri kojoj se monoklonsko protutijelo veže za protein A je već dobro poznata metoda u farmaceutskoj industriji. Međutim, zbog visokih troškova ...izdvajanja proteina A pomoću kromatografije te poteškoća u provođenju kontinuiranog procesa važno je ispitati alternativne metode pročišćavanja.
Eksperimentalni pristup. U ovome su radu razvijene i optimirane metode ekstrakcije sa ponovnom ekstrakcijom te taloženja i otapanja. Rezultati tih dvaju metoda, odnosno prinos monoklonskih protutijela, količina preostalih nečistoća, kao što su DNA i proteini stanica domaćina, te količina agregata monoklonskih protutijela, uspoređeni su s onima dobivenim afinitetnom kromatografijom na ionskom izmjenjivaču. Za sveobuhvatnu usporedbu različitih metoda, ispitivanja su provedena na identičnim hranjivim podlogama koje su sadržavale adalimumab.
Rezultati i zaključci. Afinitetnom kromatografijom na ionskom izmjenjivaču dobiveni su veliki prinos i velika čistoća adalimumaba. Taloženjem su dobiveni veliki prinos, ali manja čistoća uzorka. Pročišćavanje pomoću ekstrakcije rezultiralo je manjim prinosom i manjom čistoćom uzorka. Zaključeno je da je metoda taloženja bolja od ekstrakcije za izravno pročišćavanje adalimumaba iz suspenzije stanične kulture.
Novina i znanstveni doprinos. Iako alternativne metode imaju neke prednosti, kao što su jednostavna i jeftina primjena, neophodno ih je unaprijediti da bi dobiveni rezultati bili usporedivi s rezultatima dobivenim pročišćavanjem adalimumaba ionskom kromatografijom u hranjivoj podlozi.
U istraživanju je promatran utjecaj svojstava tla na raspodjelu Pu3+ i Pu4+ po dubini uspoređujući travnato tlo sa šumskim tlom. Utvrđena je koncentracija organske tvari u tlu i pH-vrijednost uzoraka ...tla. Uzorci tla površinski su umjetno onečišćeni 239Pu te su se u terenskim uvjetima držali u posebnim stupcima 326 odnosno 418 dana. Analiza onečišćenih slojeva tla (svaki debljine 5 cm) do dubine od 20 cm pokazala je da se u gornjem sloju do 5 cm dubine nakupilo 81 % 239Pu4+ i 44 % 239Pu3+ u slučaju travnatog tla, odnosno 82 % 239Pu4+ te 61 % 239Pu3+ u gornjem sloju šumskoga tla. Primjenom metode sekvencijalne ekstrakcije utvrđena je raspodjela radionuklida u različitim geokemijskim frakcijama travnatoga tla 30 dana nakon površinskoga onečišćenja 239Pu, 137Cs odnosno 90Sr u laboratorijskim uvjetima. Iz rezidualne frakcije najviše je ekstrahirano 137Cs (70 %) te 239Pu (60 %), dok je 90Sr u ovoj frakciji bio zastupljen s tek 10 % početne aktivnosti. Stoga se može zaključiti da organski te neki anorganski spojevi, koji su uobičajeni sastojci rezidualnih frakcija, utječu na zadržavanje i migraciju plutonija u tlu.
Provider: - Institution: Josip Juraj Strossmayer University of Osijek. FACULTY OF FOOD TECHNOLOGY. Department of Process Engineering. Sub-department of Unit Operations. - Data provided by Europeana ...Collections- U radu se istraživao utjecaj omjera-kruto-tekuće (10, 20, 30 i 40 mL/g), otapala (vode, te 50,
70 i 96%-tnog etanola), vremena (10-200 minuta) te veličine čestica (> 0,63 mm; 0,63 - 0,4 mm;
0,4 - 0,16 mm i < 0,16 mm) na prinos ekstrakcije ukupnih fenola iz sjemenki grožđa, kao i
utjecaj temperature (25, 40, 50, 60, 70 i 80 °C) na kinetiku ekstrakcije ukupnih i individualnih
fenolnih tvari. Istraživao se i utjecaj različitih načina ekstrakcije (ekstrakcija uz zagrijavanje u
vodenoj kupelji s tresilicom, ekstrakcija na univerzalnom sustavu za ekstrakciju, kombinacija
ekstrakcije superkritičnim fluidima i ekstrakcije otapalom) na ekstraktibilnost fenolnih tvari,
antioksidacijsku aktivnost i boju ekstrakata.
Prijenos fenolnih tvari tijekom kruto-tekuće ekstrakcije odvijao se difuzijom, a određene
vrijednosti koeficijenata efektivne difuzije ukupnih (0,2 - 1,96·10-10 m2/min) i individualnih
fenolnih tvari (0,02 - 0,69·10-10 m2/min) povećavale su se s porastom temperature ekstrakcije.
Svi ispitani eksponencijalni matematički modeli (modificirani Fickov II, modificirani
Henderson-Pabisov i Pageov model) te neeksponencijalni Pelegov model bili su prikladni za
opisivanje kinetike kruto-tekuće ekstrakcije, međutim, na osnovi više statističkih pokazatelja
Pageov model je pokazao najbolja slaganja eksperimentalnih i modelom predviđenih podataka.
Ekstrakcijom u vodenoj kupelji, najveći prinos ukupnih fenolnih tvari ostvaren je
ekstrakcijom iz čestica manjih od 0,63 mm pri omjeru kruto-tekuće 40 mL/g i temperaturi 80 °C
pomoću 50% -tnog etanola u trajanju 200 minuta, dok je za iste uvjete ekstrakcija na
univerzalnom sustavu za ekstrakciju dala veći prinos fenolnih tvari od 6 do 35 %.
Oduljavanje sjemenki grožđa pod različitim procesnim uvjetima superkritične ekstrakcije
(tlakovi: 300 i 450 bara i temperature 40 i 60 °C) imalo je pozitivan utjecaj na ekstraktibilnost
fenolnih tvari tijekom ekstrakcije otapalom, kao i na antioksidacijsku aktivnost dobivenih
ekstrakata.
Procesni uvjeti i način kruto-tekuće ekstrakcije utjecali su na antioksidacijsku aktivnost i
boju ekstrakta. Utvrđena je visoka korelacija između antioksidacijske aktivnosti ekstrakata
sjemenki grožđa i masenog udjela individualnih fenolnih spojeva te ukupnih fenolnih tvari kao i
postojanje povezanosti boje ekstrakata i masenog udjela fenolnih tvari u ekstraktima.- This study was aimed to investigate the influence of solvent (water and aqueous ethanol: 50,
70 and 96%), solid-liquid ratio (10, 20, 30 and 40 mL/g), extraction time (10-200 minutes) and
particle size (> 0.63mm, 0.63 - 0.4 mm, 0.4 - 0.16 mm and < 0.16 mm) on yield of solid-liquid
extraction as well as influence of temperature (25, 40, 50, 60, 70 and 80 °C) on extraction
kinetics of total and individual phenolic compounds. The effect of extraction method (water bath
extraction, universal extraction system, combined supercritical fluid extraction and water bath
extraction) on phenolic extractability, antioxidant activity and colour of extract was also
investigated.
The main mechanism of mass transfer during solid-liquid extraction was diffusion. The
values of effective diffusion coefficient for total (0.2 - 1.96·10-10 m2/min) and individual
(0.02 - 0.69·10-10 m2/min) phenolic compound increased with extraction temperature. All
examined exponential mathematical models (modified Fick II, modified Henderson-Pabis and
Page) and non-exponential model proposed by Peleg were suitable for describing extraction
kinetics. However, Page model showed the best accordance between experimental and model
predicted data which was confirmed by several relevant statistical criteria.
The highest phenolic yield was obtained from grape seed particle lower than 0.63 mm during
200 minutes of extraction in water bath at 80 °C and solid-liquid ratio 40 mL/g by using 50%
aqueous ethanol. Results obtained by universal extraction system were higher in average 6 - 35%
in relation to water bath extraction.
Oil elimination from grape seed under different regimes of supercritical fluid extraction (300
and 450 bar; 40 and 60 °C) had the positive effect on phenolic extractability by conventional
solid-liquid extraction and on antioxidant activity of extracts.
The influence of process parameters and extraction method on antioxidant activity and colour of
extract was observed. Antioxidant activity of grape seed extracts was strongly correlated with
total and individual phenolic content. Relationship between phenolic content and colour of
extracts was observed.- All metadata published by Europeana are available free of restriction under the Creative Commons CC0 1.0 Universal Public Domain Dedication. However, Europeana requests that you actively acknowledge and give attribution to all metadata sources including Europeana
Pozadina istraživanja. Toplinski stabilne nemasne rižine mekinje su glavni nusproizvod ekstrakcije ulja iz rižinih mekinja, te su bogat izvor proteina. Međutim, usprkos jedinstvenim hranjivim ...značajkama, taj nusproizvod bogat proteinima je slabo iskorišten i koristi se samo kao stočna hrana male vrijednosti. Sve je veći interes znanstvenika za ispitivanje ekstrakcije proteina iz toplinski stabilnih nemasnih rižinih mekinja enzimskom hidrolizom. Međutim, za to treba razviti ekonomičnu metodu kojom bi se smanjili veliki troškovi uzrokovani primjenom enzima. Stoga u radu predlažemo alternativni ekonomičan i prirodni postupak ekstrakcije proteina iz nemasnih rižinih mekinja fermentacijom heterofermentativnih mikroorganizama na čvrstoj podlozi.
Eksperimentalni pristup. Ispitan je postupak proizvodnje enzima i ektrakcije proteina fermentacijom toplinski stabilnih nemasnih rižinih mekinja na čvrstoj podlozi pomoću dva tradicionalna azijska startera, loog-pang i koji. Stoga su mekinje fermentirane tijekom 0, 12, 24, 72 i 96 h, a zatim je provedena hidroliza tijekom 24 sata za procjenu izdvojenog proteina. Osim toga, određena je mikrobiološka raznolikost startera metagenomskim sekvenciranjem 16S rRNA za identifikaciju bakterija i sekvenciranjem transkribiranih internih razdjelnih zona za identifikaciju kvasaca.
Rezultati i zaključci. U mikrobnoj kulturi startera loog-pang prevladavale su bakterije mliječno-kiselog vrenja poput Bacillus subtilis, dok su u starteru koji prevladavale bakterije Streptococcus lutetiensis, Bacillus pumilus, Lactococcus cremoris, Lactococcus garvieae i Pediococcus pentosaceus. Kvasac Saccharomycopsis fibuligera prevladavao je u starteru loog-pang, a Saccharomyces cerevisiae u starteru koji. Rezultati pokazuju da starter kulture loog-pang i koji tijekom fermentacije proizvode celulazu, te neutralne i kisele proteaze. Usprkos različitom mikrobiološkom sastavu i aktivnosti enzima tijekom fermentacije na čvrstoj podlozi, primjenom se obje starter kulture uspješno povećala ekstrakcija proteina iz rižinih mekinja. Opažena je pozitivna korelacija između trajanja fermentacije i ekstrakcije proteina. Nakon 72 h fermentacije i 24 h hidrolize, u podlozi s loog-pang starterom iz rižinih je mekinja izolirano 65,66 % proteina, a u podlozi s koji starterom 66,67 % proteina. Usporedbom aminokiselinskog sastava proteinskih hidrolizata dobivenih fermentacijom i metodom bez fermentacije nisu utvrđene razlike među njima, a glutaminska i asparaginska kiselina, leucin, arginin, alanin i glicin činile su otprilike 58 % ukupnih aminokiselina.
Novina i znanstveni doprinos. Tijekom fermentacije na čvrstoj podlozi pomoću tradicionalnog tajlandskog startera loog-pang i tradicionalnog japanskog startera koji učinkovito su izolirani proteini iz toplinski stabilnih nemasnih rižinih mekinja, iako se one smatraju jeftinim izvorom mikrobnih enzima. Dobiveni rezultati mogu biti korisni za buduća istraživanja ekstrakcije proteina iz rižinih mekinja u industrijskim uvjetima.
It is possible to carry out the isolation of native nucleic acids from higher plants by basically different phenoldetergent methods. Considering the nature of biological material, extraction of ...native NA proved sometimes to be relatively easy while at other times it requires particular treatment. This paper deals with various procedures for the isolation of native NA from young (7-days old) and older (15-days old) sunflower leaves (Helianthus annuus).
It was found that the common procedures for the isolation of native NA from plant meterial couldn’t be successfully applied for the analyses of sunflower leaves. An extremely satisfactory extraction and preparation quality was obtained through isolation of NA from young leaves by the method Konarev and Tjuterev (1970). However, it couldn’t be applied for the isolation of NA from older leaves, as the extraction of DNA is very poor, indicating significantly stronger bonds between DNA and proteins in young leaves, which, of course, contain free DNA too.
The most convenient extraction of NA from both young and old leaves has been obtained by the modified method of Konarev and Tjuterev, where extraction is occuring in an alkali media (pH 7.6), and the last reextraction at higher temperature (65 °C) in an acidic media (pH 6.0). Preparations yield obtained by this procedure was satisfactory and the characteristic values for quality were in the range of values for native NA.
U ovom je radu ispitivana težina ekstrahiranoga kalcija iz komadića
dentina zdravih zubi mladih i starih osoba djelovanjem mliječne kiseline (pH 3,3). Korištena je metoda AAS, a rezultati su izraženi
...Iig/mm2/h. Također je prikazan koeficijent smjera inicijalne brzine otapanja kalcijevih iona mladih i starih uzoraka različitoga lokaliteta.
U obje skupine uzoraka najveća se količina izdvojila u prvome satu.
U mladim uzorcima taj se proces odvijao brže, ali je samo u trećem
ispitivanju ta razlika bila statistički vjerodostojna (p<0,05). Srednje vrijednosti početnih brzina također pokazuju da je inicijalna brzina otapanja kalcijevih iona veća u mladim nego u starim uzorcima. Razlike u topljivosti pojedinih uzoraka koje smo dobili u našim rezultatima pokazuju, da svaki uzorak ima svoj dijagram topljivosti u
kiseloj sredini, što. se povezuje s rasporedom i omjerom kalcijeve soli u uzorcima.
Prikazan je slučaj bolesnice s implantiranom mitralnom valvulom učinjena je ekstrakcija radiks relikta prvog gornjeg lijevog molara. Pravilnom premedikacijom i daljom medikamentnom terapijom zahvat ...je obavljen bez znakova hemoragije poslije vađenja a nije nikakvih komplikacija.
U okviru ispitivanja zdravstvene ispravnosti posuđa od nehrđajućeg čielika obvezatno je određivanje specifične migracije kroma, nikla i mangana u 4%-tnu octenu kiselinu pod određenim uvjetima vremena ...i temperature. Rutinskom kontrolom uvezenog posuda u većem je broju uzoraka ustanovljena više ili manje povišena specifična migracija u odnosu prema zakonski dopustivim vrijednostima za krom i/ili nikal, a rjeđe i za mangan. Dodatna obavljena ispitivanja pokazala su da su kod većine neispravnih uzoraka, nakon ponovljene (druge) ekstrakcije, nađene vrijednosti za sva tri metala unutar dopustivih granica. Na temelju dobivenih podataka i uzimajući u obzir dužu uporabu posuda, zaključeno je da je opravdana izmjena i dopuna postojećih zakonskih propisa uvođenjem ispitivanja ponovljenom ekstrakcijom.
Od 35 radnika testiranih metakolinskim testom u okviru zdravstvenog pregleda prije primanja na posao, 32 su imala uredan nalaz a trojica su pokazala povećanu nespecifičnu reaktivnost bronha. Nakon ...provedene selekcije, 10 radnika koji su na temelju urednog nalaza primljeni na rad u pogon elektrolitske ekstrakcije aluminija praćeno je u razdoblju od dvije do pet godina. U tom vremenskom intervalu nitko od njih nije razvio nikakve značajnije respiratorne tegobe. Kontrolni metakolinski testovi pokazali su također nalaze u granicama normoreaktivnosti. Jedino je jedan radnik razvio granični nalaz testa (PD20FEV1). Dobiveni rezultati, makar se radi o malom broju ispitanika, upućuju na opravdanost da se preporuči selekcija prilikom prethodnih pregleda korištenjem testa nespecifične reaktivnosti bronha. Međutim, kada je riječ o tvornici na koju su se ispitivanja odnosila, treba nažalost, navesti da je već početkom ratne agresije na Hrvatsku ona onesposobljena za daljnju proizvodnju.
