Detekcija apoptoze Žlender, Vilim
Arhiv za higijenu rada i toksikologiju,
06/2006, Volume:
57, Issue:
2
Journal Article
Peer reviewed
Open access
Apoptoza ili programirana smrt stanice ima vodeću ulogu u mnogim biološkim procesima. Njezino određivanje od velike je važnosti u različitim područjima moderne biologije, uključujući različite ...studije o embrionalnom razvoju, biologiji tumora te brojnim degenerativnim i imunodeficijentnim bolestima koje se povezuju s poremećajima u apoptozi. Mehanizam aktivacije i pokretanja apoptotskog procesa vrlo je kompleksan i prate ga specifične morfološke i biokemijske promjene stanica, koje često variraju ovisno o tipu stanica i specifičnim uvjetima okoline u kojoj rastu. Upravo zbog tog razloga bitno je upotrijebiti više različitih detekcijskih metoda koje će obuhvatiti različite stadije apoptoze kako bi se izbjegli lažno pozitivni ili lažno negativni rezultati. Svaka od danas poznatih i upotrebljavanih metoda ima svoje prednosti i nedostatke te ni za jednu od njih ne možemo reći da potpuno zadovoljava sve kriterije. U ovom radu prikazan je kratak pregled metoda koje se najčešće rabe pri detekciji apoptoza te osnovni morfološki i biokemijski procesi na kojima se te metode zasnivaju.
Tijekom evolucije višestanični organizmi uspjeli su razviti različite mehanizme zaštite od djelovanja štetnih utjecaja iz okoline. Apoptoza ili “programirana smrt stanice” jedan je od tih mehanizama ...kojim stanica aktivno uz utrošak energije i sintezu određenih proteina pokreće vlastitu smrt kao sastavni dio fizioloških procesa ili kao odgovor na određena patološka stanja. Poremećaji u apoptozi vezani su uz mnogobrojne bolesti jer nefunkcionalne, mutirane ili na bilo koji način oštećene stanice koje izmaknu kontrolnim mehanizmima i koje ne obavljaju svoju fiziološku funkciju, mogu dovesti do pojave teških bolesti. Stoga je pravilan tijek apoptotskih procesa ključan za pravilan embrionalni razvoj i za pravilno održavanje stanične homeostaze tkiva. Centralno je mjesto apoptoze proenzimska skupina cisteinskih proteaza u citoplazmi stanica. Kaskadna aktivacija tih proteaza ključna je u genezi morfoloških i biokemijskih apoptotskih promjena. Do danas je već poznat velik broj vanjskih i unutarnjih faktora koji dovode do pojave apoptoze. Poznavanje tih faktora i puno razumijevanje mehanizama apoptotskih procesa otvara potpuno nove mogućnosti u liječenju nekih teških, zasad neizlječivih bolesti.
İnterlöykin- 6 (IL-6) hücre sağ kalımı, çoğalması, farklılaşması, bağışıklık ve apoptosis gibi birçok hücresel olayda önemli rol oynar. Il-6 hem konakçı bağışıklık savunma mekanizması hem de büyüme ...ve farklılaşma gibi çeşitli malignitelerin düzenlenmesinde yer almaktadır.Daha önce yapılan çalışmalar, artmış serum IL- 6 düzeylerinin birçok kanser türünde ilerlemiş tümör evreleri ve hastalarda kısa hayatta kalım süreleri ile ilişkili olduğunu ortaya koymuştur. Sunulan çalışmada IL-6 ‘nın HepG2 hücrelerinde kaspaz 3, kaspaz,9 ve kaspaz 1 aktiviteleriüzerine etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır.Çalışma materyali olarak hepatoselüler karsinoma hücre hatta olan HepG2 hücreleri kullanılmıştır. IL-6 uygulanan ve uygulanmayan (kontrol) hücreler 24 saat boyunca kültüre edilmiş. IL-6 ‘nın HepG2 hücrelerinde kaspaz 3, kaspaz,9 ve kaspaz 1 düzeyleri üzerine etkileri ticari kit ile kolorimetrik olarak ölçülmüştür. IL-6 uygulanan HepG2 hücrelerinde kaspaz 1 ve kaspaz 3 düzeyleri kontrol hücrelerine göre artmış kaspaz 9 düzeyleri ise azalmıştır.Daha önce yapılan çalışma sonuçları IL-6’nın tümör hücrelerinde hücre çoğalmasını ve anti-apoptotik etki arttırmak gibi, önemli tümör gelişimini destekleyici özelliklerinin bulunduğunu göstermiştir. Bilinenin aksine, kaspaz 3 aktivitesinin artışı ile, IL-6 ilavesi HepG2 hücrelerinde apoptotik yolak üzerinde etkili olduğu görülmüştür.
PDF
