31.
汉黄芩素诱导人卵巢癌细胞A2780凋亡及对细胞端粒酶活性的影响
黎丹戎; 侯华新; 张玮 ...
癌症,
2003, Volume:
22, Issue:
8
Journal Article
R730%R96; ...
背景与目的:诱导肿瘤细胞凋亡和调节端粒酶的活性可能成为肿瘤治疗的一条新途径,体内、外实验表明,汉黄芩素具有抗氧化活性和抑制肿瘤细胞生长的功效.本研究旨在评价汉黄芩素诱导卵巢癌A2780细胞凋亡作用和抑制端粒酶活性的能力.方法:应用MTT法、荧光显微镜及琼脂糖凝胶电泳等方法检测汉黄芩素对人卵巢癌细胞A2780的作用;利用TRAP-ELISA方法观察药物处理前后细胞端粒酶活性的变化.结果:汉黄芩素明显抑制A2780细胞增殖,抑制作用呈时间和浓度依赖性,48 h的IC50为85 μg/ml;用浓度为50、100μg/ml的汉黄芩素作用A2780细胞48 h,细胞出现明显的凋亡形态学改变,琼脂糖凝胶电泳出现典型的DNA梯状条带.端粒酶的活性随着汉黄芩素浓度的升高而降低;当汉黄芩素浓度大于200μg/ml时,A2780细胞端粒酶的活性受到明显的抑制.结论:50～250μg/ml汉黄芩素可抑制卵巢癌A2780细胞增殖和诱导细胞凋亡,其抗肿瘤作用机制与诱导凋亡有关,抑制端粒酶活性可能起部分作用.
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32.
Fusion expression of human defensin hβD-3 gene in Escherichia coli
Kong Jie, South China Agricultural University, Guangzhou (China),College of Life Science; Zeng Zhen, South China Agricultural University, Guangzhou (China),College of Life; Wu Zhiwei, South China Agricultural University, Guangzhou (China),College of Life
Hua nan nong ye da xue xue bao,
Oct. 2012, Volume:
33, Issue:
4
Journal Article
研究了人类防御素hβD-3基因在大肠埃希菌细胞中的融合表达，采用pET-32a(＋)载体在BL21(DE3)溶原菌中进行了F-hβD-3蛋白的融合表达.结果表明，F-βD-3蛋白的表达量达到127.23μg/mL，融合蛋白经镍柱亲和层析与肠激酶酶切后，最终得到hβD-3蛋白的量为18.17μg/mL.经对大肠埃希菌K12D31的抑菌试验鉴定，肠激酶酶切后产物为有抑菌活性的重组hβD-3蛋白。
...
The fusion expression strategy of human beta defensin 3 (hβD-3 ) gene in Escherichia coli cells in the fusion expression by pET-32a(＋) vector was studied. Fusion expression of F-βD-3 protein was performed in lysogenie bacterium BL21 ( DE3 ) by pET-32a(＋) vector. The results showed that the production of F-βD-3 protein was 127.23 μg/mL. After nickel column chromatography and enterokinase cleavage, the fusion protein production finally obtained was 18.17μg/mL. Recombinant hβD-3 protein products were identified to possess inhibitory activity by bacteriostatic test on E. coli K12D31.
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33.
大鼠肝癌细胞与间充质干细胞药敏相关性研究
周思朗; 李鹏; 曹漫明 ...
癌症,
2006, Volume:
25, Issue:
8
Journal Article
R735.7; ...
背景与目的:探索针对肿瘤干细胞的药物敏感实验,对提高肝癌等实体瘤化疗有效率意义重大.在肝癌中,来自于骨髓干细胞的卵圆细胞是对应的成体干细胞.鉴于目前肿瘤干细胞和卵圆细胞分离困难,我们研究肝癌大鼠间充质干细胞与肿瘤细胞药敏相关性,探讨利用间充质干细胞代替肝癌肿瘤干细胞进行药物敏感实验的可能性.方法:以二乙基亚硝胺为诱癌剂制造大鼠肝癌模型.分离培养间充质干细胞与肝癌细胞,MTT法检测阿霉素(0.2 μg/ml)、氟尿嘧啶(5μg/ml)及顺铂(1μg/ml)作用24h对细胞抑制率.化疗药物作用后的肝癌细胞移植裸鼠,6周后测量移植瘤重量.阿霉素、氟尿嘧啶及顺铂对这两种细胞抑制率以及对应药物作用后肝癌细胞移植瘤重量间进行相关性分析.结果:①3种药物对肝癌细胞抑制率与其作用肝癌细胞后移植瘤重量间进行相关性分析,具体偏相关系数为:阿霉素,0.6307(P＞0.05);氟尿嘧啶,0.4358(P＞0.05);顺铂,0.7080(P＞0.05);②3种常用肝癌化疗药物对肝癌大鼠间充质干细胞抑制率与对肝癌细胞间抑制率进行相关性分析,具体偏相关系数为:阿霉素,0.6316(P＞0.05);氟尿嘧啶,0.4214(P＞0.05);顺铂,0.5943(P＞0.05);药物对大鼠间充质干细胞抑制率与对应药物作用后肝癌细胞移植瘤重量有较好负相关性,具体偏相关系数为:阿霉素,-0.8308(P＜0.05);氟尿嘧啶,-0.8991(P＜0.01);顺铂,-0.8311(P＜0.05).结论:化疗药物对肝癌细胞抑制率与对应药物作用后肝癌细胞移植瘤重量无相关性,常规药物敏感实验不能完全反映肝癌增殖侵袭能力.化疗药物对间充质干细胞抑制率与对应药物作用后肝癌细胞移植瘤重量有负相关,可以较好地反映肝癌细胞增殖侵袭能力.
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34.
去甲斑蝥素对人乳腺癌细胞系的凋亡诱导作用及bcl-2基因的表达
戎煜; 梁福佑; 陈莉 ...
癌症,
2000, Volume:
19, Issue:
12
Journal Article
R737.905; ...
目的:探讨去甲斑蝥素抗肿瘤作用的分子机制.方法:用10μg/ml去甲斑蝥素处理体外培养的人乳腺癌细胞系MCF-7.处理后,在不同时间点,采用普通光镜、电子显微镜观察去甲斑蝥素对乳腺癌细胞的诱导凋亡现象.利用流式细胞仪分析凋亡细胞百分比,用蛋白印迹杂交方法对凋亡抑制基因bcl-2的表达情况进行检测.结果:经10μg/ml去甲斑蝥素处理12h后,可观察到MCF-7细胞变形、出泡,从培养瓶底脱离.细胞染色和电子显微镜可观察到染色质浓聚、边集,且随着药物作用时间的延长,凋亡细胞百分比逐渐增加.与对照组相比,凋亡抑制基因bcl-2的表达降低.结论:诱导肿瘤细胞凋亡可能是去甲斑蝥素抗肿瘤作用的分子机制之一.
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35.
IL-12转染对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响及其机制
王晶; 张长青; 刘娟 ...
癌症,
2007, Volume:
26, Issue:
12
Journal Article
R73-36; ...
背景与目的:卵巢恶性肿瘤发病率、复发率、转移率均较高,有研究表明IL-12具有明显的抗肿瘤作用.本研究探讨白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)对人卵巢癌SKOV3细胞生长抑制作用机制及其对裸鼠皮下种植瘤成瘤能力的影响.方法:应用脂质体转染技术将含有小鼠IL-12全长基因的质粒转染到SKOV3细胞(SKOV3/IL-12组),同时以空白质粒载体转染SKOV3细胞(SKOV3/neo组)和未转染SKOV3细胞作为对照.ELISA法检测3组细胞上清中IL-12表达.MTT法检测3组SKOV3细胞的抑制率和细胞倍增时间.建立裸鼠皮下卵巢癌种植模型,分别接种SKOV3/IL-12、SKOV3/neo、SKOV3细胞,观察肿瘤生长情况.ELISA法检测裸鼠血清中IL-12及γ-干扰素(gamma interferon,IFN-γ)的表达,免疫组化法检测裸鼠种植瘤中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、微血管密度(microvessel density,MVD)及干扰素诱生蛋白-10(IFN-gamma-inducible protein 10,IP-10)的表达.结果:转染48、60 h后细胞上清中IL-12蛋白表达量,SKOV3/IL-12组(473.0±38.0)pg/ml、(522.0±32.0)pg/ml高于SKOV3/neo组(16.0±1.3)pg/ml、(18.0±1.6)pg/ml及SKOV3组(16.0±1.2)pg/ml、(17.0±1.4)pg/ml(P＜0.01).SKOV3/IL-12组细胞增殖抑制率为63.7%,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01),SKVO3/IL-12组细胞倍增时间(45.8±2.7)h明显长于SKOV3/neo细胞组(27.6±2.2)h和SKOV3组(28.2±2.1)h(P＜0.01).裸鼠皮下卵巢癌种植模型中,SKOV3/IL-12组裸鼠成瘤率(5/8)低于对照组(8/8)(P＜0.01);平均成瘤时间(15.0±5.0)天长于SKOV3/neo组(7.9±3.2)天和SKOV3组(7.8±2.4)天(P＜0.01);SKOV3/IL-12组种植瘤体积、重量和裸鼠体重低于SKOV3/neo组和SKOV3组(P＜0.01),种植瘤生长速度缓
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36.
银莲花素A对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑制作用
王明奎; 丁立生; 吴凤锷
癌症,
2008, Volume:
27, Issue:
9
Journal Article
R73-36; ...
背景与目的:有研究证明,从两头尖中分离得到的三萜皂甙银莲花素A在体外具有较好的抑瘤活性.本研究将观察银莲花素A在体内对小鼠移植瘤的抑制活性.方法:MTT法检测银莲花素A对人鼻咽癌KB细胞和人卵巢癌SKOV3细胞的抑制率.体内实验选取小鼠肉瘤S180细胞、小鼠肝癌H22细胞和小鼠宫颈癌U14细胞.观察银莲花素A注射给药对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑瘤率,以及灌胃给药对小鼠肉瘤S180移植瘤的抑瘤率.测定银莲花素A的急性毒性.结果:银莲花素A在体外对KB细胞和SKOV3细胞的IC50分别为4.64 μg/mL和1.40 μg/mL.4.5 mg/kg银莲花素A腹腔注射对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑瘤率分别为60.5%、36.2%和61.8%.200 mg/kg灌胃给药时抑瘤率为64.7%.灌胃给药和腹腔注射银莲花素A的LD50分别为1.1 g/kg和16.1 mg/kg.结论:银莲花素A在体内外均具有较好的抑瘤作用,体内可抑制小鼠移植瘤的生长,是一个有潜力的抗癌药物.
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37.
紫草素衍生物SYUNZ-7的抗肿瘤作用及其机制的初步研究
黄河; 谢冰芬; 朱孝峰 ...
癌症,
2005, Volume:
24, Issue:
12
Journal Article
R282.71%R797.1; ...
背景与目的:实验证明天然紫草素类化合物及其衍生物具有不同程度的细胞毒作用和抗肿瘤作用.本实验研究紫草素萘茜类衍生物2或3,11-双苯硫基-6-异己萘茜代号为SYUNZ-7的体内外抗肿瘤作用,并探讨其作用机制.方法:应用MTT法检测SYUNZ-7对多种肿瘤细胞的体外抗增殖作用,并计算IC50值;用小鼠移植肿瘤模型和人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型进行SYUNZ-7的体内抗瘤实验;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期的变化;免疫组化法检测SYUNZ-7对血管生成的影响.结果:SYUNZ-7对人肺癌细胞GLC-82、人鼻咽癌细胞CNE2、人口底癌细胞KB、人胃癌细胞MGC-803和人肝癌细胞HepG2的IC50值分别为(2.18±0.04)μg/ml、(4.17±0.09)μg/ml、(5.41±0.10)μg/ml、(6.41±0.14)μg/ml和(9.99±0.21)μg/ml.SYUNZ-7对GLC-82细胞的体外抗增殖作用最强.小鼠艾氏腹水癌EAC(实体型)抗瘤实验结果显示,在1 mg/kg、2 mg/kg、4 mg/kg和8 mg/kg的剂量下SYUNZ-7的抑瘤率分别为(40.5±0.1)%、(50.9±2.3)%、(61.3±1.8)%和(65.6±7.4)%(P＜0.01).1 mg/kg、2 mg/kg和4 mg/kg的SYUNZ-7对CNE2细胞裸小鼠移植瘤的抑瘤率分别为24.7%、38.3%和41.2%(P＜0.05).流式细胞术检测结果显示,SYUNZ-7能浓度依赖性和时间依赖性诱导CNE2细胞的凋亡;随着作用时间的延长或处理浓度的增加,SYUNZ-7可以阻滞CNE2细胞由S期向G2/M期转化.免疫组化结果显示:SYUNZ-7能够呈浓度依赖性抑制CNE2细胞裸小鼠移植瘤的血管生成.结论:紫草素萘茜类衍生物SYUNZ-7具有较强的体内外抗瘤作用,其抗瘤机制与诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期和抑制血管生成有关.
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38.
粉防己碱对人口腔上皮癌多药耐药KB-MRP1细胞株多药耐药性的逆转作用
陈晓松; 包明红; 梅晓冬
癌症,
2007, Volume:
26, Issue:
8
Journal Article
R739.85%R730.261%R73-351; 背景与目的:粉防己碱(tetrandrine,Tet)是从中草药粉防已的根块中提取的双苄基异喹啉生物碱,具有逆转P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)介导的肿瘤多药耐药(multidrug ...
resistance,MDR)作用.本研究探讨粉防己碱对人口腔上皮癌多药耐药细胞株KB-MRP1耐药的逆转作用及其可能的机制.方法:采用MTT法检测不同浓度粉防己碱对KB-3-1细胞和KB-MRP1细胞的增殖抑制效应;MTT法检测顺铂(cisplatin,DDP)、长春新碱(vincristine,VCR)、阿霉素(adriamycin,ADM)、依托泊苷(etoposide,VP-16)对KB-3-1、KB-MRP1细胞增殖的抑制作用及加用粉防己碱时的变化;采用流式细胞仪检测细胞内ADM蓄积程度以及细胞凋亡.结果:1.5μg/ml及更低浓度的粉防己碱对KB-3-1和KB-MRP1细胞无明显细胞毒性作用.KB-MRP1对VCR、ADM、VP-16和DDP的耐药倍数分别为21.23、38.39、12.47和1.31.加入1 μg/ml粉防己碱后,KB-MRP1对VCR、ADM、VP-16的耐药逆转倍数分别为4.96、5.85和4.27倍.加入1.5 μg/ml粉防己碱后,KB-MRP1对上述化疗药物的敏感程度提高更明显.1.5 μg/ml浓度的粉防己碱可明显提高ADM在KB-MRP1细胞内的蓄积,增强VCR诱导的KB-MRP1细胞凋亡.结论:粉防己碱可以逆转KB-MRP1细胞的多药耐药,逆转效果与药物浓度有关,逆转机制可能与增加细胞内化疗药物蓄积和增强化疗药物诱导的细胞凋亡有关.
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39.
反义抑制Survivin表达增强肝癌细胞系对阿霉素的敏感性
戴德坚; 陆才德; 郭俊明 ...
癌症,
2005, Volume:
24, Issue:
8
Journal Article
R735.7; 背景与目的:由于Survivin在大多数肿瘤细胞中过表达,而在正常成人终末分化组织中沉默,并参与了恶性肿瘤的发生、发展和化疗耐药,使其成为值得关注的抗癌治疗靶.反义寡核苷酸可用来封闭凋亡抑制基因Survivin,诱导肿瘤细胞凋亡或增强其化疗敏感性.本研究旨在探讨反义抑制Survivin表达对肝癌细胞系阿霉素敏感性的影响.方法:RT-PCR、Western ...
blot检测HepG2和HepG2/ADM细胞Survivin表达;MTF法评估HepG2和HepG2/ADM对反义复合物和阿霉素的敏感性;不同浓度的反义复合物分别转染HepG2和HepG2/ADM细胞,RT-PCR检测SurvivinmRNA表达;等辐射分析法评估不同浓度反义复合物和亚致死浓度阿霉素对HepG2和HepG2/ADM细胞的协同效应:流式细胞术检测激活型Caspase-3表达及凋亡率.结果:HepG2/ADM细胞Survivin mRNA是HepG2细胞的15倍,蛋白水平是HepG2的18倍.两种细胞均显示对反义复合物敏感并呈浓度依赖关系,反义复合物对HepG2和HepG2/ADM细胞的IC50分别为317.90 nmol/L和480.74 nmol/L,在500 nmol/L时抑制率达到71.10%和53.67%.ADM对HepG2和HepG2/ADM细胞的IC50分别为0.36 μg/ml和2.12 μg/ml,耐药指数为6.反义复合物剂量依赖性下调HepG2和HepG2/ADM细胞Survivin mRNA表达,对HepG2和HepG2/ADM细胞的IC50分别为271.93 nmol/和365.72nmol/L,400 nmol/L时表达水平分别下调了69.12%和60.01%.反义复合物和低浓度ADM联合使HepG2细胞的敏感性增加了6倍,使HepG2/ADM细胞的敏感性增加了4倍.联合处理激活了HepG2/ADM细胞Caspase-3活性,诱导细胞凋亡,激活型Caspase-3和凋亡率随反义复合物浓度的增加而逐渐递增.结论:反义抑制Survivin表达增强肝癌细胞系对阿霉素的敏感性,反义寡核苷酸和阿霉素联合可能是耐阿霉素肝细胞癌临床治疗的一种合理策略.
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40.
注射用重组人淋巴毒素α衍生物Ⅰ期临床耐受性研究
王风华; 李宇红; 李苏 ...
癌症,
2006, Volume:
25, Issue:
4
Journal Article
R73-36; ...
背景与目的:注射用重组人淋巴毒素α衍生物(rhLTα-Da)是我国研制的一全新抗肿瘤生物制品.本研究旨在考察肿瘤患者对rhLTα-Da的耐受性,确定人体的最大耐受剂量(MTD),推荐Ⅱ期临床试验剂量.方法:剂量递增Ⅰ期临床试验.rhLTα-Da剂量分3级,即10μg·(m2·d)-1、20μg·(m2·d)-1和33μg·(m2·d)-1,每剂量组至少有3例患者.将rhLTα-Da溶于5%葡萄糖注射液100 ml,静脉恒速滴注30 min,每天1次,连续5天.结果:24例患者入组.主要不良反应为发热和寒战,为Ⅰ～Ⅲ度,发生率79.2%(19/24),消炎痛可一定程度减轻寒战和发热,其它不良反应包括呼吸困难(3/24)、恶心呕吐(3/24)、头痛(4/24)、乏力(2/24)、血压下降(2/24)和放疗区皮肤感觉异常(2/24)等,血生化指标未见明显的肝肾功能异常.剂量限制性毒性见于33μg·(m2·d)-1剂量组,表现为1例Ⅲ度寒战,1例Ⅲ度发热,1例Ⅲ度呼吸困难.在本临床研究的剂量范围内,未见rhLTα-Da的明确疗效,但在个别肿瘤患者(恶性黑色素瘤、皮肤蕈样霉菌病和肾癌)中看到部分病变好转.结论:rhLTα-Da的MTD为33μg·(m2·d)-1,推荐Ⅱ期临床试验剂量为20μg·(m2·d).
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