Na osnovi predhodnih testiranj antimutagenega delovanja izvleèkov pridobljenihiz polstene mleènice Lactarius vellereus smo se odloèili za nadaljnje testiranje le te in se usmerili v iskanje najbolj ...aktivne frakcije glede antimutagenega uèinka. Preuèevali smo vpliv izvleèkov in frakcij dveh vzorcev glive polstene mleènice na mutacije povzroèene s posredno delujoèimi mutageni ( 2-amino-3metilimidazo 4,5-f kinolinom, aflatoksinom B1 in benzo(a)pirenom). Uporabili smo bakterijski test povratnih mutacij z metabolnoaktivacijo (t.i. Amesov test) in modificiran bakterijski test s postopkom predtretiranja in postretiranja. Kot testni organizem smo uporabili bakterije Salmonella typhimurium TA 98. Gre za bakterijski sev, ki ima na lokusu za sintezo histidinžbiotin mutacijo, zato bakterije v odsotnosti histidina ne morejo rasti, medtem ko mutirane bakterije lahko rastejo. Mutacije na bakterijah smo povzroèili s posredno delujoèimi mutageni, ki so vodile do povratnih mutacij, zaznanih kot rast od histidinžbiotina neodvisnih bakterij. Z dodatkom izvleèkov glive polstene mleènice smo preizkusali, èe se je v prisotnosti le teh, stevilo povratnih mutant zmanjsalo. Vsak izvleèek in frakcijo smo najprej testirali pri osnovni koncentraciji 1mgžplosèo, nato pa se pri petih razliènih koncentracijah (700, 500, 250, 100 gžplosèo) tako, da smo dobili razpon odvisnosti uèinka od koncentracije izvleèka. Rezultate smo tudi statistièno obdelali s Studentovim t-testom in vse tiste izvleèke in frakcije z izraèunanim t<0,05 oznaèili kot statistièno znaèilne. Pri studiji antimutagenega uèinka smo preuèevali tudi vplive pogojev shranjevanja vzorcev in topila, v katerem so bili raztopljeni izvleèki in frakcije. Ugotovili smo, da so izvleèki iz zmrznjenih gliv zmanjsali stevilo povratnih mutant, medtem ko iz sveze nabranih gliv ne. Lahko sklepamo, da verjetno v èasu zmrzovanja poteèejo kemièni procesi (npr. oksidacija), zaradi katerih uèinkovine v glivahzaènejo delovati antimutageno, saj normalno prisotne uèinkovine v glivahtega uèinka nimajo. Tudi topilo ima vpliv na antimutagen uèinek. Pri metanolu smo ugotovili toksiènost v kombinaciji z izvleèki glive polstene mleènice in mutageni, zato smo ga oznaèili kot neprimernega za pripravo izvleèkov in preuèevanje antimutagenega uèinka. Pri dimetilsulfoksidu nismo opazili nezeljenih interakcij v kombinaciji z dodanimi uèinkovinami, zato smo ga v nasi studiji uporabljali kot topilo za pripravo izvleèkov glive. Najmoènejse antimutageno delovanje smo ugotovili pri frakciji st.5 izvleèka iz zmrznjenih gliv polstene mleènice raztopljenega v dimetilsulfoksidu. Mutacije smo povzroèili z posredno delujoèimi mutageni ( 2-amino-3metilimidazo4,5-f kinolinom, aflatoksinom B1 in benzo(a)pirenom). Vzorec je zavrl nastanek mutacij povzroèenih z vsemi tremi mutageni. Pri tej frakciji smo uporabili tudi metodolosko razlièico bakterijskega testa povratnih mutacij z metabolno aktivacijo- postopka predtretiranja in postretiranja z namenom, da bi ugotovili na kateri stopnji mehanizma deluje frakcija st.5 antimutageno. Pri predtretiranju s frakcijo st.5 je bil uèinek slabsi kot pri hkratnem tretiranju, medtem ko je pri postretiranju prislo do toksiène reakcije. Sklepamo lahko, da vzorec prepreèuje aktivacijo 2-amino-3metilimidazo 4,5-f kinolina v aktivno obliko.Ugotovili smo, da gliva polstena mleènica deluje antimutageno na posredno delujoèe mutagene, vendar jepotrebno narediti se dodatne poskuse z neposredno delujoèimi mutageni in ugotoviti, katera spojina ali zmes spojin je odgovorna za ta uèinek. Zanima nas tudi mehanizem prepreèevanja oz. popravljanja poskodb DNK in to predvsem vsesalskih celicah, saj je ta test dokaj dober pokazatelj antimutagenih uèinkov, ki bi se lahko prenesle na celice humanega izvora.
Type of material - undergraduate thesis
Publication and manufacture - Ljubljana : [Mlakar J.], 2003
National Institute of Biology and BF, Department of Biology, Ljubljana
BF oddelek za biologijo dn 581 MLAKAR J. Antimutagena IN: 0033358
available - reading room
Shelf entry
Adding material to shelf was successful.
Adding material to shelf failed.
It was not necessary to add the material to the shelf.
Bibliographic material was successfully added on shelf.
Adding bibliographical material on shelf was not successful.
Material is already on the shelf.
Permalink
URL:
Impact factor
Access to the JCR database is permitted only to users from Slovenia. Your current IP address is not on the list of IP addresses with access permission, and authentication with the relevant AAI accout is required.
Year
Impact factor
Edition
Category
Classification
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
Select the library membership card:
DRS,
in which the journal is indexed
Database name
Field
Year
Links to authors' personal bibliographies
Links to information on researchers in the SICRIS system
Subject headings in COBISS General List of Subject Headings
Select pickup location
The material from the parent unit is free. If the material is delivered to the pickup location from another unit, the library may charge you for this service.
