UP - logo
Fakulteta za farmacijo, Ljubljana (FFALJ)
  • Razvoj kromatografskega pristopa za vrednotenje vsebnosti kolagena v prehranskih dopolnilih = Development of a chromatographic approach for evaluation of collagen content in food supplements : enoviti magistrski študij farmacija
    Kurent, Ema, farmacevtka
    Kolagen je najbolj zastopan protein pri ljudeh in živalih. Uživanje prehranskih dopolnil s kolagenom ima pozitivne učinke predvsem na kožo in sklepe. Ker ima kolagen kompleksno strukturo, za ... karakterizacijo uporabljamo več metod, kot so spektroskopske, kromatografske in druge. Namen magistrske naloge je bil razviti in optimizirati več enostavnih kromatografskih metod za vrednotenje vsebnosti kolagena v prehranskih dopolnilih. Osredotočili smo se na reverznofazno in izključitveno kromatografijo. Pri optimizaciji smo preizkusili različne kolone, mobilne faze, gradiente in pretoke. Najprimernejšo metodo smo izbrali iz vidika ločbe, oblike kromatografskih vrhov in časa analize enega vzorca. Izključitveno kromatografijo smo uporabljali zgolj za kvalitativno vrednotenje velikosti kolagenskih peptidov v prehranskih dopolnilih. Poleg tega smo razvili tudi štiri reverznofazne kromatografske metode, ki omogočajo kvantitativno določitev kolagena za različne priprave vzorcev. Vsebnost kolagena smo določali v intaktnih hidrolizatih kolagena in v encimsko hidroliziranem vzorcu, pri katerem smo določali vsebnost kolagena preko tripeptida Gly Pro Hyp. Hidroliziran vzorec smo tudi derivatizirali do fluorescenčnega produkta in zanj razvili kromatografsko metodo s fluorescenčno detekcijo. S četrto metodo smo vsebnost kolagena določali po bazični hidrolizi kolagena do aminokislin, pri čemer smo derivatizirali hidroksiprolin. Razvite reverznofazne kromatografske metode smo validirali v skladu s smernicami ICH. Vse metode so ustrezale postavljenim kriterijem sprejemljivosti. Razvite kromatografske metode smo primerjali s predhodno postavljenimi spektroskopskimi metodami. Kromatografske metode so bolj selektivne in nekatere omogočajo razlikovanje med ribjim in govejim kolagenom. Z vidika stabilnosti vzorcev, validacijskih parametrov in enostavnosti se je kot najboljša izkazala metoda, s katero določamo vsebnost kolagena v intaktnih hidrolizatih kolagena. Z razvitimi metodami smo analizirali trinajst prehranskih dopolnil in ugotovljene vsebnosti primerjali z navedenimi. Vsebnosti za večino kolagenskih hidrolizatov so bile znotranj intervala 80 in 115 %, kar je v skladu s pričakovanji, saj je regulativa za prehranska dopolnila manj stroga kot za zdravila. Z različnimi metodami smo dobili primerljive rezultate, metodologija pa ustreza predvidenemu namenu uporabe.
    Vrsta gradiva - magistrsko delo ; neleposlovje za odrasle
    Založništvo in izdelava - Ljubljana : [E. Kurent], 2024
    Jezik - slovenski
    COBISS.SI-ID - 199596547

Signatura – lokacija, inventarna št. ... Status izvoda Rezervacija
Knjižnica
emšf 613.2 KURENT EMA Razvoj 0000001401
IN: 0018197 Knjižnica
emšf 613.2 KURENT EMA Razvoj 1401
IN: 0018197 		prosto - za čitalnico
loading ...
loading ...
loading ...

Vnos na polico