UP - logo
Fakulteta za farmacijo, Ljubljana (FFALJ)
  • Optimizacija spektroskopskih metod za vrednotenje vsebnosti kolagena v prehranskih dopolnilih = Optimization of spectroscopic methods for evaluation of collagen content in food supplements : enoviti magistrski študij farmacija
    Umek, Urša
    Kolagen je najbolj zastopan protein v človeškem telesu in ima pomembno vlogo pri ohranjanju strukture različnih tkiv. Zaradi njegovih učinkov na kožo, kosti, sklepe in mišice najdemo na trgu vedno ... več prehranskih dopolnil s kolagenom. Kolagen ima kompleksno strukturo, zato za njegovo karakterizacijo uporabljamo več različnih analiznih metod. Glavni namen magistrske naloge je bila optimizacija enostavnih spektroskopskih metod za vrednotenje vsebnosti kolagena v prehranskih dopolnilih. Osredotočili smo se na UV-VIS in fluorimetrično metodo. Z metodo UV-VIS vsebnost kolagena določamo posredno preko aminokisline 4-hidroksiprolin, ki nastane po kemijski hidrolizi kolagena. Fluorimetrična metoda pa temelji na encimski razgradnji kolagena do tripeptidov, ki jih kompleksiramo do fluorescirajočega produkta. Pri optimizaciji obeh metod smo spreminjali pogoje hidrolize kolagena in derivatizacijske reakcije ter izbirali tiste, s katerimi smo poenostavili postopek priprave vzorcev in hkrati dosegli čim večjo občutljivost in ustrezno ponovljivost metode. Metodi smo ovrednotili v skladu s smernicami ICH. Obe metodi sta ustrezali postavljenim kriterijem sprejemljivosti. Z vidika linearnosti, analiznega območja, točnosti, natančnosti in nižje meje določitve je boljša fluorimetrična metoda. Ovrednotili smo tudi stabilnost vzorcev kolagena in 4-hidroksiprolina in ugotovili, da moramo pri fluorimetrični metodi vzorce po dodatku vseh reagentov pomeriti v roku 2 ur od priprave, pri metodi UV-VIS pa v roku 4 ur od priprave. Obe metodi smo uporabili za ugotavljanje vsebnosti kolagena v dvanajstih prehranskih dopolnilih. Ugotovljene vsebnosti smo primerjali z navedenimi in ugotovili, da so bile v območju med 78 in 130 % navedene vsebnosti, kar je v skladu s pričakovanji glede na ohlapno regulativo za prehranska dopolnila. Z obema metodama smo dobili primerljive rezultate za vsebnost kolagena, a nobena v celoti ne ustreza postavljenim kriterijem sprejemljivosti; metoda UV-VIS je zaradi večjega sipanja rezultatov bolj uporabna kot semi-kvantitativna metoda, fluorimetrična metoda pa ima velik potencial za vrednotenje vsebnosti kolagena v prehranskih dopolnilih. Razvita analizna metodologija je ustrezna za predvideni namen uporabe, a je smiselna nadaljnja optimizacija obeh uporabljenih metod in souporaba komplementarnih, bolj selektivnih kromatografskih metod.
    Vrsta gradiva - magistrsko delo ; neleposlovje za odrasle
    Založništvo in izdelava - Ljubljana : [U. Umek], 2021
    Jezik - slovenski
    COBISS.SI-ID - 79081987

Signatura – lokacija, inventarna št. ... Status izvoda Rezervacija
Knjižnica
emšf 66.02 UMEK URŠA Optimizacija
IN: 0017074
Knjižnica
emšf 66.02 UMEK URŠA Optimizacija
IN: 0017074
prosto - za čitalnico
loading ...
loading ...
loading ...